Проба манту состав вакцины: Правда ли, что в состав пробы Манту входят ядовитые вещества? | ЗДОРОВЬЕ: Медицина

Содержание

Проба Манту: состав, как действует

Общеизвестно, что всем новорожденным делают прививку БЦЖ. Она необходима для того, чтобы обеспечить защиту детского организма от такого заболевания, как туберкулез. Позже, а именно в возрасте 7-14 лет, делают ревакцинацию БЦЖ.

Для того чтобы проверять детский организм на присутствие туберкулеза, проводится проба Манту. Она делается посредством ввода специального препарата, который содержит туберкулин. Лекарство вводится подкожно и вызывает определенную реакцию детского организма. В разговорной речи она называется «пуговкой». По данной реакции можно определить, здоров человек или нет. Этот тест очень важен, так как позволяет диагностировать туберкулез на ранней стадии. А чем раньше будет выявлено заболевание, тем быстрее начнется лечение.

Проба на реакцию Манту. Состав вводимого препарата

Необходимо понимать, что ввод препарата на реакцию, это не прививка, а тест. Препарат, используемый при данной процедуре, не содержит каких-либо элементов, влияющих на иммунитет ребенка. Данный тест делается для выявления туберкулеза на ранней стадии.

Из чего состоит проба Манту? Состав сейчас рассмотрим, а также затронем тему измерения результата.

Так как ребенку делается инъекция медицинским препаратом, то родителям необходимо знать, что входит в данную пробу. Встречаются случаи возникновения аллергии на реакцию Манту. Состав вещества содержит туберкулин. Он производится из палочек туберкулеза посредством их нагревания. Помимо этого вещества, проба содержит хлорид натрия и фенол. Данный тест заключается в провоцировании в месте прокола реакции организма, образуется папула. Далее необходимо измерить данную припухлость. По результатам ее размера определить, как иммунитет ребенка борется с туберкулезом. Важным моментом является то, чтобы папула не подвергалась каким-либо повреждениям. Например, расчесыванию или воздействию воды.

При каких условиях можно проводить пробу Манту?

У данной пробы нет побочных эффектов. Она не наносит вред организму ребенка. Единственным предписанием врача является то, что пробу нельзя подвергать воздействию воды на протяжении 3 дней.

Для чего делается реакция Манту?

Состав препарата, который вводят, мы рассмотрели. Теперь разберемся, зачем делается проба?

Для определения присутствия в организме туберкулезной инфекции.
Данная реакция показывает, болеет ли ребенок туберкулезом в данный момент.
Проба Манту определяет уровень работы иммунной системы, его сопротивляемость туберкулезной инфекции.
Появляется возможность выявить детей, которым нужна ревакцинация БЦЖ.

Противопоказания

Несмотря на то что противопоказаний в проведении данной пробы практически нет, встречаются случаи, когда врач может оградить ребенка от реакции Манту по определенным признакам состояния его организма:

Повреждения кожного покрова в месте, где делается реакция Манту. Это могут быть какие-либо заболевания, связанные с высыпаниями или каким-то другим раздражением.
Если ребенок переносит какие-либо хронические заболевания или инфекции, то ему также противопоказана данная проба.
Аллергия является противопоказанием для реакции Манту.
Повышенная температура тела.
Эпилепсия.
Судороги.

Как оценивается результат?

Состав пробы Манту рассмотрели выше. Теперь поговорим о результатах. Оценку осуществляет врач или медицинская сестра. Проверка производится через три дня. Посредством линейки измеряется припухлость, которая образовывается после введения раствора.

Отрицательная, сомнительная, гиперергическая и положительные реакции

Существует пять результатов оценки реакции манту (состав вакцины при этом всегда одинаковый), а именно положительный, отрицательный, гиперергический, сомнительный, ложный.

Отрицательная реакция на пробу Манту проявляется следующими признаками:

Отсутствие припухлости.
На коже, где был сделан укол, присутствует легкое покраснение.
Виден след укола.

Данная реакция означает, что ребенок здоров. Поэтому нет необходимости вырабатывать антитела.

Сомнительная реакция организма на пробу Манту:

Размер папулы после прививки составляет 2-4 миллиметра.
Припухлость вокруг места укола отсутствует, но кожа имеет красный оттенок.

Такие данные означают, что организм отреагировал на введение препарата, содержащего туберкулез, но справился с ним.

Если размер папулы составляет больше 5 миллиметров, то реакция на пробу Манту считается положительной. В норме размер может быть до 10 миллиметров. Но когда ее размер больше 5, то рекомендуется показать ребенка фтизиатру.

