Финкельштейна формула: расчет питания для детей первого года жизни

Джордж Бирнбаум в 2015 году на канале Fox News.

Чтобы понять Бирнбаум , вы должны оглянуться назад, сквозь жестокую политику Израиля 1990-х годов, на Вашингтон 1970-х годов, округ Колумбия, где новая профессия, известная как политический консультант, разрабатывала новый набор инструментов для приведения людей к власти. .Там вы найдете духовного отца Бирнбаума, Финкельштейна.

Начиная с конца 1960-х годов Финкельштейн был одним из немногих, кто заново изобрел индустрию политического консалтинга в Нью-Йорке. В дальнейшем он будет помогать президентам и сенаторам, создавать резкий стиль телевизионной рекламы и воспитывать поколение протеже.

Финкельштейн не так известен, как его современник Роджер Эйлс, но он является скрытым звеном, проходящим через современную Республиканскую партию, ведущим от либертарианской иконы Айн Рэнд к цинизму Ричарда Никсона и, наконец, к Трампу.Финкельштейн был ребенком из Нью-Йорка. Сын таксиста, он познакомился с Рэндом, когда учился в Колумбийском университете в начале 1960-х годов. Некоторое время он проработал компьютерным программистом на Уолл-стрит, прежде чем к концу десятилетия стал одним из первых приверженцев искусства проведения опросов.

Слева направо: Пол Карран, одноразовый кандидат от республиканцев на пост губернатора Нью-Йорка, Уитни Норт Сеймур, бывший прокурор США в Южном округе Нью-Йорка, и Артур Финкельштейн, 8 июня 1983 года.

Именно тогда Финкельштейн начал разработку политического метода, который теперь читается как практическое руководство для современного правого популизма. Предпосылка Финкельштейна была проста: все выборы решаются еще до их начала. Большинство людей знают, за кого они проголосуют, что поддерживают и против чего выступают. Финкельштейн считал, что их очень трудно убедить в обратном. Деморализовать людей намного проще, чем мотивировать их.А лучший способ победить — деморализовать сторонников оппонента. Это то, что Трамп сделал с большим успехом против Хиллари Клинтон, и что он имел в виду, когда после выборов поблагодарил чернокожих американцев за то, что они не голосовали.

Финкельштейн давно изучал важные политические тенденции и остановился на простых вопросах, которые могли нанести наибольший ущерб. В конце концов, заметил он, обычно все сводится к одним и тем же проблемам: наркотики, преступность и раса. Это вопросы, которые создают наибольшее политическое разделение, — написал он в записке Белому дому Никсона в 1970 году.

Целью Финкельштейна было максимально поляризовать электорат, настроить одну сторону против другой. Топливо: страх. «Опасность должна быть представлена ​​как исходящая слева», — посоветовал Никсону 25-летний Финкельштейн.

Он утверждал, что тот, кто не нападет первым, будет избит. И Финкельштейн сделал вещи личными. Каждой кампании нужно победить врага. Он развил негативную агитацию в прием, который он назвал «голосованием противников» — чтобы демонизировать врага так сильно, что даже самый ленивый избиратель захотел бы выйти и проголосовать, просто чтобы отвергнуть его.

В телевизионных кампаниях противников заклеймили как «ультра-либеральных», «сумасшедших либералов», «до неприличия либералов» или «слишком либеральных для слишком долгого времени».

Финкельштейн также советовал бы своим клиентам не говорить о себе, а вместо этого сосредоточить свою кампанию на уничтожении своих противников. Он прославился тем, что превратил слово «либерал» в ругательство. В телевизионных кампаниях, которых не мог избежать ни один американец 1990-х годов, противников заклеймили как «ультралиберальных», «сумасшедших либералов», «до неприличия либералов» или «слишком долго слишком либеральных».Активисты назвали его идеологию «Finkel-Think». Это было просто, но эффективно. Друзья Финкельштейна часто заявляли, что никто не выбрал больше политиков, чем он.

Время от времени его работы окружали споры. В 1980-х, когда он работал на кандидата от республиканцев, его критиковали за то, что он проводил опрос избирателей, чтобы узнать, что они думают о еврейской идентичности его оппонента-демократа.

Ко времени своей смерти в 2017 году Финкельштейн оставил неизгладимый след в национальной политике, работая на Барри Голдуотера, Ричарда Никсона и Рональда Рейгана.Во время работы в качестве центрального участника кампании Рейгана в 1980 году появилась странно мрачная реклама: «Давайте сделаем Америку снова великой».

Сообщается, что в середине 2000-х он выполнял некоторую работу для Trump Organization — а позже говорил об «ошеломляющей» силе личности Трампа. Когда Трамп, наконец, баллотировался в президенты, его кампания была наполнена «детьми Артура» и друзьями: Ларри Вайцнером, Тони Фабрицио и его давним приятелем Роджером Стоуном.

Бирнбаум был одним из детей Артура.После окончания технологического института Флориды в начале 90-х он впервые попал в орбиту Финкельштейна в Вашингтоне, когда тот работал в Национальном республиканском сенаторском комитете. Работа Бирнбаума заключалась в том, чтобы каждое утро сообщать Финкельштейну последние результаты опросов. Бирнбаум вспомнил, что все, что делал Финкельштейн, основывалось на анализе его опросов, которые говорили, что никто не видит закономерностей, как Финкельштейн.

Бирнбаум был потрясен мозгом Финкельштейна и его прозрениями. Но он также обнаружил другого Артура.

Для внешнего мира Финкельштейн был загадкой, стратегом, который работал на правых. Но в частной жизни он был дружелюбным, веселым, блестящим и в то же время неприхотливым человеком, полным анекдотов из самых сокровенных кругов власти. Выросший в еврейской семье в Квинсе, он подшучивал над кошерными правилами. Он был ботаником, и в нагрудном кармане его синей рубашки на пуговицах было полно ручек и заметок.

В остальном душном мире политики Финкельштейн не расстегивал галстук, и его часто можно было увидеть гуляющим по офису в носках.Он мог это сделать, потому что считался правой половиной правого мозга. Финкельштейн однажды сказал другу, что глава администрации Рейгана поблагодарил его в письменной форме за то, что он «не снимал обувь большую часть времени», пока он находился в Овальном кабинете. Страсть Финкельштейна были выборы. Политика напомнила ему, сказал он студентам в Праге, «волны на пляже, которые выглядят одинаково, но со временем всегда становятся разными». Однако его любовь была к его двум дочерям — и к мужчине. Финкельштейн, который помог избрать радикальных республиканских ненавистников к геям, был геем.В 2004 году он женился на своей партнерше более 40 лет, и они были вместе до смерти Финкельштейна.

Через год после того, как Бирнбаум впервые встретил Финкельштейна, он снова столкнулся с ним в анонимном коридоре NRSC. Он сказал ему, что хочет работать на него, проводить за него голосование. И он тоже говорил на иврите, если у него когда-нибудь будет проект в Израиле.

Лидер правой оппозиции «Ликуда» Биньямин Нетаньяху и премьер-министр Израиля Шимон Перес, 26 мая 1996 г., в Тель-Авиве.

Убийство премьер-министра Израиля Ицхака Рабина 4 ноября 1995 года стало поворотным моментом для страны — а также для Финкельштейна и Бирнбаума.

Когда выборы его преемника были в спешке назначены, новичок бросил свою шляпу на ринг. Биньямин Нетаньяху, бывший корпоративный консультант правого крыла, не получил никаких шансов. Он выступал против Шимона Переса, легендарной фигуры, социал-демократа из поколения основателей Израиля, который хотел продолжить мирный процесс Рабина, который, как надеялось большинство людей, увенчается успехом.

Первоначально израильтяне насмехались над амбициями Нетаньяху, и опросы показали, что он отстает на 20%. Но, казалось бы, из ниоткуда партия Нетаньяху «Ликуд» начала заваливать страну зловещей рекламой. «Перес разделит Иерусалим» — гласил лозунг, хотя у Переса такого намерения не было. Подобные нападения на Переса появлялись по телевидению, по радио и в прессе.

В финальных теледебатах Перес попал в ловушку, расставленную Финкельштейном. Первым делом он попытался пояснить, что у него нет желания делить Иерусалим — именно эту тему Финкельштейн хотел, чтобы он поднял.Нетаньяху был хозяином дебатов.

В день выборов гонка между Пересом и Нетаньяху выглядела слишком близкой, чтобы ее можно было назвать. Около 22:00. телеканалы сообщили об очень близкой победе Переса, исходя из предварительных прогнозов. Согласно биографии Нетаньяху, он схватил телефон и позвонил «Артуру» — своему секретному руководителю кампании. Финкельштейн был в Нью-Йорке, но сразу ответил и сказал Нетаньяху, что ему не о чем беспокоиться. «Я всегда побеждаю близких».

Когда пришел окончательный подсчет, новым премьер-министром стал Нетаньяху: 50.С 49% до 49,51%.

«Артур всегда говорил, что вы воевали не против нацистов, а против Адольфа Гитлера. Не против «Аль-Каиды», а против Усамы бен Ладена ».

Победа Нетаньяху сделала Финкельштейна звездой. Как пишет газета Haaretz, он «навсегда изменил кампанию». Он также узнал, что его формула может работать за пределами Северной Америки. Опыт Финкельштейна стал очень востребованным.

В 1998 году Бирнбаум получил звонок. Это был Финкельштейн, который спрашивал, не хочет ли он работать в партии «Ликуд» в Израиле, мечта Бирнбаума сбылась. Именно здесь они стали одной командой: Финкельштейн стал капитаном, а Бирнбаум — его первым помощником. Пока Финкельштейн путешествовал между Нью-Йорком и Израилем, Бирнбаум следил за ним в Израиле, где он стал начальником штаба Нетаньяху, организовывал его выступления, представлял его перед прессой, а иногда даже присматривал за его детьми.

Триумф в Израиле ознаменовал начало новой эры. Именно тогда Финкельштейн обратился к Европе и к еще более тесному сотрудничеству с Бирнбаумом. С 2003 года эти два человека работали вместе в качестве глобальных политических консультантов, применяя формулу Финкельштейна к Восточной Европе и на Балканах, начиная с успешных избирательных кампаний в Румынии и Болгарии.

Премьер-министр Венгрии Виктор Орбан пожимает руку Нетаньяху, 19 июля 2018 г.

Избирательный шедевр Финкельштейна и Бирнбаума был создан в Венгрии и будет иметь последствия во всем мире.

Это началось в 2008 году, когда Орбан решил добиваться переизбрания. Его старый друг Биби, как известен Нетаньяху, познакомил его с двумя людьми, которые должны были привести его к успеху. Вскоре Финкельштейн и Бирнбаум применили свою формулу к предвыборной кампании Орбана — а затем ускорили ее.

Врагов было легко найти в Венгрии. Страна находилась в экономической корзине, и в 2008 году ее пришлось выручить. Меры жесткой экономии требовали их кредиторы во Всемирном банке, ЕС и МВФ. Финкельштейн и Бирнбаум посоветовали Орбану атаковать «бюрократов» и «иностранный капитал».

Орбан победил на выборах 2010 года с большинством в две трети голосов, поскольку страна сместилась вправо. Бирнбаум до сих пор удивляется тому, насколько это было просто: «Мы выбросили Социалистическую партию со стола еще до выборов.”

«Вам необходимо поддерживать базу под напряжением, следить за тем, чтобы в день выборов у них была причина выйти и проголосовать».

Бирнбаум и Финкельштейн, теперь входящие в ближайшее окружение Орбана, столкнулись с проблемой. Пока довольный победитель выборов начал переписывать конституцию, у них не было соперника. «Не было настоящего политического врага… не с кем было воевать», — вспоминал Бирнбаум.Ультраправые партии Йоббик и Социалистическая партия были разбиты, остальные рассыпаны на осколки. «У нас был действующий президент с историческим большинством, чего никогда раньше не случалось в Венгрии». Чтобы поддерживать это, им нужен был «высокий уровень энергии», — сказал Бирнбаум. «Вам необходимо поддерживать базу под напряжением, следить за тем, чтобы в день выборов у них была причина выйти и проголосовать», — сказал он. Им нужно было что-то мощное, например, «Построй стену!» Трампа.

«Это всегда помогает сплотить войска и сплотить население», когда у врага есть лицо, — пояснил Бирнбаум.«Артур всегда говорил, что вы воевали не против нацистов, а против Адольфа Гитлера. Не против «Аль-Каиды», а против Усамы бен Ладена ». Кто мог стать этим врагом в Венгрии теперь, когда Орбан был у власти — и хотел там остаться?

