Тест дст на туберкулез: Диаскинтест: что это такое (Сергиев Посад)

Новый кожный тест при диагностике и раннем выявлении туберкулеза у детей и подростков.

Главная -> Новый кожный тест при диагностике и раннем выявлении туберкулеза у детей и подростков.

Автор: Дроздова Маргарита Анатольевна. Заведующая детским поликлиническим отделением КГБУЗ       «Противотуберкулезный диспансер г.Комсомольска-на-Амуре» Министерства здравоохранения Хабаровского края.

     Анализ эпидемической ситуации по туберкулезу, начиная с 90-х годов, свидетельствует о подъеме эпидемии заболевания. Отмечается значительное увеличение заболеваемости как населения в целом, так и детей. Число впервые инфицированных детей за последнее десятилетие увеличилось более чем в 2 раза и составляет в ряде территорий России около 3% всего детского населения. Показатели заболеваемости туберкулезом в группах риска превышают общие показатели в 10 раз.

     Согласно Федеральному закону №77-ФЗ  «О предупреждении распространения туберкулеза в Российской Федерации» от 18 июня 2001 года массовое ежегодное обследование населения для активного выявления туберкулеза проводится у взрослых методом флюорографии, у детей – с помощью туберкулинодиагностики.

     При выявлении каких-либо изменений лица с подозрением на заболевание туберкулезом направляются в противотуберкулезный диспансер.

     Дообследование включает в себя использование различных методов — инструментальных, лабораторных, клинико-рентгенологических, часть из которых являются дорогостоящими. К сожалению, данные методы не позволяют выявить туберкулез на ранней стадии развития болезни в период латентной туберкулезной инфекции. Единственным методом, выявляющим туберкулез у детей на раннем этапе, является туберкулинодиагностика. В условиях массовой вакцинопрофилактики туберкулеза в детском возрасте возникают трудности дифференциальной диагностики поствакцинальной и инфекционной аллергии,  т. как в том и другом случае реакция на пробу Манту с 2ТЕ может быть положительной. Взрослое население практически все уже инфицировано микобактериями туберкулеза (МБТ) и туберкулинодиагностика не может быть использована для раннего выявления заболевания.

     В настоящее время в Российской Федерации разработан новый эффективный метод диагностики начальных проявлений туберкулеза – диаскинтест. Диаскинтест (ДСТ) – это  аллерген туберкулезный рекомбинантный в стандартном разведении. Метод основан на выявлении клеточного иммунного ответа на специфические для МБТ антигены. Комбинация двух антигенов, присутствующих в вирулентных штаммах МБТ и отсутствующих в вакцинном штамме БЦЖ и штаммах других непатогенных микобактерий, делает тест высокоспецифичным (превосходит РМ 2ТЕ на 30-40%).

     ДСТ вводится внутрикожно и вызывает у лиц с туберкулезной инфекцией специфическую кожную реакцию, являющуюся проявлением гиперчувствительности замедленного типа. У лиц, вакцинированных БЦЖ и не инфицированных МБТ, реакция на препарат ДСТ отсутствует.

     Препарат безопасен и не вызывает у детей, подростков и взрослых необычных реакций. Обладает высокой чувствительностью.

     Применение нового метода в комплексе с клиническими, рентгенологическими и лабораторными методами обследования всем пациентам независимо от возраста регламентировано приказом №855 от 29 октября 2009 года.

     Комсомольский ПТД использует новый метод ДСТ с декабря 2010г. Полученные результаты представлены в таблицах 1, 2, 3.

 

     Таблица №1. Количество проб – ДСТ за период 2013 – 2011г. По г.Комсомольску-на-Амуре.

Сделано  ДСТ всего:	2013				2012				2011
	3583				3630				2417
Из них:	дети		взрослые		дети		взрослые		дети		взрослые
	Абс.	%	Абс.	%	Абс.	%	Абс.	%	Абс.	%	Абс.	%
	3216	89,8	367	10,2	3076	84,7	554	15,3	1731	71,6	686	28,4

     За 3 года применения ДСТ в ПТД более широко используется в диагностике у детей и подростков: 2011г.- 71,6%; 2012г.-  84,7%; 2013 – 83,85.

     Таблица №2. Дообследование туберкулиноположительных детей и подростков с  применением ДСТ за период с 2013-2011г. (уточнение инфекционной и неинфекционной аллергии).

Год	Осмотрено детей всего в ПТД		Сделано ДСТ для уточнения характера аллергии		Результаты кожного теста
	Абс	%	Абс.	%	Отрицательные		сомнительные+ положительные
					Абс.	%	Абс.	%
2013	2793		1636	58,4	1598	97,7	38	2,3
2012	2131		1780	83,5	1674	94,0	106	6,0
2011	2479		1294	52,2	1061	82,0	233	18,0

 

Выводы по таблице №2:

     Включение в комплекс обследования детей и подростков новой методики раннего выявления латентной инфекции позволило значительно сократить число детей, нуждающихся в наблюдении у фтизиатра:

2013г. – кожных проб сделано 1636 детям, из числа отрицательных (1598)  — диагноз поствакцинальная аллергия – 496 (30,3%) из всех проб. Эти дети учету фтизиатра не подлежат.

2012г. – сделано 1780 кожных тестов, из них отрицательных – 1674, из числа отрицательных тестов аллергия у 645 детей (36,3%) учету не подлежали.

2011г. – проб 1294, отрицательных 1061, из них с диагнозом  поствакцинальной аллергии – 1054 (81,5%) учету фтизиатра не подлежали.

     Таблица №3. Дообследование туберкулиноположительных детей и подростков с применением ДСТ (назначение  курса профилактического лечения).

	2013		2012		2011
Осмотрено детей в ПТД из ОЛС	Абс	%	Абс.	%	Абс.	%
	2793		2131		2494
Взято на учет, из всех осмотренных при установленном инфицировании	765	27,4%	632	29,4%	463	18,7%
Из них взято с первичным инфицированием	682	89,2	549	86,7	374	80,8
Из них подлежат курсу проф.лечения	144	21,1	121	22,0	124	33,2

 

Выводы :

     Применение  нового теста позволило значительно сократить число детей и подростков (с впервые в жизни установленным инфицированием), которым показано профилактическое лечение, т. к. результаты теста подтверждают активность туберкулезной инфекции и адекватность назначения проф.лечения:

2013г. – из впервые взятых с первичным инфицированием 682 детей  и подростков подлежат химиопрофилактике — 144 (21,2%) от всех взятых на учет.

2012г.- взято 549, подлежат лечению 121 (22,0%).

2011г. – взято 374, проф.лечение получили – 124 (33,2%).

      Заключение: Таким образом, применение ДСТ в условиях ПТД позволяет своевременно выявлять у детей и подростков различные проявления туберкулезной инфекции, своевременно выявлять заболеваемость туберкулезом и проводить полноценную антибактериальную терапию.

 

Список литературы :

1.     Кожная проба с препаратом «диаскинтест» — новые возможности идентификации туберкулезной инфекции под редакцией академика РАИ и РАМН М.А.Пальцева. Москва. ОАО  «Издательство медицина» 2010г.

2.     Методические рекомендации: «Выявление туберкулеза и тактика диспансерного наблюдения за лицами из групп риска с использованием рекомбинантного туберкулезного аллергена – диаскинтест». Москва. 2011г.

3.     Медицинский научно-практический журнал «Лечащий врач».ст. «Новый кожный тест при диагностике и раннем выявлении туберкулеза у лиц из группы  риска» В.А.Аксенова.

Диагностика туберкулеза у детей

Туберкулез является широко распространенным инфекционным заболеванием, имеющим высокую социальную значимость. Часто заболевание не имеет выраженных проявлений. Поэтому так важна полноценная и своевременная диагностика туберкулеза, особенно у детей.

Какие методы диагностики туберкулеза существуют сегодня?

Проба Манту

Уже более века туберкулиновая проба Манту является привычным методом выявления туберкулезной инфекции. Она используется в основном при массовой диагностике среди детей и подростков. Целью проведения туберкулиновой пробы (пробы Манту) является как раннее выявление туберкулеза, так определение необходимости повторной вакцинации здоровых детей для развития специфического иммунитета.

Суть метода заключается в том, что внутрикожно вводится специальное вещество – туберкулин – компонент микробактерий туберкулеза. Спустя три дня медицинский работник оценивает реакцию организма на него. Проба Манту – это не прививка. Этот особый тест показывает наличие иммунитета к микобактериям туберкулеза, никакого риска заражения туберкулезом от проведенной пробы нет.

Несмотря на широкую распространенность этого метода, его дешевизну и простоту, возможность большого охвата населения, имеется ряд недостатков:

• Необходим особый уход за местом инъекции;

• Высокая частота ложноположительных или ложноотрицательных результатов, в том числе провоцируемых различными внешними и внутренними факторами.