Орбан был занят созданием новой, более драматической истории нации. Венгрия, которая сотрудничала с нацистами, была изображена как жертва, окруженная внешними врагами, находящаяся в постоянной осаде сначала османов, затем нацистов, а затем и коммунистов.Миссия Венгрии была ясна: защищаться от врагов и защищать христианство от посягательств ислама и светских сил.

На этом фоне Финкельштейн получил прозрение. Что, если завеса заговора будет приподнята и появится темная фигура, контролирующая все? Кукловод. Кто-то, кто не только контролировал «большой капитал», но и воплощал его. Настоящий человек. Венгр. Странно, но знакомо.

Этим человеком был Сорос, сказал Финкельштейн Бирнбауму.

Бирнбаум был очарован: Сорос был идеальным врагом.

Вначале это почти не имело смысла. Зачем кампания против неполитика? Хотя он родился в Венгрии, Сорос не жил там много лет. Это был старик, известный на всю страну как покровитель гражданского общества. Он поддерживал оппозицию коммунистам до падения «железного занавеса», а впоследствии финансировал школьное питание для детей. В Будапеште он построил один из лучших университетов Восточной Европы.

Орбан даже получил деньги от Сороса: во время его пребывания в оппозиции его небольшой подпольный фонд Századvég издавал критические газеты, созданные на копировальной машине, за которую Сорос заплатил. Орбан также был одним из более чем 15 000 студентов, получивших стипендии Фонда Сороса «Открытое общество».Благодаря Соросу Орбан изучал философию в Оксфорде. Двое мужчин встретились только один раз: когда Сорос приехал в Венгрию в 2010 году после разлива токсичных веществ, чтобы выделить 1 миллион долларов в качестве чрезвычайных средств.

На самом деле не было причин восстанавливать против него в Венгрии.

Но Финкельштейн и Бирнбаум увидели в Соросе нечто такое, что сделало бы его идеальным врагом. Критика Сороса имеет давнюю историю, начиная с 1992 года, когда Сорос за одну ночь заработал 1 миллиард долларов, делая ставки против британского фунта.Для многих левых Сорос был стервятником. Но Сорос использовал свое внезапное положение для продвижения либеральных идей. Он поддерживал все, против чего были правые: защиту климата, равенство, Клинтонов. Он выступал против второй войны в Ираке в 2003 году, даже сравнивая Джорджа Буша с нацистами, и стал крупным спонсором демократов. Вскоре республиканцы стали ненавидеть его.

Но это было еще не все. Финкельштейн и Бирнбаум расширили свою деятельность на те страны, где Фонды открытого общества пытались создать либеральные местные элиты и движения за гражданские права: Украина, Румыния, Чешская Республика, Македония, Албания.Бирнбаум считал, что Сорос стоял за «социализм, который не подходит для этих областей». По словам Бирнбаума, Финкельштейн был более практичен в своем противостоянии Соросу, которого он видел просто как средство для достижения цели: «Это не было эмоциональным событием».

Двум консультантам не потребовалось много усилий, чтобы убедить Орбана взять на себя Сорос — премьер-министр Венгрии «очень доверял уму Артура», — сказал Бирнбаум. Кампания против Сороса была полезна для Орбана — и не только внутри страны.Внешне он понравился бы его русским соседям. Путин боялся так называемых цветных революций, подобных той, которая произошла на Украине, и арабской весны, и начал нападать на Сороса и его поддержку либеральных идей.

Работа двух мужчин на Орбана теперь является частью политической легенды Венгрии. Финкельштейн — почти мифическая фигура, не в последнюю очередь потому, что Орбан почти не упоминал свою роль публично. Его представители не ответили на запросы о комментариях по поводу Финкельштейна и Бирнбаума.

Бирнбаум также не сообщил точных деталей работы, которую они проделали для Орбана.Он не хотел обсуждать, были ли они составлены лозунгами или просто простыми концепциями, а также не сказал, насколько они контролировали саму кампанию.

Публичная кампания против Сороса по-настоящему началась 14 августа 2013 года, примерно за девять месяцев до следующих выборов. Все началось относительно тихо, со статьи в правительственной газете Heti Válasz, критикующей НПО, которые, как утверждалось, контролировались Соросом.

Затем венгерское правительство преследовало экологическую организацию Ökotárs, якобы контролируемую Соросом, которая получала финансирование из Норвегии и Швейцарии.Полиция ворвалась в их офисы и конфисковала компьютеры, в то время как правительство начало расследование их деятельности. В конечном итоге венгерские следователи останутся ни с чем, но не раньше, чем им удастся распространить имидж теневой сети иностранных НПО, управляемой Соросом.

«Идеальный враг — это тот, которого можно бить снова и снова, и он не будет давать ответный удар».

Орбан и его команда не остановились на достигнутом. К 2015 году кризис беженцев в Европе, отчасти спровоцированный войной в Сирии, придал смелости националистам по всему континенту. Поэтому, когда Сорос утверждал, что ЕС необходимо разработать «общий план» обращения с беженцами и подготовиться к работе с миллионами просителей убежища в год, он снова стал желанной мишенью для команды Орбана. 30 октября 2015 года Орбан выступил с речью, в которой заявил, что Сорос хотел ослабить страну и наводнить ее беженцами.

После этого атаки начались интенсивно и быстро.Любая организация, которая когда-либо получала деньги от фондов «Открытое общество», была изображена как «контролируемая Соросом». В правительственной прессе сотрудники НПО были охарактеризованы как «наемники», финансируемые иностранными державами. Все это было сделано с помощью серии сенсационных статей и официальных ответов членов правительства.

Крещендо было достигнуто в июле 2017 года, когда вся страна была облеплена рекламой с изображением лица Сороса и слоганом «Не позволяйте Джорджу Соросу смеяться последним!»

Лозунг «Стоп Сороса» повторялся бесконечно, везде. На подделанных фотографиях он идет рука об руку с союзниками через забор: забор Орбана, построенный для того, чтобы не дать беженцам проникнуть в Венгрию. Орбан утверждал, что Сорос поддерживает мафиозную сеть.

Осенью 2017 года администрация провела «общенациональную консультацию». Миллионы граждан получили анкеты, в которых они могли выбрать, поддерживают ли они «план Сороса», позволяющий миллиону людей из Африки и Ближнего Востока въезжать в Европу в год.

Сработало.Огромная часть страны обратилась против Сороса. Орбан выигрывал в 2014 и 2018 годах, оба раза с подавляющим большинством.

Сорос попал в ловушку. «Идеальный враг — это тот, кого можно бить снова и снова, и он не будет давать ответных ударов», — сказал Бирнбаум. «Если бы Сорос нанес ответный удар, это просто сыграло бы им на руку, подтвердив, что у него есть власть и влияние», — сказал Бирнбаум. Сорос и Фонд «Открытое общество» пытались противостоять обвинениям и нападкам и даже подали в суд на правительство Венгрии в Европейский суд по правам человека, но им не удалось выйти на политическую арену. Было бы немыслимо, чтобы 87-летний Сорос выступил против Орбана. «Мистер. Сорос — не политик », — сказал его помощник Майкл Вачон.

Несмотря на все последующее, Бирнбаум гордится своей кампанией против Сороса: «Сорос был идеальным врагом. Это было так очевидно. Это был самый простой продукт, его нужно было просто упаковать и продать ».

Продукт был настолько хорош, что он стал продаваться и стал мировым. В 2017 году итальянцы заговорили о финансируемых Соросом иммигрантских лодках, прибывающих на берег.В США некоторые люди подозревали, что Сорос стоял за караваном мигрантов, прибывшим из Центральной Америки. Польский депутат назвал Сороса «самым опасным человеком в мире». Путин снисходительно упомянул Сороса во время пресс-конференции с Трампом в Хельсинки. Трамп даже утверждал, что демонстрации против кандидата в Верховный суд Бретта Кавано спонсировал Сорос.

Сегодня работы Финкельштейна и Бирнбаума в Венгрии находят отклик повсюду. Бирнбаум опроверг предположение о том, что он проводил антисоросовские кампании за пределами Венгрии. Но, возможно, ему и не пришлось. Кто угодно мог взять идеи и воплотить их в жизнь. Финкельштейн и Бирнбаум превратили Сороса в мем. Правые сайты, такие как Breitbart или контролируемая Кремлем Russia Today, могли бы просто перенять венгерскую кампанию, перевести ее на другие языки и подкрепить ее местными аргументами.

Если правые движения хотят провести кампанию сегодня, они могут найти материалы Сороса в Интернете. Антисоросовские материалы — это глобализированное, свободно доступное и адаптируемое оружие с открытым исходным кодом.Бирнбаум сказал, что это общий знаменатель националистического движения.

Сорос стал мишенью демонстрантов в Македонии в 2017 году, когда в стране обсуждали, должен ли албанский язык стать официальным языком.

В кампании Орбана против Сорос на самом деле никогда не использовал слово еврей, но часто оно подразумевалось. Орбан сказал своим людям, что им придется сражаться с «врагом», который был «другим», у которого не было «дома». Антисемитские граффити можно было увидеть на рекламе «Стоп Сороса» — избиратели знали, что им говорят.

Финкельштейн и Бирнбаум создали монстра Франкенштейна, который нашел новую жизнь в Интернете. В этой похлебке — негодование по поводу его нападок на коммунизм и обвинения в том, что он коммунист; антиеврейские оскорбления и обвинения в том, что он нацист; и, прежде всего, старая смесь европейского антисемитизма.

Если вы сегодня поищете Сороса, вы сразу же найдете изображения его головы с щупальцами осьминога, еще одного классического антисемитского мотива. Даже сын Нетаньяху Яир опубликовал в 2017 году антисемитский мем, показывающий, что Сорос и рептилии контролируют мир.

«Наша кампания не сделала антисемитом никого, кто не был раньше. Может, мы просто рисовали новую цель, не больше. Я бы сделал это снова ».

Члены еврейской общины Венгрии начали протестовать против кампании Stop Soros в 2017 году.Посол Израиля осудил это. Когда Золтан Радноти, известный венгерский раввин, узнал, что кампанию возглавляют два члена еврейской общины, он был шокирован.

Антисемитизм, проистекающий из кампании Сороса, не может быть слишком удивительным, даже если Финкельштейн и Бирнбаум не хотели этого. Они импортировали древние темы и современные обиды в коммуникационные технологии 21 века. Что было нового: они превратили Сороса в своего центрального политического врага.

Обвинение Бирнбаума в том, что он виновен в антисемитизме.Он просто этого не видит. Он решил выступить в первую очередь потому, что хочет это опровергнуть. В конце концов, он наблюдательный еврей и член многих произраильских благотворительных организаций.

«Когда мы планировали кампанию, — сказал он, — мы ни секунды не задумывались о том, что Сорос — еврей». Бирнбаум утверждал, что тогда он даже не знал этого и никогда не работал с антисемитами.

Прежде чем работать с Орбаном, он связался с осведомленными кругами в Израиле, чтобы узнать, как Орбан относится к евреям. Он не слышал ничего, что могло бы его оттолкнуть — напротив, по его словам, Орбан боролся с антисемитизмом и даже дал своей первой дочери еврейское имя «Рахель».

В конце концов, «разве я не могу напасть на кого-то, потому что он еврей?» — спросил Бирнбаум.

Какими бы ни были их намерения, ругательства против Сороса только усилились, иногда со смертельными последствиями. В октябре 2018 года сторонник Трампа отправил Соросу посылку с бомбой. Пять дней спустя вооруженный преступник проник в синагогу в Питтсбурге, убив 11 человек. Нападавший считал себя участником борьбы с еврейским заговором, который, по его мнению, финансировал массовую миграцию, и говорил о караване и Соросе в социальных сетях.

Когда его спросили, разжигала ли кампания Сороса в Венгрии этот антисемитизм, Бирнбаум признал, что, оглядываясь назад, «это выглядит действительно плохо», но в то время это было правильное решение, нацелившись на Сороса, сказал он.

Через несколько месяцев после встречи в Берлине Бирнбаум отправился в отель Трампа в Вашингтоне, где его друг, бывший руководитель кампании Трампа Кори Левандовски, представлял свою новую книгу Враги Трампа . Келлианн Конвей зашла. Икра продавалась по 100 долларов за унцию.Бирнбаум поболтал с другими гостями и заказал московского мула.

Изменил ли он свое мнение о кампании Сороса? Есть сожаления?

«Антисемитизм — это нечто вечное, неизгладимое», — сказал Бирнбаум. «Наша кампания не сделала антисемитом никого, кто не был раньше. Может, мы просто рисовали новую цель, не больше. Я бы сделал это снова ». ●

Более ранняя версия этой статьи появилась в швейцарском еженедельнике Das Magazin.

ИСПРАВЛЕНИЕ

Янв.20, 2019, 15:47

Диаграмма, которая измеряет реакцию социальных сетей на Джорджа Сороса, находится в его офисе на Манхэттене, а не в офисе фондов «Открытое общество».

Ваш новорожденный | Педиатрия Owings Mills

НАЧАЛО РАБОТЫ

1. Кормите ребенка 8 раз в 24 часа (примерно один раз в 3 часа). Если ваш ребенок спит дольше трех часов в ночное время, возможно, вам придется дополнительно кормить его в дневное время.
2. Не пропускайте дневные кормления. Не будите малыша ночью после кормления с 23:00 до 12:00.
3. При грудном вскармливании предлагайте каждую грудь не дольше 15 минут. При кормлении смесью предлагайте по 2 унции при каждом кормлении.
4. При грудном вскармливании вы можете заменить одну бутылочку, начиная с 3-х недель.
5. При грудном вскармливании ребенок должен получать 1 мл (1 пипетка) витамина D или поливитаминов один раз в день.
6. При грудном вскармливании ребенок должен получать фторсодержащие капли после 6 месяцев до тех пор, пока ребенок не будет отлучен от груди или не менее половины его жидкости будет из смеси.
7. Купание : губка купайте ребенка водой с мягким мылом, пока пуповина не отпадет, затем принимайте полную ванну каждые 3 дня.
8. Уход за подгузниками : Очистите область подгузников салфетками без запаха или водой на тряпке для мытья посуды. Высушите попку ребенка на воздухе, затем нанесите крем (например, Triple Paste, Desitin, A&D ointment или Butt Paste) по мере необходимости.
9. Обрежьте ногти малышу наждачной доской.
10. Запланируйте первый визит ребенка на 3-5 дней после выписки из больницы.

ИСПЫТАНИЯ КРОВИ В ДЕТСКОМ ЯЗЫКЕ

Каждому младенцу, рожденному в штате Мэриленд, сдают анализ крови в яслях и еще раз при посещении офиса трехнедельного ребенка. Несколько капель крови вашего ребенка проверяют на наличие аномального гемоглобина (например, серповидно-клеточной анемии), гипотиреоза и некоторых других очень редких заболеваний (например, болезни фенилкетонури). Этот анализ крови новорожденного важен, потому что он выявляет эти редкие заболевания до того, как ребенок заболеет, и позволяет врачу назначать лечение для предотвращения развития симптомов.

МЛАДЕНЦЫ ​​ЕСТЬ МЛАДЕНЦЫ ​​

Все дети чихают, зевают, отрыгивают, икоту, выделяют газы, кашляют и плачут. Иногда они могут выглядеть косыми. Чихание — это то, как младенцы защищают носовые ходы от слизи и молока. Икота — это небольшой спазм диафрагмы, мышцы, которая помогает нам дышать. Икота часто прекращается после нескольких глотков воды. Кашель — это то, как новорожденный прочищает горло. Большая часть газов, которые выделяет ребенок, — это просто воздух, который был проглочен во время кормления.

ПЛАЧНЫЕ И СПУСТЫЕ ПЕРИОДЫ

Плач — это способ общения ребенка. Это почти никогда не указывает на боль. Когда ваш ребенок плачет, проверьте его / ее на очевидные вещи: мокрый, грязный, голодный, слишком горячий, слишком холодный. У многих здоровых младенцев ежедневные суетливые периоды. Они становятся длиннее и громче примерно до 6 недель. Они постепенно исчезают к возрасту 2–3 месяцев. Говорят, что у самых суетливых младенцев, которые сильно плачут, прижимая колени к груди часами, возникают колики. Вот несколько советов, как свести к минимуму суетливые периоды: Держите ребенка в вертикальном положении во время кормления и часто отрыгивайте ребенка. Осторожно покачайте ребенка, подпрыгивайте вместе с ним на мяче для упражнений или катайтесь с ним в машине. Во время сна пеленайте ребенка и играйте белый шум в детской (пылесос или компакт-диск с белым шумом). Если через две ночи эти предложения не помогли, позвоните врачу.

ЗАГРУЗКА МЛАДЕНЦЕВ НА НОЧЬ

Большинство младенцев спят от кормления до кормления в течение первой недели жизни.Обычно им требуется около 14 часов сна в течение каждых 24 часов в течение следующих нескольких месяцев. Некоторые дети спят подолгу, а другие часто дремлют. В течение первых четырех месяцев вы должны стремиться уложить ребенка спать по крайней мере на 3 часа в ночное время. После этого ожидайте, что ваш ребенок будет спать не менее 6 часов каждую ночь.

Чтобы заставить вашего ребенка спать больше ночью и меньше днем, попробуйте следующее: после дневного кормления отрыгните ребенка и постарайтесь не дать ему заснуть в течение получаса, прежде чем уложить его спать. После вечернего и ночного кормления отрыгните ребенка и немедленно уложите его спать. Постарайтесь уложить ребенка хотя бы немного бодрствовать, чтобы он научился успокаиваться.

Рвота и рвота

Срыгивание и эпизодическая рвота у новорожденных часто возникают. Если в остальном ваш ребенок выглядит здоровым, ничего делать не нужно. Срыгивание должно прекратиться, когда ваш ребенок станет старше. Если у вашего ребенка рвота после кормления или между ними, сообщите об этом своему врачу.

КОРМОВ

Младенцев можно кормить грудью или из бутылочки. Если вы еще не решили, какой метод использовать, мы будем рады обсудить плюсы и минусы каждого из них. Помните, что хотя дети, вскармливаемые смесью, будут расти и развиваться нормально, грудное молоко является идеальной пищей для младенцев. Кормите ребенка каждые 2–4 часа, всего восемь кормлений за сутки. Не будите малыша ночью, если он спит. Если ваш ребенок заплачет до того, как прошло 2 часа с момента последнего кормления, предложите ему соску или качните его. Не путайте сильное желание вашего ребенка сосать с голодом. Младенцы имеют потребность сосать сверх их потребности в еде. Большинство детей будут спать в течение 3 часов между кормлениями ночью после возраста одного месяца и будут спать не менее 6 часов между кормлениями в ночное время, начиная с возраста четырех месяцев.

кормление грудью

Многие матери считают полезным следующий график:

1. Покормите ребенка каждой грудью по 5 минут во время первого кормления.Увеличивайте продолжительность кормления каждой грудью на 1 минуту каждый день. Если ваша грудь сильно набухла, кормите ребенка дольше. В первые несколько дней следует ожидать, что соски будут болезненными, но не болезненными.
2. Отрыгните ребенка в течение пяти минут после кормления каждой грудью. Не продолжайте отрыгивать ребенка, если он плачет, так как ваш ребенок проглотит больше воздуха, чем он / она может изгнать, отрыгнув.
3. Начинайте каждое кормление последней предложенной грудью.
4. Постепенно увеличивайте время кормления каждой грудью до 15-20 минут.Ваш ребенок будет выводить 85% грудного молока всего за пять минут устойчивого, жесткого сосания. Старайтесь полностью опорожнять хотя бы одну грудь во время каждого кормления, даже если вашему ребенку вообще не нужно кормить грудью из второй груди. Молоко, которое выходит из вашей груди в конце (заднее молоко), имеет более высокое содержание жира и калорий, чем первое молоко (переднее молоко), и необходимо для того, чтобы ваш ребенок хорошо рос.
5. Сначала вы можете использовать часы, чтобы рассчитать время кормления.
6. Держите ребенка так, как вам удобнее.
7. После кормления вы можете наносить крем с ланолином на ареолы, но не на соски.
8. Носите бюстгальтер для кормления. Для удобства вы можете носить бюстгальтер даже во время сна.
9. Если вас беспокоит, что ваш ребенок не ест должным образом, позвоните в наш офис.

ПОДАЧА В БУТЫЛКИ

Смеси коровьего молока доступны в виде готового к употреблению, концентрата или порошка. Большинство мам используют концентрированную форму и разбавляют некипяченой водопроводной водой.Готовые к употреблению няньки дороги, но не требуют ни подготовки, ни охлаждения. Подготовьте 26 унций. концентрата или порошковой формулы, как указано производителем, разделите на 4 унции. бутылки, а затем охладить. Формулу можно хранить в холодильнике до 24 часов. Нестерилизованная водопроводная вода подходит для приготовления концентрированных и порошкообразных препаратов, если вы не используете колодезную воду. Необходимо проверить воду из колодца, чтобы убедиться, что она подходит для кормления младенцев. Вода из колодца безопасна для использования, если ее ежегодно проверять на наличие бактерий, нитритов и кислотности — ничего из этого не должно быть.Вымойте бутылки в посудомоечной машине или с помощью горячей воды из-под крана и средства для мытья посуды. Стерилизация бутылочек и смесей не требуется. Соски можно мыть в посудомоечной машине или горячей водой, а затем сушить на воздухе на сушилке, используя зубочистку через каждое отверстие для сосков.

ВИТАМИНЫ

Младенцы, находящиеся на исключительно грудном вскармливании, должны получать витаминные капли Тривизол или Поливизол ежедневно (1 мл в день) до тех пор, пока не начнется прием твердой пищи или пока по крайней мере 3 кормления в день не начнутся из смеси.Младенцам, которые находятся на исключительно грудном вскармливании, пользуются колодезной водой или живут в местах, где вода не содержит фтора, после 6 месяцев могут потребоваться добавки с фтором.

УХОД ЗА ПУПОМ И ОБРЕЗАНИЕМ

Обрезание не требует особого ухода и лечит в течение недели. Наносите тонкий слой вазелина после каждой смены подгузника, чтобы предотвратить прилипание раздраженной кожи к подгузнику.

Когда пуповина отделяется, обычно в возрасте 2–3 недель может возникнуть небольшое кровотечение.Точно так же основание пуповины может иметь неприятный запах и выделять небольшое количество гноя. Это нормально и является частью нормального процесса заживления — особого ухода не требуется. Сообщите нам, если на коже вокруг пуповины появилось покраснение.

ДВИЖЕНИЯ ПОЛУ

У большинства младенцев дефекация мягкая, нечеткая. Частота испражнения колеблется от 11 в день до одного раза в 2-3 дня. Младенцы на грудном вскармливании после 6 недель могут опорожняться нечасто, например, один раз в неделю.Опорожнение кишечника часто бывает золотисто-желтым, но обычно может меняться на зеленый. Младенцы часто плачут и краснеют, пытаясь опорожнить кишечник, даже если стул мягкий. Это не указывает на боль или «газ». Это обычная реакция на ощущение сокращения кишечника у новорожденного. Мойте руки после переодевания ребенка. Пожалуйста, позвоните нам, если дефекация затруднена или ваш ребенок испытывает сильную боль при дефекации.

БОЛЕЗНИ НОВОРОЖДЕННЫХ

Большинство, но не все дети, остаются здоровыми в течение первых трех месяцев жизни.Если у малыша, позвоните врачу:

1. внезапно становится желтым.
У
2. рвота после трех кормлений подряд.
У
3. более шести взрывных водянистых испражнений за 24 часа.
4. не может мочиться в течение 12 часов.
5. принимает менее 2 унций за три последовательных кормления.
6. чувствует себя безвольным.
7. имеет ректальную температуру выше 100 градусов F.
8. менее активен, чем обычно.
9. хнычет и плачет, несмотря на все, что ты делаешь.
10. «просто не кажется правильным».

Finkelstein Thompson LLP объявляет о расследовании деятельности Physician Formula Holdings, Inc.

ВАШИНГТОН — (BUSINESS WIRE) — Юридическая фирма Finkelstein Thompson LLP расследует потенциальные претензии от имени акционеров Physician Formula Holdings, Inc. (NASDAQ GS: FACE ) («Врачи» или «Компания») относительно предполагаемого приобретения Компании компанией Markwins International Corporation.По условиям сделки акционеры компании Physician получат 4,90 доллара за акцию наличными. Общая стоимость сделки составляет примерно 74,9 миллиона долларов.

Врачи в последнее время показывают хорошие результаты, сообщая об улучшении финансовых результатов в своих документах в SEC. Расследование сосредоточено на потенциальной несправедливости отношения к акционерам врачей, процессу, с помощью которого совет директоров компании рассматривает сделку, и потенциальных конфликтах интересов между членами совета врачей.

Если вы заинтересованы в обсуждении ваших прав в качестве акционера компании «Врачи» или у вас есть информация, касающаяся этого расследования, пожалуйста, свяжитесь с офисом Финкельштейна Томпсона в Вашингтоне, округ Колумбия, по телефону (202) 337-8000 или по электронной почте [email protected].