Если ребенок был привит менее чем за месяц до пробы, переболел или было обострение какого-либо хронического заболевания, или ребенок чесал место пробы, его заклеивали пластырем, применяли антисептики – результаты могут быть искажены. Также результаты искажаются при нарушении техники проведения или качества препарата (хранили или перевозили неправильно). Реакция может возникать и при наличии в организме микроорганизмов, сходных с туберкулезными микобактериями, или при наличии аллергии, в том числе и на само вещество. Таким образом, проба Манту дает только общие представления о том, есть ли иммунитет к туберкулезу или нет.

Диаскинтест

Более 10 лет назад был расшифрован геном микобактерий туберкулеза. Открытие антигенов, специфичных для M. Tuberculosis человека, позволило разработать препарат Диаскинтест® (ДСT), который представляет собой комплекс рекомбинантных белков продуцируемых специальной кишечной палочкой. Он так же, как и Манту, предназначен для внутрикожного введения. Все дети с положительной реакцией на пробу Манту, выявленные при массовых обследованиях, при наличии соответствующих показаний направляются на консультацию к детскому фтизиатру в противотуберкулезную организацию для диагностики активного туберкулеза и виража пробы Манту, где им в обязательном порядке делают внутрикожную пробу с ДСТ. При положительной реакции на ДСТ всех детей тщательно обследуют, в том числе с применением компьютерной томографии.

Диаскинтест:

• позволяет уточнять и отсеивать ложноположительные реакции на пробу Манту,

• позволяет исключить некоторые ошибки диагностики туберкулеза,

• применяется в тех случаях, когда родители отказываются от пробы Манту, потому как представляет собой еще более «чистый» препарат, содержащий только белок, по своему строению идентичный белкам микобактерий туберкулеза.

Однако, он имеет ряд недостатков, так как также может давать ложноотрицательные результаты, не выявляет ранние и латентные формы туберкулеза, стоит дороже и также зависит от многих внешних и внутренних факторов, в том числе от техники введения, состояния здоровья ребенка.

Таким образом, проведение ДСТ отсеивает детей с аллергией на туберкулин, детей с ложными положительными реакциями и выявляет именно тех детей, которые подозрительны по инфицированию туберкулезом или которые уже болеют им.

Квантифероновый тест

Один из современных методов лабораторной диагностики туберкулеза, который помогает в выявлении как активного, так и скрытого туберкулеза. При его проведении никаких внутрикожных проб не ставят, а просто забирают венозную кровь на анализ, как при любом другом лабораторном исследовании. Этот метод выявляет в крови ребенка специфический интерферон, который может обнаружиться только у инфицированных туберкулезом.

Преимуществами теста являются его высокая чувствительность и специфичность, отсутствие каких-либо противопоказаний к проведению, он может проводиться вне зависимости от вакцинаций и болезней ребенка. Результаты анализа не зависят от вакцинации БЦЖ.

Квантифероновый тест делают в тех случаях, когда требуется выявление туберкулёзной инфекции после получения сомнительных результатов пробы Манту или ДСТ. Метод может использоваться для выявления туберкулёза в детских учреждениях во время карантина (когда использование внутрикожных проб недопустимо). Также тест применяют для выявления инфекции у лиц из групп риска — медицинских работников отделений ВИЧ-инфицированных, противотуберкулезных организаций, тюремных больниц, людям с противопоказаниями для туберкулиновой пробы.

Существенным недостатком теста является то, что он не может отличить обычное инфицирование и болезнь. Большинство взрослых людей в течении жизни, так или иначе, встречаются с возбудителем туберкулеза, хотя болезнь не развивается. Кроме того квантифероновый тест в 10% случаев дает ложноотрицательные результаты (при инфицировании особым штаммом «коровьего» туберкулеза). Тест довольно дорогой, делают его далеко не во всех лабораториях.

Наряду с кванифероновым тестом применяются и такие высокоточные лабораторные исследования, как ПЦР диагностика или анализ Т-клеточного маркера туберкулеза. В целом, они обладают теми же достоинствами и недостатками, что и квантифероновый тест и их используют для уточнения диагноза.

Теперь мы видим, что нет идеального единого метода диагностики. Диагностику туберкулеза проводят комплексно и поэтапно. Это позволяет выявить детей, которым необходима консультация фтизиатра, профилактическое лечение или полноценная противотуберкулезная помощь.

Тест на чувствительность к лекарственным препаратам — Молекулярные тесты

Что такое тестирование на лекарственную чувствительность?

Агаровые культуральные чашки показывают результаты теста на лекарственную чувствительность © CDC

Тестирование на лекарственную чувствительность означает тестирование, чтобы выяснить, есть ли у человека лекарственно-устойчивый туберкулез. Это означает выяснить, к каким препаратам чувствительны бактерии туберкулеза в их организме. Крайне важно, чтобы, если у человека может быть лекарственно-устойчивый туберкулез, это было обнаружено как можно скорее, чтобы пациенту можно было предоставить эффективное лечение туберкулеза.