Finkelstein Thompson LLP провела более трех десятилетий, обеспечивая выдающееся представительство институциональных и индивидуальных клиентов в финансовых судебных процессах, и была назначена ведущим или со-юрисконсультом в десятках групповых исков акционеров.Более того, компания играла руководящие роли в делах, которые вернули инвесторам и потребителям более 1 миллиарда долларов.

Чтобы узнать больше о Finkelstein Thompson LLP, посетите наш веб-сайт www.finkelsteinthompson.com. Консультации адвоката. Предыдущие результаты не гарантируют аналогичных результатов.

Finkelstein Thompson LLP
Rosalee Thomas, 202-337-8000

Источник: Finkelstein Thompson LLP

: 1989 :: Решения Верховного суда Аляски :: Судебная практика Аляски :: Закон Аляски :: Право США :: Justia

774 стр.2д 786 (1989)

Дэвид ФИНКЕЛЬШТЕЙН, податель апелляции, v. Сандра СТАУТ, директор избирательного отдела Аляски, и Стивен А. Макалпайн, вице-губернатор Аляски, члены апелляции и МЫ. «Брэд» Брэдли, Интервьюер.

№ S-3107.

Верховный суд Аляски.

11 января 1989 г.

* 787 Джозеф Маккиннон, Дон Клоксин, Вагстафф, Поуп и Клоксин, Анкоридж, для Финкельштейна.

Джонатан Б. Рубини, Sp. Государственный советник Джуно, Грейс Берг Шейбл, Атти.Генерал от штата Аляска, Джуно, для Сандры Стаут и др.

Дэвид А. Девайн, Робинсон, Девайн и Холлидей, Анкоридж, для Брэдли.

Перед МЭТЬЮСОМ, С.ДЖ., и РАБИНОВИЦОМ, БЕРК, КОМПТОН, и МУР, ДЖ.

Это апелляция о пересчете голосов на выборах, поданная в соответствии с AS 15.20.510 (2). Этот суд направил апелляцию достопочтенной Джоан М. Кац из Высшего суда в качестве специального мастера 8 декабря 1988 года. Судья Кац подала свой отчет 5 января 1989 года.Отчет содержит подробный анализ возражений всех сторон и доказательств, представленных в связи с возражениями [1]. Следующее введение, содержащееся в отчете, описывает контекст этого дела:

Судья Кац пришел к выводу, что из-за различных ошибок, связанных с подсчетом бюллетеней, выборы следует отложить и провести новые.Как объясняется в данном документе, мы заключаем, что могут потребоваться новые выборы в зависимости от подсчета девяти незаконно поданных открепительных удостоверений, которые не были объединены [2], и от точной формулы пропорционального сокращения, используемой Директором [3]. Для удобства мы будем использовать ту же систему нумерации и терминологию, что и в отчете капитана.

Финкельштейн оспорил четырнадцать открепительных удостоверений в этой группе.Судья Кац * 788 принял возражения по трем делам и отклонил остальные одиннадцать. Большинство судей считает, что ни один из протестов не должен был быть принят. В каждом случае имелось достаточно доказательств, так что намерение избирателя указать новое законное место жительства за пределами округа было неясным. В отсутствие четкого выражения намерения изменить законное место жительства не может считаться измененным место жительства. См. Фишер против Стаута, 741 P.2d 217, 222-23 (Аляска, 1987).

После выборов и пересчета двадцать один избиратель подписал регистрационные показания под присягой, в которых указывалось, что они не проживали в округе на момент выборов. Директор по выборам подсчитал голоса этих лиц, и они были объединены. Судья Кац отказался применить формулу пропорционального сокращения, изложенную в деле Хаммонд против Хикеля, 588 P.2d 256, 260 (Аляска, 1978), серт. отказано, 441 U.S. 907, 99 S.Кт. 1998, 60 L. Ed. 2d 376 (1979) к этим голосам. Мы согласны с этим выводом. На наш взгляд, данное возражение было несвоевременным, поскольку было высказано после завершения пересчета.

В этой категории было рассмотрено одиннадцать задач. Судья Кац отклонил все возражения. Мы согласны.

По этой категории был подан один вызов, который был принят судьей Кацем. На месте подписи свидетеля на открепительном удостоверении стоит только штемпель без подписи.Мы согласны с судьей Кацем в том, что этот бюллетень не подлежал подсчету.

Три человека заполнили открепительные удостоверения, на которых аттестующий должностное лицо не поставило дату своей подписи. Судья Кац принял эти три возражения. Мы не согласны. Официальный свидетель должен поставить свою подпись. AS 15.20.081 (d). Однако мы пришли к выводу, что это требование носит скорее справочный, чем обязательный характер, и не требует признания бюллетеня недействительным, если данный бюллетень подан в день голосования или до него.Хаммонд против Хикеля, 588 P.2d 256, 269, (Аляска, 1978), свидетельство. denied, 441 U.S. 907, 99 S. Ct. 1998, 60 L. Ed. 2d 376 (1979). Бремя доказывания незаконности голосования в целом и, в частности, того, что данный бюллетень не был подан в день голосования или до него, лежит на претенденте. Это бремя не было взято на себя, поскольку все три бюллетеня были получены Избирательным отделом до выборов.

Статут Аляски 15.20.081 (d) также требует голосования в присутствии подтверждающего свидетеля. Хотя большинство судей согласны с судьей Кацем в том, что это требование является обязательным, а не директивным, мы считаем, что Финкельштейн не нес бремя доказывания нарушения этого требования.

Один избиратель сделал рукописную отметку, которая выглядит как начало буквы «K» на бланке для подписи избирателя клятвы избирателя на обратной стороне бюллетеня для открепительного удостоверения личности. Квалифицированный подтверждающий официальный свидетель засвидетельствовал, что присяга была подписана и принесена перед свидетелем. Судья Кац постановил, что это не подпись, как того требует AS 15.20.081 (d). Таким образом, она приняла вызов, брошенный Финкельштейном. Мы не согласны. Отметка может быть юридически достаточной для использования в качестве подписи избирателя, если это было намерением избирателя.Fischer v. Stout, 741 P.2d at 225. Поскольку присяга избирателя была должным образом засвидетельствована как подписанная и приведенная к присяге, по мнению большинства суда, не было доказано, что отметка не предназначалась избирателем. служить его подписью.

Тридцать два избирателя представили открепительные удостоверения, которые были засвидетельствованы двумя неофициальными свидетелями в разные дни. Все голоса были подсчитаны. Тем не менее, Отдел выделил девять из 789 голосов, так что, если они были подсчитаны незаконно, голоса могли быть непосредственно вычтены.Остальные двадцать три голоса были объединены. Судья Кац постановил, что все тридцать два из этих голосов были правильно подсчитаны. Мы не согласны по следующим причинам.

Статут Аляски 15.20.081 (d) устанавливает процедуры для заочного голосования по почте. В соответствующей части этого раздела указано:

В деле Фишер против Стаута мы истолковали этот раздел как означающий, что два неофициальных свидетеля должны присутствовать, когда избиратель подписывает удостоверение избирателя. Мы заявили:

741 P.2d at 223 (курсив наш, сноска опущена). Таким образом, мы истолковали статут как означающий, что роль двух неофициальных свидетелей была такой же, как и функция подтверждающего официального свидетеля, изложенная в статуте.

Одна из целей этого закона — обеспечить, чтобы бюллетень был отмечен избирателем, а не кем-либо еще, в обстоятельствах, свободных от принуждения. В отношении аналогичного требования Верховный суд штата Миссисипи постановил:

Fouche v. Ragland, 424 So. 2d 559, 561 (мисс 1982 г. ).

Поскольку одна из целей состоит в том, чтобы гарантировать, что избиратель отметит свой избирательный бюллетень и что голосование будет проведено без принуждения, не имеет смысла требовать тайного голосования в присутствии должностного лица, в то же время отказываясь от требования присутствия, когда два неофициальных свидетеля используются.

Законодательная история настоящего статута, AS 15.20.081 (d), подтверждает мнение о том, что голосование должно проводиться в присутствии либо дающего свидетельство официального лица, либо двух неофициальных свидетелей. До 1980 года предшествующий раздел AS 15.20.081 (d) требовал только одного подтверждающего свидетеля, который не обязательно должен быть официальным лицом. Однако в статуте было ясно, что голосование должно происходить в присутствии подтверждающего свидетеля. [4] * 790 После нашего решения по делу Хаммонд против Хикеля законодательный орган внес поправки в статут, приняв AS 15.20.081 (d) в его нынешнем виде. В меморандуме законодательного комитета, сопровождающем поправку, сказано:

Сенат штата Аляска, Специальный комитет по избирательной реформе, Документ от 23 апреля 1980 г. (анализ по разделам). Из этого комментария можно сделать два вывода. Во-первых, не было намерения изменить требование о голосовании в присутствии подтверждающего.Если бы было такое намерение, о нем бы упомянули. Во-вторых, два неофициальных свидетеля рассматривались как заменяющие официального свидетеля, если таковой отсутствовал. То, что должно было произойти до дачи показаний официального свидетеля или двух неофициальных свидетелей, было сочтено идентичным.

Установив требования закона, следующим шагом будет определение того, было ли оно соблюдено. В случае тридцати двух бюллетеней, содержащих подписи свидетелей, подписанных в разные даты, можно с высокой степенью уверенности сказать, что избиратель не сделал отметку в бюллетене, поместил его в маленький конверт, поместил маленький конверт в больший. конверт и подпишите свидетельство избирателя на обратной стороне конверта большего размера в присутствии обоих неофициальных свидетелей.Если бы это было сделано, даты, следующие за подписями свидетелей, совпадали бы. Таким образом, сами справки опровергают презумпцию правильности и демонстрируют несоответствие закону.

Следующий вопрос заключается в том, правильно ли директор подсчитал эти открепительные талоны, даже если они не были поданы в присутствии неофициальных свидетелей.

Аляски 15.20.203 требует, чтобы окружная счетная комиссия по открепительным удостоверениям проверяла каждый конверт с бюллетенями для открепительных удостоверений, чтобы определить, правильно ли был подан открепительный бюллетень.Часть (b) устава гласит:

Открепительный бюллетень не может быть подсчитан, если

Условия, изложенные в этом статуте, не являются исключительными. В деле Уиллис против Томаса, 600 P.2d 1079, 1083 n. 9 (Аляска, 1979), мы процитировали следующий текст из Карр против Томаса, 586 P.2d 622, 626 (Аляска 1978), который, в свою очередь, процитировал Rich v. Walker, 237 Ark. 586, 374 SW2d 476, 478 ( Ark.1964) следующим образом:

* 791 Требование к голосованию в присутствии неофициального свидетеля состоит в том, если использовать терминологию приведенного выше языка, «персонажа, способного воспрепятствовать свободному и разумному голосованию . .. или … влияют на важный элемент выборов … «Как отмечалось ранее, AS 15.20.081 (d) разработан для обеспечения того, чтобы голосование было отдано избирателю и что оно было подано в обстоятельствах, свободных от принуждения. Более того, это требование защищает целостность самого процесса голосования.Несоблюдение требований AS 15.20.081 (d) рискует нарушить эти фундаментальные принципы.

В деле Fischer v. Stout мы отметили, что подписание в присутствии подтверждающего было условием действительности бюллетеня: «AS 15.20.081 (d) предусматривает, что открепительный бюллетень будет действителен только в том случае, если конверт бюллетеня подписан избирателем. в присутствии аттестующего ». 741 P.2d at 223. Это утверждение — изречение. Однако это правильно. Поскольку требования AS 15.20.081 (d) служат как для защиты сути свободного и интеллектуального голосования, так и для защиты целостности процесса голосования, эти требования следует рассматривать как обязательные.

Desjourdy v. Board of Registrars, 358 Mass. 664, 266 N.E.2d 672 (1971). Там двадцать два открепительных удостоверения не были отмечены в присутствии нотариуса, как того требует закон Массачусетса, а конверты для голосования были подписаны нотариусами в отсутствие избирателей. Идентификатор. 266 N.E.2d at 674, 677. Верховный судебный суд штата Массачусетс постановил, что эти бюллетени не должны быть подсчитаны:

Id. на 677 (цитаты опущены).

Kiehne v. Atwood, 93 N.M. 657, 604 P.2d 133 (N.M. 1979), является еще одним делом, когда суд признал бюллетени недействительными из-за незаконности аттестации. Там присяги на семи открепительных удостоверениях нотариально заверены уездным секретарем. Идентификатор. на 132. Избиратели не были в присутствии клерка, когда они подписывали документы.Идентификатор. Все избиратели заявили, что хотели, чтобы уездный служащий нотариально заверил их подписи. Идентификатор. При признании бюллетеней недействительными суд постановил:

Id. 604 P.2d, 133.