Исторически тестирование на чувствительность к лекарствам проводилось путем культивирования бактерий. Для этого необходимы специальные лабораторные помещения и обученный персонал. Кроме того, это очень длительный процесс. Однако теперь доступно несколько новых тестов, одним из которых является тест Geneexpert. Его намного проще использовать, но до недавнего времени он давал лишь очень ограниченную информацию о лекарственной устойчивости.

Различные типы тестов на лекарственную чувствительность

Тесты на лекарственную чувствительность к туберкулезу в основном бывают двух разных типов. Одним из типов теста является культура, которая включает в себя изучение поведения бактерий. Например, растут ли бактерии в присутствии противотуберкулезных препаратов? Другой тип теста включает изучение генетических мутаций.

Молекулярные тесты на чувствительность к лекарствам

Тест GeneXpert

Поскольку резистентность возникает в результате генетических мутаций, этот подход заключается в обнаружении самих мутаций. Было идентифицировано множество мутаций, связанных с устойчивостью, и разработаны молекулярные тесты для их обнаружения. К преимуществам молекулярных методов определения лекарственной чувствительности относятся быстрое время выполнения, а к недостаткам — низкая чувствительность к некоторым соединениям и основная проблема — стоимость.

Обычно считается, что для проведения молекулярных анализов требуется квалифицированный персонал. Однако некоторые анализы, такие как Geneexpert, чрезвычайно просты в использовании. Один тест, тест TruNat, можно даже взять за пределы лаборатории и использовать в качестве «ближнего» теста в месте оказания медицинской помощи. Однако до недавнего времени у Geneexpert была ограниченная сопротивляемость, которую можно было обнаружить.

Beacon Assays

Beacon Assays выявляют комплекс M. tuberculosis и связанную с ним устойчивость к рифампицину непосредственно в образцах мокроты с помощью сверхчувствительной ПЦР. Анализ Genexpert TB представляет собой автоматизированную систему, работающую в режиме реального времени, которая имеет ряд преимуществ, в том числе тот факт, что это система с закрытой пробиркой. ВОЗ поощряет использование теста Genexpert TB, но у него есть ряд недостатков.

Анализы линейных зондов

Анализы линейных зондов представляют собой тесты на чувствительность к лекарственным средствам, в которых используются методы ПЦР и обратной гибридизации для быстрого обнаружения мутаций, связанных с лекарственной устойчивостью. Линейные зонды предназначены для идентификации комплекса M.tuberculosis и одновременного выявления мутаций, связанных с лекарственной устойчивостью. Одним из недостатков этих анализов является то, что они имеют формат открытой пробирки, что может привести к перекрестному загрязнению и повышенному риску ложноположительных результатов.

Технология Line Probe Assay (LPA) подходит для использования в национальных/центральных референс-лабораториях или в лабораториях, где есть подтвержденные возможности для проведения молекулярных испытаний. Должна быть адекватная и соответствующая лабораторная инфраструктура и оборудование. Это также должно включать необходимые меры предосторожности в отношении биобезопасности и предотвращение загрязнения. Соответствующий персонал лаборатории также должен быть обучен проведению процедур LPA. ¹

Служба оперативной связи ВОЗ

В период с декабря 2019 г. по январь 2021 г. Всемирная организация здравоохранения (ВОЗ) опубликовала три оперативных сообщения по теме туберкулеза.

Первое быстрое сообщение касалось изменений в лечении лекарственно-устойчивого туберкулеза. Изменения, предложенные в обзоре фактических данных, включали поэтапный отказ от более коротких схем, содержащих инъекционные препараты, и введение более короткой схемы, полностью содержащей бедаквилин перорально, для подходящих пациентов с МЛУ/РУ-ТБ. Кроме того, у пациентов с ТБ с широкой лекарственной устойчивостью (ШЛУ-ТБ) в условиях операционных исследований в качестве альтернативы более длительному режиму может использоваться более короткий режим с бедаквилином, претоманидом и линезолидом. ²

Второе краткое сообщение касалось использования молекулярных анализов в качестве первоначальных тестов для диагностики туберкулеза и устойчивости к рифампицину. Это краткое сообщение было направлено на информирование национальных программ по борьбе с ТБ и других организаций об основных последствиях последних данных об использовании специфических молекулярных анализов в качестве первоначальных диагностических тестов легочного и внелегочного ТБ и РУ-ТБ у взрослых и детей. ³

Наконец, третье краткое сообщение представляло собой обновленную информацию об использовании тестов амплификации нуклеиновых кислот для выявления ТБ и ТБ с лекарственной устойчивостью. ⁴

Обновление страницы

Последнее обновление этой страницы было в июле 2022 года. ссылка на нас на tbfacts.org/drug-susceptibility/.