В деле Фугейт против мэра и городского совета Буффало, 348 P.2d 76 (Wyo. 1959), двенадцать бланков бюллетеней для заочного голосования были засвидетельствованы должностным лицом, ответственным за выборы, в отсутствие аффидевитов. Идентификатор. на 79. Эти голоса были признаны незаконными. Там же, на 85. См. Также McCavitt v. Registrars of Voters, 385 Mass. 833, 434 N.E.2d 620, 628 (1982) (бюллетени, отмеченные без присутствия нотариуса, признаны недействительными).

Тот факт, что бюллетени в данном случае не были опущены в присутствии двух неофициальных свидетелей, частично объясняется тем, что в инструкциях для избирателя в форме присяги избирателя прямо не говорится о требовании, чтобы голосование проводилось в присутствие понятых.Мы отметили, что ошибки «исключительно со стороны сотрудников избирательных комиссий» не делают бюллетени недействительными. Уиллис против Томаса, 600 P.2d at 1087 (имена зарегистрированных избирателей не были в списках избирателей в день выборов). См. Также Fischer v. Stout, 741 P.2d at 223, 224. Это наблюдение, однако, не было сделано в тех случаях, когда официальное упущение вызвало или способствовало нарушению обязательного требования, и мы отказываемся распространять его на такие дела. Избиратель, проголосовавший незаконно, заинтересован в том, чтобы его голос был подсчитан, и этот интерес находится на высоком уровне, когда источником незаконности являются должностные лица избирательной комиссии. С другой стороны, если голосование * 792 нарушает положения, призванные обеспечить целостность избирательного процесса, общественность имеет второстепенный интерес — фундаментально здоровые выборы, которые защищены тем, что не подсчитывают незаконные голоса, независимо от источника их незаконности.

По этой категории было подано четыре возражения, все из которых были отклонены судьей Кацем. Мы согласны.

Штат признал, что открепительный бюллетень незарегистрированного избирателя, о котором идет речь, не подлежал подсчету.Судья Кац согласился и принял вызов. Мы тоже согласны.

Здесь участвуют вызовы четырнадцати голосов за Брэдли, где отметки были помещены в коробки как для Брэдли, так и для Финкельштейна. Судья Кац согласился с тремя из этих возражений, а именно с бюллетенями 29, 20 и 30. Судья Кац, очевидно, был уверен, что бюллетень 29 был подсчитан. Все адвокаты сообщают нам, что на самом деле он не учитывался, и поэтому его не следует вычитать из общей суммы Брэдли.Бюллетени для голосования 20 и 30 были объявлены директором Брэдли. Судья Кац, однако, считал, что намерения избирателей не могут быть определены по бюллетеням. Мы не согласны. На наш взгляд, очевидно, что машина для голосования была низкой и что избиратели в этих случаях намеревались голосовать за Брэдли.

Другая ситуация существует в отношении бюллетеня 27. Судья Кац рекомендовал приписать это голосование Брэдли. Мы не согласны и принимаем вызов Финкельштейна. В этом бюллетене нет последовательной картины, в которой отметки были бы высокими или низкими.Намерения избирателя не могут быть определены.

По всем другим бюллетеням в этой категории мы согласны с рекомендациями судьи Каца, которые поддержали директора.

Брэдли утверждает, что должны были быть включены пятнадцать открепительных удостоверений, которые не были подсчитаны, потому что они не были подписаны. Судья Кац счел, что Отделение правильно отказалось включить эти бюллетени. Мы согласны.

Трое избирателей представили специальные открепительные удостоверения, а затем отправили по почте обычные открепительные удостоверения, которые по разным причинам признаны недействительными.Брэдли утверждает, что в этих обстоятельствах должны были быть подсчитаны оригинальные специальные бюллетени этих избирателей. Отделение не согласилось, и судья Кац рекомендовал оставить решение Отделения в силе. Мы согласны.

Чтобы определить, могли ли ошибки при подсчете бюллетеней повлиять на выборы, была использована пропорциональная формула. См. Hammond v. Hickel, 588 P.2d at 260. Брэдли утверждает, что формула не была строго пропорциональной, потому что она не включала бюллетени, которые были поданы за вписанных кандидатов или которые были пустыми в отношении гонки Финкельштейна-Брэдли.Мы согласны с тем, что принцип, которого придерживается Брэдли, верен. Однако мы не уверены в том, какое точное соотношение получается в результате применения этого принципа. Это должно быть определено начальником предварительного заключения.

Директор подтвердил, что Брэдли победил Финкельштейна девятью голосами, 3563 против 3554. Мы приняли одно возражение, в результате которого общее количество голосов Брэдли уменьшилось до 3 562 голосов (часть II.A.10 настоящего распоряжения, бюллетень 27). Был подсчитан и смешан 51 незаконный бюллетень.(Двадцать шесть обнаружено Директором, двадцать три в соответствии с частью II.A.7 настоящего приказа и по одному для частей II.A.4 и II.A.9.) Кроме того, были девять незаконных бюллетеней * 793, которые были подсчитаны, но не смешаны. (Часть II.A.7.)

Это дело ТРЕБУЕТСЯ Директору со следующими инструкциями:

1. Девять отдельных бюллетеней должны быть вычтены из суммы голосов кандидата, за которого они были поданы. Тогда будет очевиден предварительный преобладающий кандидат.

2. Соответствующая формула пропорционального сокращения должна применяться к пятьдесят одному незаконно подсчитанному смешанному бюллетеню.

3. Если применение формулы пропорционального сокращения не меняет предварительный результат, указанный в шаге 1, Директор должен немедленно сертифицировать преобладающего кандидата.

4. Если применение формулы пропорционального сокращения изменит предварительный результат, достигнутый на этапе 1, следует незамедлительно провести новые выборы.

RABINOWITZ and MOORE, JJ., несогласные.

RABINOWITZ, Правосудие, к которому присоединился Мур, Правосудие, несогласное.

Я не согласен с постановлением суда о том, что директор неправильно подсчитал 32 открепительных удостоверения, которые были засвидетельствованы непрофессионалами в разные даты. Таким образом, я подтверждаю заверение директора Отдела выборов о том, что W.E. «Брэд» Брэдли — победитель выборов на место А в Районе 13 домов.

Специальный мастер этого суда отклонил утверждение государства о том, что датировка подписей непрофессионалов является лишь справочной. Вместо этого Специальный мастер постановил, что присутствие непрофессиональных свидетелей при подаче бюллетеня и оформлении удостоверения избирателя является обязательным аспектом заочного голосования. AS 15.20.081 (d). Специальный капитан далее рассуждал, что обычно несоблюдение обязательного положения, целью которого является установление «присутствия», должно оказаться фатальным для этих бюллетеней. Тем не менее Специальный мастер пришел к выводу, что директор правильно подсчитал эти спорные открепительные удостоверения. При этом Специальный Мастер рассуждал следующим образом:

На мой взгляд, анализ Специального капитана соответствует решениям этого суда. В деле Фишер против Стаута [1] мы сказали:

Еще один пункт в Фишере касался того, нужно ли было подсчитывать бюллетени Дэрила Уоллеса. Пытаясь исправить ошибку в адресе, указанном в его регистрационной карточке избирателя, избиратель установил флажок, отменяя свою регистрацию. По вопросу мы сказали:

Дополнительное значение имеет та часть нашего решения по делу Фишер против Стаута, где в связи с проблемой смены имени мы заметили, что:

Упомянутые выше органы отражают признание этим судом того, что право голоса является фундаментально важным правом.[5] Наши собственные прецеденты также согласуются с мнением о том, что «положение о голосовании не должно толковаться таким образом, чтобы неоправданно мешать осуществлению этого права лицами, имеющими право голоса» [6]. Рассмотрение Верховного суда Колорадо также заключил, что:

Принимая во внимание важность права голоса и наши решения, в которых избирателям отказывают в лишении избирательных прав из-за ошибок должностных лиц, ответственных за выборы, я прихожу к выводу, что специальный мастер правильно поддержал решение директора о подсчете этих 32 оспариваемых открепительных удостоверений. [8] Как отметил специальный капитан, непрофессиональным свидетелям были даны неясные инструкции относительно свидетельства свидетеля. Кроме того, инструкции для отсутствующего избирателя «фактически вводили в заблуждение». Короче говоря, эти неадекватные инструкции не смогли четко сформулировать роли, которые избиратель и его или ее свидетели должны были играть в процессе заочного голосования.Кроме того, в этом протоколе нет никаких указаний на мошенничество, принуждение избирателя * 795-797, умышленное преступление или образец сходства между именами свидетелей, подписавших свидетельские свидетельства на этих открепительных удостоверениях. При таких обстоятельствах я не буду наказывать отсутствующих избирателей за то, что сотрудники избирательных комиссий Аляски не предоставили недвусмысленных инструкций относительно того, как отсутствующий избиратель и его или ее два непрофессиональных свидетеля должны были выполнять свои соответствующие роли в процессе заочного голосования. .[7]

[Примечание редакции]

[1] Выражаем благодарность судье Кац за ее подробный и оперативный отчет.

[2] См. Ниже часть II.A.7.

[3] См. Ниже часть II.B.3.

[4] Прежний статут, AS 15.20.150, гласил:

ГОЛОСОВАНИЕ ПО ЛИЧНОМУ ПРЕДСТАВИТЕЛЬСТВУ ИЛИ ПО ПОЧТЕ. После получения бюллетеня для заочного голосования через личного представителя или по почте избиратель, как в штате, так и за его пределами, в присутствии подтверждающего свидетеля, которому исполнилось 18 лет, может приступить к тайной пометке в бюллетене, чтобы поместите бюллетень в маленький пустой конверт, поместите маленький конверт в больший конверт и подпишите свидетельство избирателя на обратной стороне большого конверта в присутствии вышеперечисленного должностного лица или указанных лиц, которые должны подписать в качестве понятых .Затем избиратель может вернуть бюллетень для голосования, должным образом вложенный в конверты, личным представителем должностному лицу по выборам, предоставившему бюллетень, или по самой быстрой почтовой службе с отметкой по штемпелю не позднее дня выборов руководителю выборов в своем округе.

[1] 741 P.2d 217 (Аляска, 1987).

[2] Ид. на 225.

[3] Ид. на 224.

[4] Ид. на 225. В Карре этот суд отметил:

Суды неохотно допускают полное лишение избирательных прав квалифицированных избирателей не по их вине, и «[там], где можно найти какое-либо разумное толкование закона, которое могло бы избежать такого результата, суды должны и будут поддерживать его.’

586 P.2d at 626 (скобки в оригинале) (цитируется Reese v. Dempsey, 153 P.2d 127, 132 (N.M. 1944)).

[5] См. Также Эриксон против Блэра, 670 P.2d 749, 754 (Col. 1983). («право голоса является фундаментальным правом первоочередной важности»).

[6] Ид. на 754.

[7] Ид. на 754-55.

Эриксоновский суд отклонил правило строгого соблюдения и, в свою очередь, принял стандарт существенного соблюдения, заключив, что такой стандарт «адекватен задаче предотвращения мошенничества на выборах и сохранения избирательного права отсутствующего избирателя против ненужных и ненужных». технические ограничения.»Ид. На 755.

[8] См. Также Application of Moore, 57 N.J. Super. 244, 154 A.2d 631, 637-38 (1959).

[7] В резолюции, которую я хотел бы достичь, подразумевается мое согласие с утверждением государства о том, что требования AS 15.20.081 (d) должны толковаться как директория в соответствии с AS 15.20.203 (b) (2) для целей определение последствий несоблюдения со стороны народных свидетелей порядка оформления открепительных удостоверений избирателя.

границ | Сравнение кишечного микробиома у умеренно-поздних недоношенных детей, получаемых матерями на грудном молоке и на искусственном вскармливании

Введение

Все чаще обнаруживается, что микробиом кишечника влияет на здоровье человека.Хотя индивидуальные различия существуют, основной микробиом, включая Firmicutes и Bacteroidetes , считается решающим для поддержания здоровья взрослых (Eckburg et al., 2005; Turnbaugh and Gordon., 2009; Tap et al., 2009; Qin et al. ., 2010). По сравнению с микробиомами кишечника взрослых, младенцы, особенно недоношенные новорожденные, имеют относительно динамичные и нестабильные микробиомы. Множественные факторы, включая генетические факторы (Stewart et al., 2005) и переменные окружающей среды, такие как источник питания, использование антибиотиков и способ доставки, потенциально могут повлиять на состав и богатство микробиома младенцев (Palmer et al., 2007; Д’Аргенио и Сальваторе, 2015; Лим и др., 2016). Временные изменения состава кишечного микробиома могут влиять на новорожденного иначе, чем на взрослого, поскольку кишечник новорожденного еще не полностью развит (Voreades et al., 2014; Gritz and Bhandari, 2015). В младенчестве, особенно у недоношенных новорожденных, основным источником энтерального питания является грудное молоко и / или смеси. Смесь является предпочтительной альтернативой, когда матери не могут производить достаточно грудного молока, что является общей проблемой для матерей недоношенных детей (Radtke, 2011).Смесь считается сбалансированным источником питательных веществ и может способствовать более быстрому росту недоношенных детей, чем только грудное молоко (Gross, 1983; Quigley and McGuire, 2014). Однако в последние годы наше понимание сложного состава грудного молока и диады мать-ребенок привело к усилению внимания к преимуществам грудного вскармливания (Hanson et al., 1978; Peterson et al., 1998; Hamosh, 2001). ; Oddy, 2002; Wold, Adlerberth, 2002). Исследования демонстрируют роль грудного молока в укреплении здоровья младенцев, включая снижение риска некротического энтероколита (НЭК) (Lucas and Cole, 1990; Boyd et al., 2007; Abrams et al., 2014; Quigley and McGuire, 2014), диабет I типа (Virtanen et al., 1992) и болезнь Крона (Bergstrand and Hellers, 1983) и способствующие развитию нервной системы (Lucas et al., 1992), а также снижение уровня ожирения в детстве. (Армстронг и др., 2002).

Механизмы, с помощью которых грудное молоко способствует здоровью человека, до сих пор неясны. Исследования показывают, что как недоношенные дети с крайне низкой массой тела при рождении, так и очень недоношенные дети, вскармливаемые грудным молоком, демонстрируют повышенное микробное разнообразие кишечника по сравнению с аналогами на искусственном вскармливании в течение 20–30 дней (Gewolb et al., 1999; Cong et al., 2016). Бифидобактерии , которые являются пробиотиками в кишечнике человека (Collins and Gibson, 1999; O’Callaghan and van Sinderen, 2016), могут колонизировать кишечник доношенных новорожденных, вскармливаемых грудным молоком, легче, чем кишечник детей, вскармливаемых смесью. (Bullen et al., 1976; Stark, Lee, 1982; Mevissen-Verhage et al., 1987; Balmer, Wharton, 1989; Harmsen et al., 2000; Bezirtzoglou et al., 2011; Lee et al., 2015) . В частности, Bifidobacterium longum был более распространен в кишечнике доношенных детей, вскармливаемых грудным молоком, чем у детей, вскармливаемых смесью без пробиотических добавок (Lee et al., 2015) и Bifidobacterium spp. снизилась после перехода с грудного молока на молочную смесь (Davis et al., 2016). Другой род, Lactobacillus (Collins and Gibson, 1999), составляющий около 3% популяции микробиома в грудном молоке (Urbaniak et al., 2016), был более распространен у доношенных детей, вскармливаемых грудным молоком, чем в смесях. образцы фекалий младенцев, вскармливаемых вскармливанием (Madan et al., 2016), а также уменьшились после изменения источника питания с грудного молока на смесь (Davis et al., 2016). Напротив, потенциально патогенные роды, такие как Clostridia , Klebsiella , Veillonella и Bacteroides , лучше колонизируются в кишечнике доношенных детей, находящихся на искусственном вскармливании, чем у детей, вскармливаемых грудным молоком (Benno et al. al., 1984; Mackie et al., 1999; Boyd et al., 2007; Adlerberth, Wold, 2009; Bezirtzoglou et al., 2011; Lee et al., 2015). Разница, отмеченная между двумя группами, привела к интересу к манипулированию микробиомом младенца с помощью пробиотиков.

В последнее время особое внимание уделяется анализу микробиома для прогнозирования микробной функции в кишечнике. Метаболиты пробиотиков могут способствовать противовоспалительной функции, производя короткоцепочечные жирные кислоты (Fu et al., 2017; Xiong et al., 2017). Прогностический анализ функциональных путей микробиома, основанный на секвенировании ампликона гена 16S рРНК, показал, что младенцы, вскармливаемые исключительно грудным молоком, имели более высокую относительную долю транспорта через микробную мембрану и более низкий энергетический метаболизм, чем младенцы, находящиеся на искусственном вскармливании (Thompson et al., 2015). Однако результаты метаанализа показали, что младенцы, вскармливаемые не только грудным молоком, имеют большее относительное изобилие микробных функций углеводного обмена, но имеют более низкий метаболизм липидов, метаболизм витаминов и детоксикацию, чем младенцы, вскармливаемые исключительно грудным молоком (Ho et al., 2018). Метатранскриптомика обеспечивает более четкую картину функциональности микробиома, чем функции, предсказанные на основе секвенирования ампликона гена 16S рРНК (Lavelle and Sokol, 2018). С помощью метатранскриптомного анализа функциональная микробиота кишечника человека может быть непосредственно описана без функциональных выводов, основанных на филогении (Booijink et al., 2010; Gosalbes et al., 2011; Franzosa et al., 2014; Hugenholtz et al., 2017).

Во многих предыдущих исследованиях изучали микробиом в первый месяц или первый год доношенных детей (Balmer and Wharton, 1989; Stark and Lee, 1982; Penders et al., 2006; Li et al., 2014; Lim et al., 2014; Lim et al., 1989; Stark and Lee, 1982; Penders et al., 2006; Li et al., 2014; Lim et al. al., 2015, 2016; McCann et al., 2018; Pannaraj et al., 2018). Тем не менее, 10% населения США в 2018 году родились недоношенными, при этом большинство недоношенных детей родились недоношенными в средней или поздней степени (Hamilton et al., 2019). Однако, насколько нам известно, только несколько исследований были посвящены этой группе (Forsgren et al., 2017; Chernikova et al., 2018; Zwittink et al., 2018). В частности, исследование здорового населения этой группы заложит основу для изучения заболеваний, связанных с дисбактериозом недоношенных детей, с использованием двойного когортного подхода, чтобы лучше выявить эффекты питания (Furse et al., 2018). Таким образом, цель настоящей работы состояла в том, чтобы сравнить состав и функцию микробиома кишечника в зависимости от источника питания, т.е.е., собственное грудное молоко матери (MBM) по сравнению с смесью у умеренно-поздних недоношенных новорожденных. Подход, который мы использовали в этом исследовании, включает высокопроизводительное секвенирование ампликона гена 16S рРНК и сравнительную метатранскриптомику. Мы стремились определить потенциально пробиотические таксоны в группе MBM и выявить функциональные различия в микробиоме кишечника умеренно-поздних недоношенных новорожденных между двумя источниками питания.

Материалы и методы

Сбор проб

Sanford Health IRB, ID STUDY00000829IRA, одобрил все эксперименты с участием людей в этом исследовании.В исследование были включены двадцать в остальном здоровых младенцев без врожденных аномалий, родившихся умеренно-поздно недоношенными (от 32 0/7 до 36 6/7 недель беременности). Образцы кала собирали после того, как младенцы достигли полного энтерального кормления. После согласия родителей всем зарегистрированным младенцам был присвоен идентификационный номер. Описания и краткое изложение младенцев показаны в Таблице 1 и Дополнительной Таблице S1. Десять из двадцати младенцев были MBM (гестационный возраст: 33,7 ± 1,26 недели), а десять находились на искусственном вскармливании (гестационный возраст: 34 ± 1.5 недель). Все младенцы, включенные в группу исследования грудного молока, получали молоко собственной матери. Ни один из младенцев, включенных в группу MBM, не получал искусственного вскармливания до сбора образцов; тем не менее, эти младенцы получали грудное молоко, обогащенное либо обогащенным грудным молоком, либо детской смесью Neosure в соответствии со стандартной практикой. Младенцы, включенные в группу на искусственном вскармливании, не получали грудного молока до сбора образцов. Все матери младенцев, включенных в исследование, получали антибиотики перед родами либо в связи с опасениями по поводу инфекции, либо в качестве профилактики перед кесаревым сечением.Одиннадцать из двадцати младенцев получали антибиотики ампициллин / гентамицин во время наблюдения и оценки неонатального сепсиса. Ни у одного из этих младенцев не было положительного посева крови. Шесть из двадцати младенцев были рождены естественным путем, а четырнадцать родились посредством кесарева сечения (кесарево сечение). Шесть набранных младенцев были коренными американцами, и четырнадцать младенцев были кавказскими, среди них было пять пар близнецов: младенцы № 7 и № 8; № 9 и № 10; № 18 и № 19; № 21 и № 22; и №23 и №24. Для каждого младенца образцы стула собирали в двух временных точках с интервалом минимум 24 часа.Первые образцы собирались в среднем через 15 дней после рождения, а второй сбор образцов проводился в среднем через 17 дней после рождения. Каждый собранный образец хранился в пробирках для защиты ДНК / РНК (Zymo Research), которые содержат защиту для ДНК / РНК для уменьшения деградации нуклеиновых кислот. Все образцы хранили при 4 ° C.

Таблица 1. Демографические и клинические данные младенцев, включенных в исследование.

Статистический анализ

GraphPad Prism использовалось для выполнения непарных t -тестов с неравной дисперсией (Welch) для проверки статистической значимости гестационного возраста, массы тела при рождении, а также времени сбора первой и второй выборки между двумя группами включенных младенцев.

Экстракция ДНК / РНК

Суммарную ДНК и РНК одновременно экстрагировали из образцов фекалий, хранящихся в пробирках для ДНК / РНК Shield, поставляемых в комплекте ДНК / РНК Microbiome Mini Kit (ZRC188678, ZymoBIOMICS ^TM ) в соответствии с инструкциями производителя. Концентрации экстрагированной ДНК / РНК определяли количественно с помощью флуорометра Qubit 3.0 (Invitrogen ^TM ) и спектрофотометра NanoDrop ^TM (Thermo Scientific ^TM ).

Секвенирование ампликона гена 16S рРНК и биоинформатические анализы

Секвенирование ампликона гена 16S рРНК сегментов V3 – V4 было выполнено, как описано ранее, с использованием MiSeq Next Generation Sequencer в Центре геномики Университета Миннесоты (Gohl et al., 2016).

В среднем было получено 44 558 считываний парных концов на образец и загружено в Архив считывания последовательностей (SRA) Национального центра биотехнологической информации (NCBI) под регистрационным номером PRJNA515307. Последовательности фильтровали по Phred 33 и демультиплексировали с помощью Quantitative Insights Into Microbial Ecology 2 (QIIME2) (Bolyen et al., 2018). Варианты последовательности ампликона (ASV) были получены после учебника QIIME2 по базе данных NCBI nt, а таксономический анализ был выполнен с использованием GreenGenes (версия 13.8) (McDonald et al., 2012). Анализ альфа- и бета-разнообразия, анализ PERMANOVA, ANCOM (Mandal et al., 2015) и анализ дифференциальной численности гнейсов также были выполнены с помощью QIIME2. Алгоритм LEfSe (Segata et al., 2011) использовался после QIIME2 с параметрами по умолчанию для определения различий в биомаркерах. Кроме того, необработанные данные 16S также были проанализированы с помощью USEARCH (Эдгар, 2013). Вкратце, данные секвенирования были обрезаны и отфильтрованы с ожидаемыми ошибками <1 с помощью USEARCH. Девяносто семь процентов таблицы операционных таксономических единиц (OTU), альфа- и бета-разнообразия и таксономии с помощью учебного набора проекта Ribosomal Database Project (RDP) v16 (rdp_16s_v16.fa) (Cole et al., 2009) были выполнены с использованием конвейера UPARSE USEARCH.

Анализ секвенирования РНК и биоинформатики

человеческих рРНК удаляли из общей РНК с использованием набора для истощения рРНК (человек / мышь / крыса) (E6310L, NEBNext ^® ) в соответствии с инструкциями производителя. Подготовка библиотеки выполнялась с использованием набора для подготовки библиотеки направленной РНК для набора Illumina (E7760S, NEBNext ^® ). HiSeq 4000 (на каждую дорожку с парным концом 100 пар оснований) выполняли в Roy J.Биотехнологический центр Карвера при Иллинойсском университете в Урбана-Шампейн. Суммарную РНК от 16 из 20 младенцев секвенировали в двух сериях RNA-seq. В первом прогоне образцы от младенцев № 1, № 2, № 3, № 7, № 8, № 9, № 10, № 11 и № 13 включали по две временных точки каждая. Во втором прогоне RNA-seq образцы от младенцев № 18, № 19, № 20, № 21, № 22, № 23 и № 24 были собраны с двумя временными точками, объединенными вместе после того, как мы определили, что две временные точки ( С интервалом 8 ~ 12 ч) имели аналогичный микробный состав в первом опыте.