Сноски

1. «Молекулярный линейный зонд для выявления устойчивости к противотуберкулезным препаратам второго ряда», ВОЗ, www.who.int/tb/areas-of-work/laboratory/policy_statements [↩]
2. Быстрая коммуникация: Ключевые изменения в лечении лекарственно-устойчивого туберкулеза, 2019 г., https://www.who.int/tb/publications/2019/rapid_communication_MDR/en/[↩]
3. Быстрая коммуникация: Молекулярные анализы в качестве исходного тесты для диагностики туберкулеза и устойчивости к рифампицину, 2020 г., https://www.who.int/tb/publications/2020/rapid- Communications-Molecle-Assays/en/[↩]
4. Rapid Communication: Update on the use тестов амплификации нуклеиновых кислот для выявления ТБ и ТБ с лекарственной устойчивостью, 2021 г., https://www.who.int/publications/i/item/update-on-the-use-of-nucleic-acid-amplification-tests- для быстрого обнаружения-туберкулеза и лекарственно-устойчивого-туберкулеза[↩]

Вы можете узнать больше о:

Экспресс-тестирование на чувствительность к противомикробным препаратам для сепсиса I QuantaMatrix — Tuberculosis Solution

QDST ^TM , экспресс-тест на туберкулез Лекарственная чувствительность

QDST — это экспресс-система для определения фенотипической лекарственной чувствительности к туберкулезу. Система предоставляет результаты тестов на чувствительность к 15 препаратам, включая агенты первого и второго ряда, всего за неделю, что позволяет лабораториям сократить время обработки на 3–5 недель по сравнению с традиционными методами тестирования.

• Результаты определения восприимчивости к туберкулезу через 7 дней
• Произвольный доступ на 120 образцов
• Инкубатор для посева ТБ
• Полностью автоматизированная оптическая визуализация для мониторинга роста бактерий
• Технология анализа изображений на основе алгоритма
• Результаты S/R основаны на критической концентрации

Решения QuantaMatrix для микробной диагностики являются первыми решениями, разработанными в Корее, и получили самые высокие награды, включая сертификацию New Excellent Technology (NET) и сертификацию новых медицинских технологий.

Результаты теста на лекарственную чувствительность к туберкулезу

за неделю

QDST предоставляет результаты теста на лекарственную чувствительность к туберкулезу всего за 7 дней. По сравнению с обычными методами тестирования, которые занимают от 4 до 6 недель, QDST значительно сокращает время получения результатов.

* ТЛЧ: Тест на чувствительность к лекарственным средствам для Mycobacterium tuberculosis

КТЛЧ с жидкой культурой

• Жидкая культура
• летнее время

1 неделя ТЛЧ

КТЛЧ с твердой культурой

• Твердая культура
• летнее время

1 неделя ТЛЧ СОХРАНИТЬ 5 НЕДЕЛЬ

Традиционное ТЛЧ с твердой культурой

• Твердая культура
• летнее время

6 week DST

0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
weeks

Treatment Decision Support

QMAC-DST ^TM PLUS Панель включает LNZ и Cs, чтобы помочь клиницистам назначать оптимальное лечение пациентам с лекарственно-устойчивым ТБ. Между тем, скважины с несколькими концентрациями доступны для INH, RIF, EMB и Cs. Концентрации высокого и низкого уровня резистентности предоставляются в дополнение к критической концентрации, что способствует принятию более обоснованных решений о лечении.

Преимущества

• Комплект
• Рабочий процесс
• Программное обеспечение

Комплект QDST

QMAC-DST ^TM PLUS включает панель QMAC-DST ^TM PLUS вместе с герметиком для панелей. Панель вмещает 4 первичных и 11 вторичных противотуберкулезных препаратов с различной концентрацией. В дополнение к агарозе, которая иммобилизует бактерии ТБ, крышка панели и герметик панели служат для обеспечения безопасности пользователя.

3-уровневая система безопасности

Безопасность пользователя имеет первостепенное значение, поскольку туберкулез передается воздушно-капельным путем. Панель QMAC-DST ^TM PLUS имеет в общей сложности три уровня безопасности, как показано ниже, для предотвращения утечки образцов в процессе тестирования.