Данные метатранскриптома были обрезаны с помощью Trimmomatic (версия 0.39) (Bolger et al., 2014), а затем DIAMOND (версия 0.9.24) (Buchfink et al., 2015) был использован для сопоставления считываний ДНК с базой данных NCBI nr. Данные будут доступны после принятия. MEGAN6 (Huson et al., 2007) использовался для синтаксического анализа выровненных выходных данных DIAMOND для получения результатов бактериальной филогении и генной онтологии по базам данных InterPro. За конвейером SAMSA2 (версия 2.2.0) (Westreich et al., 2018) последовали шаги предварительной обработки, как показано в руководстве, с некоторыми незначительными изменениями.Изменения включали объединение библиотек парного секвенирования с помощью Fastq-Join (версия 1.3.1) (Aronesty, 2013), обрезку адаптера с помощью Trimmomatic (версия 0.39), удаление рРНК бактерий с помощью SortMeRNA (версия 2.1) (Копылова и др., 2012 ) с базой данных SILVA (версия 1.1.9) (Pruesse et al., 2007), сопоставление DIAMOND (версия 0.9.24) с базой данных NCBI RefSeq (Tatusova et al., 2013) и сопоставление с базой данных SEED Subsystems (Overbeek et al., 2013). Версии баз данных RefSeq и SEED Subsystems были получены через BioShare («Используемые базы данных» в README.md) и загружается путем запуска сценария full_database_download.bash как части SAMSA2. Файлы вывода DIAMOND были агрегированы с использованием сценариев R и Python для статистического анализа и дифференциального выражения DESeq2 как части конвейера SAMSA2.

Результаты

Демографические данные зарегистрированных младенцев

Двадцать младенцев были задействованы в этом исследовании. Десять младенцев получали MBM, а десять младенцев находились на искусственном вскармливании. Информированное согласие было получено от родителей всех участников.Характеристики младенцев обобщены в Таблице 1. Непарный тест t с неравной дисперсией (Велча) использовался для анализа различий в демографической информации между двумя группами. Между двумя группами не наблюдалось значительных различий в гестационном возрасте, массе тела при рождении, а также в возрасте первой и второй выборки (дополнительная таблица S1). Это исключает эти потенциальные смешивающие факторы между группами лечения, которые могут повлиять на интерпретацию результатов.

Влияние источника питания на альфа- и бета-разнообразие бактериального состава кишечника

Сначала мы сравнили альфа-разнообразие бактериального состава кишечника у младенцев, вскармливаемых MBM и искусственными смесями, с помощью QIIME2 и UPARSE с данными секвенирования 16S рРНК.Не было обнаружено значительных различий в бактериальном альфа-разнообразии между двумя диетическими группами (рис. 1А и дополнительная таблица S2). Наблюдались относительно большие различия среди людей в группе, получавшей смесь, по сравнению с группой MBM.

Рисунок 1. Альфа- и бета-разнообразие. (A) Коробчатые диаграммы, показывающие бактериальное альфа-разнообразие между двумя диетическими группами. Нет существенной разницы в индексе альфа-разнообразия Шеннона между MBM и группами формул. (B) График Жаккорда бета-разнообразия, представленный EMPeror. Отчетливая кластеризация бета-разнообразия наблюдалась между MBM (красный) и формульными группами (синий).

Помимо альфа-разнообразия, бета-разнообразие является еще одним важным индикатором, позволяющим определить, могут ли различные источники питания влиять на микробный состав. Как показано на рисунке 1B, наблюдались отдельные кластеры для каждого источника питания. Кроме того, анализ кластеризации PERMANOVA был значимым при P <0.01, подтверждая, что микробные составы в группах MBM и рецептур значительно различались.

Различия в составе фекального микробиома между МБМ и группами смесей

OTU, полученные с помощью USEARCH на уровне филума, показывают, что Firmicutes был наиболее распространенным бактериальным филумом у большинства недоношенных детей, вскармливаемых MBM и смесью, в среднем 67 и 69% состава соответственно. Proteobacteria были вторыми по численности бактериями с составом 29 и 25% для групп MBM и формул соответственно (дополнительный рисунок S1).На круговых диаграммах синтаксической таксономии из конвейера USEARCH показаны пропорции различных родов бактерий (рисунки 2A, B). Род Veillonella и род Escherichia / Shigella имеют наибольшее богатство среди недоношенных новорожденных с МБМ — 18,41% и 15,17% соответственно. За ними следовали Staphylococcus (10,58%), Clostridium (9,62%), Enterococcus (9,61%) и Streptococcus (9,32%). У недоношенных детей, находящихся на искусственном вскармливании, Streptococcus (18.64%) и Klebsiella (17,41%) были наиболее распространенным бактериальным родом, за которым следовали Enterococcus (12,41%), Staphylococcus (10,67%) и Veillonella (10,4%). Akkermansia был уникальным для группы, получавшей смесь, в то время как Lactococcus был уникальным для группы MBM.

Рисунок 2. Сравнение таксономии младенцев, вскармливаемых MBM и искусственными смесями, на основе результатов секвенирования ампликона гена 16S рРНК. (A) Таксономические круговые диаграммы доли в группе MBM на уровне родов из UPARSE.Номер каждого сектора — это процент бактерий. (B) Таксономические круговые диаграммы доли в группе, получавшей смесь, на уровне родов из UPARSE. Число в каждом разделе относится к проценту этих бактерий. (C) Результат LEfSe по относительной численности, обнаруженной в Propionibacterium между младенцами, вскармливаемыми MBM и смесью. (D) Дифференциальная относительная численность таксонов у младенцев, вскармливаемых MBM и смесью, на основе Gneiss.

Затем мы выполнили алгоритм LEfSe для сравнительного метагеномического анализа, чтобы сравнить относительную численность между двумя группами.Результаты LEfSe показали, что Propionibacterium в группе MBM имел значительно большую относительную численность, чем группа формулы (рис. 2C), что также было подтверждено результатами анализа состава микробиомов (ANCOM) из конвейера QIIME2. Кроме того, результаты классификатора случайного леса и команды otu_select в конвейере UPARSE согласились с анализами ANCOM и LEfSe, что Propionibacterium является наиболее информативной OTU, которая может эффективно прогнозировать для разделения двух групп (дополнительные таблицы S3, S4).После использования сбалансированного подхода, Гнейса, более длинный список таксонов оказался дифференциально многочисленным (рис. 2D). В группе формул более многочисленными были семейство Enterobacteriaceae , род Enterococcus , род Veillonella и класс Bacilli , тогда как порядок Clostridiales , род Streptococcus и род Proptococcus и род Группа МБМ. LefSe также использовался для анализа дифференциальной численности на основе других группировок, т.е.е., антибиотик, способ доставки, раса и двойные факторы (дополнительный рисунок S2). Никаких существенных различий в Propionibacterium не было обнаружено при использовании других группировок.

Чтобы подтвердить результаты секвенирования ампликона гена 16S рРНК, мы также выполнили метатранскриптомный анализ у 16 ​​из 20 младенцев. Аналогичные паттерны относительной численности Clostridium , Streptococcus , Veillonella , Bifidobacterium , Enterococcus , Escherichia и Staphylococcus и Staphylococcus crip, результаты в обеих группах были получены методом метатрансекции (Fig.Помимо этих доминаторов, было обнаружено, что Pantoea , Vibrio и Paenibacillus имеют более высокий профиль относительной численности, профилированный с помощью метатранскриптомного анализа, чем с помощью секвенирования ампликона гена 16S рРНК. Наблюдались высокие индивидуальные различия как в бактериальном составе, так и в богатстве (дополнительный рисунок S3). Streptococcus и Clostridium были самыми многочисленными бактериальными родами в группе MBM, а также Escherichia , Veillonella и Bifidobacterium (рис. 3A).В группе формулы наиболее многочисленными родами бактерий были Enterococcus и Streptococcus , за которыми следовали Bifidobacterium , Clostridium , Pantoea и Staphylococcus (рис. 3B).

Рисунок 3. Сравнение таксономии младенцев, вскармливаемых MBM и искусственными смесями, на основе метатранскриптомических результатов на уровне рода. (A) Относительная численность в группе МБМ. (B) Относительная численность в группе, получавшей смесь.

Микробные функции в образцах детского стула

Данные метатранскриптома впоследствии были проанализированы посредством анализа генной онтологии с помощью InterPro2GO в MEGAN6. Всего было получено 2 039 141 чтение. 1 647 709 прочтений были вовлечены в биологические процессы. 571 096 прочтений принадлежали клеточному компоненту. 1 486 812 считываний были связаны с молекулярной функцией. 225 729 прочтений были несекретными. Основываясь на результатах InterPro2GO, гены, связанные с каталитической активностью и метаболическим процессом, были чрезмерно представлены как у детей, вскармливаемых MBM, так и на искусственном вскармливании (дополнительные рисунки S4, S5).Между двумя группами было несколько заметных различий (дополнительная таблица S5). Группа формулы имела больше внутренних компонентов мембраны и транспортной функции, чем группа MBM. Гены связывания нуклеиновых кислот, связывания ионов и метаболического процесса ДНК были относительно более распространены в группе MBM, чем в группе формулы.

Чтобы найти дифференциальную экспрессию гена, данные метатранскриптома были проанализированы с помощью SAMSA2. На тепловой карте MBM и группы формул обычно группируются отдельно, за некоторыми исключениями, что группа формул была разделена на две части (дополнительный рисунок S6).На основании результата DESeq2 было выявлено 22 гена, дифференциально экспрессируемых ( P _прил <0,05) с абсолютным значением log2-кратного изменения более 2. Дифференциально экспрессируемые гены были дополнительно разделены на три уровня (Таблица 2), что показывает что механизмы кислотного стресса и кислотной устойчивости, а также использование L-фукозы увеличились в группе MBM, тогда как деградация валина и метионина увеличилась в группе формулы на уровне иерархии 2. На уровне иерархии 3 наибольшее повышение регуляции в группе MBM было в гамма-субъединице компонента B глицинредуктазы (20.327-log2-кратное увеличение), за которым следует вероятный глутамат / гамма-амино-бутиратный антипортер (9,128-log2-кратное увеличение) и шаперон HdeA (8,802-log2-кратное увеличение). Заметная повышающая регуляция в группе, получавшей формулу, была у метионин-гамма-лиазы (увеличение в 7,648 log2 раз) и АТФ-зависимой РНК-геликазы YqfR (увеличение в 2,919 log2 раза) по сравнению с группой MBM.

Таблица 2. Сводка анализа аннотаций на основе иерархии базы данных SEED Subsystems, показывающая три уровня для каждой аннотированной функции, которые имеют значительную разницу в выражении между группой грудного молока и группой смеси ( p _adj <0.05).

Обсуждение

Исследования микробиома кишечника недоношенных детей были относительно немногочисленными из-за трудностей с получением образцов. В нескольких исследованиях сообщалось о влиянии кормления на очень недоношенных (Cong et al., 2016) и крайне недоношенных детей (Gewolb et al., 1999), но когорта умеренно-поздних недоношенных составляет большую часть популяции недоношенных. Следовательно, исследования микробиома кишечника недоношенных новорожденных со средней и поздней стадией беременности, посвященные питательным эффектам, в целом отсутствовали.

Что касается альфа-разнообразия между различными источниками питания, нет значительных различий в альфа-разнообразии между недоношенными детьми, вскармливаемыми MBM и смесью. Однако было обнаружено, что бета-разнообразие на уровне родов различается, тогда как на уровне филумов существенных различий не было. На основе подхода ампликона 16S рРНК на уровне филума преобладает Firmicutes , за которым следуют Proteobacteria в обеих группах. На уровне рода в образцах группы MBM в первую очередь доминировали Veillonella и Escherichia / Shigella , за которыми следовали Staphylococcus , Enterococcus , Clostridium , Streptococcus lebs и Kabela.Напротив, в группе, получавшей смесь, основными колонизаторами были Streptococcus и Klebsiella , а второстепенными колонизаторами были Enterococcus , Staphylococcus , Veillonella и Clostridium . В этом исследовании, используя как сбалансированные, так и несбалансированные методы для анализа дифференциально распространенных таксонов, мы обнаружили, что Propionibacterium постоянно более многочисленны в группе, получавшей MBM, чем в группе, получавшей смесь.Предыдущее исследование связывало присутствие Propionibacterium в кишечнике младенцев с кожной флорой матери, что может быть связано с колонизацией Propionibacterium во время кесарева сечения (Dominguez-Bello et al., 2010). Однако после того, как мы проанализировали данные на основе других группировок, включая способ доставки, мы не обнаружили существенной разницы в Propionibacterium , помимо группировки источников питания. Это говорит о том, что значительная разница Propionibacterium в этом исследовании в основном связана с источником питания. Propionibacterium обычно считается полезной бактерией (Holzapfel et al., 2001; Kechagia et al., 2013), хотя и не доминирует в микробиоме ядра кишечника. Более того, наши результаты машинного обучения UPARSE также подтвердили, что Propionibacterium был наиболее прогностическим индикатором для различения недоношенных детей, вскармливаемых MBM и искусственными смесями. В дополнение к Propionibacterium , результаты Gneiss также показали, что у младенцев MBM была значительно большая популяция из родов Streptococcus и Finegoldia , чем из группы формулы, но меньше из семейства Enterobacteriaceae и рода Enterococcus , которые являются в основном соответствует метатранскриптомическим результатам.

В этом исследовании мы не обнаружили различий в относительной численности Bifidobacterium и Lactobacillus между группами, получавшими MBM и смесью. Bifidobacterium и Lactobacillus считаются полезными и обычно доминируют у доношенных здоровых младенцев (Stark and Lee, 1982; Benno et al., 1984; Balmer and Wharton, 1989; Bezirtzoglou et al., 2011) . Подобно предыдущим исследованиям на недоношенных новорожденных (Gewolb et al., 1999; Palmer et al., 2007; Конг и др., 2016; Wandro et al., 2018), мы обнаружили в целом низкую относительную численность Bifidobacterium и Lactobacillus на основе как секвенирования ампликона гена 16S рРНК, так и методов метатранскриптомики, за исключением одного образца в каждой группе. Хотя предполагалось, что методы экстракции ДНК и выбор праймеров для ПЦР приведут к артефакту недопредставленности Bifidobacteria (Gomez-Llorente et al., 2013; Walker et al., 2015) с помощью метатранскриптомного подхода, который должен устранили систематическую ошибку, мы обнаружили, что Bifidobacteria действительно имели относительно низкую популяцию.Возможное объяснение этого феномена низкой относительной численности у Bifidobacterium связано с возрастом беременности (Butel et al., 2007; Arboleya et al., 2012; Черникова и др., 2018). Вероятно, что кишечник умеренно-поздних недоношенных новорожденных еще не готов к такому типу колонизации. С другой стороны, длительное пребывание недоношенных детей в больнице приводит к дисбактериозу из-за различий в воздействии окружающей среды в домашних условиях (Schwiertz et al., 2003; Magne et al., 2006; Рудьер и др., 2009; Rougé et al., 2010; Jacquot et al., 2011), а использование антибиотиков во время родов или прямое использование для новорожденных (Zimmermann and Curtis, 2019) могло способствовать низкой численности, независимо от источника питания.

Разные уровни метаболических генов L-фукозы в двух группах могут быть одной из причин различий в бактериальном составе. Некоторые исследования показали, что олигосахариды грудного молока (HMO) в большом количестве присутствуют в грудном молоке человека, но не могут всасываться младенцами.Однако HMO служат метаболическим субстратом для определенных бактерий в кишечнике младенца (Engfer et al., 2000; Gnoth et al., 2000). L-фукоза является одним из мономеров HMO и очень распространена в кишечнике человека несколькими общими кишечными бактериями человека, включая Bifidobacterium , E. coli и несколько видов Bacteroides , которые, как известно, используют L-фукозу ( Eagon, 1961; Pacheco et al., 2012; Bunesova et al., 2016; Westreich et al., 2019). Основываясь на наших результатах, мы предполагаем, что младенцы с МБМ имели доступ к большему количеству L-фукозы в виде олигосахарида, чем дети грудного возраста, которые могли отобрать определенные бактерии в кишечнике младенца (Bode, 2009).Кислотность кишечника, полученная из пищевых источников, также может влиять на микробиом кишечника новорожденных. Одно исследование показало, что pH образцов кала у младенцев MBM (5,49 ± 0,4) был значительно ниже, чем у младенцев, вскармливаемых смесью (6,91 ± 0,8), через 14 дней после рождения (Balmer and Wharton, 1989), что может служить одним из объяснения механизма повышенной кислотостойкости группы MBM мы наблюдали. Примечательно, что гамма-субъединица компонента B глицинредуктазы увеличилась на 20-log ₂ -кратное изменение в группе MBM.Глицин служит акцептором электронов и восстанавливается глицинредуктазой, продуцируемой анаэробными бактериями (Andreesen, 1994). Колонизация облигатных анаэробов, таких как Streptococcus anginosus , Clostridium butyricum и Veillonella dispar , имеет тенденцию к метаболизму, основанному на ферментации (Brown et al., 2013), что подтверждает наблюдение доминирующего Streptococcus , Clostridium , . и Veillonella в группе MBM данного исследования.Экспрессия гена устойчивости к кислоте, вероятно, была повышена в группе MBM, потому что Streptococcus , Clostridium и Veillonella продуцировали кислоту во время дыхания посредством ферментации. Связана ли повышенная экспрессия генов кислотостойкости и глицинредуктазы с использованием HMO, еще предстоит проверить в будущих исследованиях, в том числе, какие из бактерий более эффективны.

Соответствующее содержание аминокислот в молочных смесях может быть очень важным, особенно для недоношенных новорожденных (Jang et al., 2018). В этом исследовании мы обнаружили активацию пути, ответственного за расщепление двух незаменимых аминокислот, метионина и валина, в кишечнике новорожденных, вскармливаемых молочной смесью. Поэтому мы предполагаем, что содержание аминокислот в источниках питания может оказывать давление отбора на определенных членов микробиома. Поскольку источником белка большинства детских смесей является сыворотка коровьего молока, другие исследования, сравнивающие концентрацию аминокислот в плазме младенцев, также показали, что у младенцев, которых кормили молочными смесями с преобладанием сыворотки, были повышенные уровни валина и метионина (Janas et al. ., 1985; Шанлер и Гарза, 1987). Гиперметионинемия — это нарушение обмена веществ, при котором у большинства пациентов симптомы не проявляются. Однако у немногих пациентов, у которых действительно проявляются симптомы, проявляется клиническое неврологическое заболевание (Chou, 2000; Chamberlin et al., 2000) и умеренный гепатит (Augoustides-Savvopoulou et al., 2003; Baric et al., 2004). Исследование показало, что 9 из 10 детей с гиперметионинемией были связаны с потреблением молочной смеси с избытком метионина (Mudd et al., 2003). Отек головного мозга у двух из этих пациентов наблюдался при МРТ головного мозга, и они нормализовались после уменьшения количества принятого метионина.Гиперметионинемия вызвана недостаточностью активности глицин-N-метилтрансферазы (GNMT) (Augoustides-Savvopoulou et al., 2003; Luka and Wagner, 2003; Luka et al., 2006) и / или мутациями гена MAT1A (Chou, 2000 ; Chamberlin et al., 2000), в результате чего концентрация метионина в плазме достигала 1870 мкМ (нормальный диапазон 5–35 мкМ). Следовательно, необходимы дополнительные исследования, чтобы понять влияние этих двух аминокислот на ось кишечник – мозг в отношении неврологических заболеваний.Снижение избыточного количества метионина и валина в смеси может потребоваться для смягчения возникновения заболевания.

Секвенирование ампликона гена 16S рРНК обычно используется для определения микробиома кишечника, но существуют ограничения, включая неравномерную амплификацию ПЦР, короткие последовательности (Quince et al., 2009; Poretsky et al., 2014) и низкую точность картирования OTU (Huse et al., 2010; Ranjan et al., 2018). В последние годы быстрое развитие технологии высокопроизводительного секвенирования и снижение затрат сделали метатранскриптом возможным в исследованиях микробиома.В отличие от секвенирования ампликона гена 16S рРНК, метатранскриптом напрямую сравнивает экспрессию функции гена и динамические изменения (Bashiardes et al., 2016; Shakya et al., 2019). В этом исследовании мы обнаружили, что большинство различий в бактериальном составе между группой MBM и группой, получавшей смесь, совпадают. Однако существует небольшая разница в доле бактерий между этими двумя методами. В результатах метатранскриптома доля Streptococcus в группе MBM была больше, чем в группе формулы, что было противоположным в соответствии с круговыми диаграммами синтаксиса 16S.Анализ дифференциальной численности, основанный на Gneiss для данных секвенирования 16S, действительно согласуется с результатами метатранскриптома, согласно которым Streptococcus был более распространен в группе MBM, чем в группе формулы. Мы также обнаружили, что Veillonella и Klebsiella были мало представлены в результатах метатранскриптома, тогда как Bifidobacteria и Pantoea были широко представлены по сравнению с результатами секвенирования ампликона гена 16S рРНК. В этом исследовании мы одновременно экстрагировали ДНК и РНК для секвенирования ампликона гена 16S рРНК и анализа метатранскриптома, используя ту же стадию измельчения.На этом этапе было исключено, что некоторые бактерии, о которых известно, что они недостаточно представлены, вызваны недостаточным измельчением с использованием различных наборов на этапе экстракции нуклеиновых кислот. Поэтому мы предполагаем, что различия, наблюдаемые между двумя подходами, в основном связаны с избирательной амплификацией ПЦР, которая должна быть подтверждена параллельными сравнениями предварительно определенного состава микробиомов в будущем исследовании.

Основным ограничением этого исследования было то, что сбор образцов кала у недоношенных новорожденных, находящихся в отделении интенсивной терапии новорожденных (ОИТН), был серьезным препятствием.Схема выборки в этом исследовании смогла устранить столько мешающих факторов, сколько мы можем легко понять. Например, нам известно, что кесарево сечение по сравнению с вагинальными родами — это фактор, который, как известно, влияет на микробиом у младенцев, поэтому не было статистической разницы между количеством младенцев, рожденных каждым методом в наших группах исследования. Однако одной из уникальных характеристик этого исследования является то, что в него было включено относительно большое количество младенцев из числа коренных американцев. Насколько нам известно, микробиом младенцев коренных американцев не получил должной оценки в других исследованиях.Младенцы, включенные в наше исследование, хорошо представляют общую демографию отделений интенсивной терапии в нашем регионе. Ранее мы не проводили оценку соотношения показателей грудного вскармливания и искусственного вскармливания между этническими демографическими группами в нашем отделении интенсивной терапии интенсивной терапии, поскольку грудное вскармливание распространяется на все группы населения, независимо от демографии. Таким образом, мы не ожидали различия расы между нашими группами во время набора. Наши результаты могут иметь последствия для здоровья населения, которые будут представлять интерес для будущих исследований. Кроме того, с практической точки зрения, близнецы не были исключены из исследования, поскольку пары близнецов распространены в отделениях интенсивной терапии интенсивной терапии, поскольку они с большей вероятностью будут родить преждевременно, чем одиночные.Хотя экспозиции были схожими, мы не заметили идентичных микробиомов для двойных наборов.

Это исследование клинически актуально для недоношенных новорожденных во время их пребывания в отделениях интенсивной терапии, поскольку определенные заболевания, такие как NEC, имеют тенденцию возникать в отделениях интенсивной терапии с крайне и очень недоношенными группами населения с незрелым желудочно-кишечным трактом. В качестве первого комплексного исследования по сравнению влияния питания на раннюю микробную колонизацию кишечника недоношенных детей, это исследование было сосредоточено не только на таксономии, но и на функционировании с помощью методов 16S рРНК и метатранскриптома.Мы обнаружили, что относительная численность Propionibacterium , Streptococcus и Finegoldia и порядка Clostridiales в группе MBM была значительно выше, чем в группе формулы, а относительная численность семейства Enterobacteriaceae , род Enterococcus и Veillonella и класс Bacilli в группе формулы был значительно выше, чем в группе MBM. Пробиотики, Bifidobacterium и Lactobacillus , не имели значительных различий между двумя группами.Путем функционального анализа мы обнаружили, что бактериальные гены, связанные с глицинредуктазой, периплазматической кислотной стрессовой реакцией в Enterobacteria , механизмами кислотной устойчивости и функциями утилизации L-фукозы в группе MBM, были активированы, в то время как функции деградации метионина и валина были активированы. подавлено по сравнению с группой формулы. Эта статья дала более глубокое понимание формирования микробиома кишечника недоношенных детей в результате питания, что будет иметь большое значение для улучшения молочных смесей для этой группы населения.