Как проявляется гиперергическая реакция? Если после ввода препарата на коже образовывается уплотнение, размер которого превышает 17 миллиметров, а также образовываются какие-либо язвочки, то это верный признак того, что ребенок заражен туберкулезом.

Ложноположительная

Данная реакция организма имеет такие же признаки, как положительная. Следует знать, что для того, чтобы определить способность детского организма к возникновению такого заболевания, как туберкулез, необходимо провести его обследование. Исходя только из результатов на реакцию Манту, нельзя делать вывод, что организм не способен бороться с данным заболеванием. Поэтому при положительной реакции на состав прививки Манту следует сделать флюорографию, сдать мокроту.

Также нужно обследовать других членов семьи на наличие у них в организме такого заболевания, как туберкулез. Ни в коем случае не следует откладывать визит к фтизиатру. Так как лучше сделать диагностику и выявить болезнь на ранней стадии, чем потом лечить запущенные формы.

Какие факторы могут помешать провести реакцию Манту

Во-первых, если ребенок болел какими-либо заболеваниями, то реакцию Манту делать нельзя. Также следует знать, что должен пройти один месяц после того, как ребенок стал здоров. Либо после снятия карантина. Во-вторых, совмещать реакцию Манту с другими прививками не стоит.

Дело в том, что когда делаются какие-либо вакцинирования, то иммунитет ребенка снижается. Поэтому проба Манту может дать ложный результат. Также на неверный результат могут повлиять такие факторы, как аллергия, инфекционные заболевания, чувствительность кожи, иммунитет организма к туберкулезным бактериям.

Аллергическая реакция

Иногда появляется аллергическая реакция организма на реакцию Манту. Состав препарата, а точнее некоторые компоненты вакцины, могут вызвать подобное.

У детей, которым данная проба ставится впервые, может возникнуть аллергическая реакция. Причиной может стать индивидуальная непереносимость препарата либо наследственность. Также такую реакцию может вызвать предрасположенность организма к аллергии.

Мы уже разобрались в том, что входит в состав Манту. Именно некоторые компоненты вызывают аллергию. Часто ее возникновение на реакцию Манту вызывает фенол. Это вещество входит в состав препарата. Оно является токсичным. Но в маленьких дозах не наносит вреда организму ребенка. Однако встречаются случаи, что у некоторых деток, которые склонны к аллергическим реакциям, фенол становится причиной возникновения недуга.

Следует знать, что самостоятельно диагностировать, на что у ребенка возникла аллергия, не стоит. Необходимо обратиться за помощью к специалисту, если замечены какие-либо реакции организма. Точно определить причину возникновения такой реакции может только доктор после специального обследования.

Какие существуют нормы на реакцию Манту

Для того чтобы определить, как реагирует организм на Манту, необходимо иметь результаты всех проб, сделанных с момента привития ребенка. В идеале каждая последующая должна уменьшаться в размере на один или два миллиметра. Резкое изменение уплотнения в большую сторону говорит о том, что организм подвержен возникновению туберкулеза, и необходимо провести дополнительное обследование для того, чтобы исключить либо подтвердить данное заболевание.

Каждый родитель вправе отказаться от проведения реакции Манту своему ребенку. Для этого необходимо написать отказ от проведения данной процедуры. Но следует помнить, что не привитый человек подвергается большей вероятности заражения туберкулезом. При нормальной реакции организма, когда уплотнение уменьшается с каждым годом, ребенку делается ревакцинация БЦЖ в возрасте 7 лет. К данному периоду уплотнение сходит на нет. Тогда у ребенка после пробы на Манту остается только след от укола.

Альтернативный вариант

Как сделать так, чтобы ребенку не делалась проба Манту? Состав вакцины может вызвать осложнение в организме, поэтому можно воспользоваться альтернативным методом для диагностики. Самым простым способом проверки является анализ крови, который можно сдать в любой лаборатории.

На Украине после пробы Манту госпитализированы 35 детей — РБК

На Украине временно приостановлено проведение противотуберкулезной вакцинации детей. Об этом сообщила пресс-служба Минздрава республики. Как говорится в заявлении, это связано с тем, что на днях в Винницкую центральную районную больницу и Винницкую областную детскую больницу для обследования были госпитализированы 35 детей (1991-1999 г.р.) из с.Мизяковские Хутора Винницкого района.

Дети жаловались на плохое самочувствие именно после проведения в школе туберкулинодиагностики (были вакцинированы 93 школьника).

После массовой неадекватной реакции на пробу Манту прививки отменили на всей территории страны.

Министерство здравоохранения Украины создало комиссию, в состав которой вошли специалисты Центра иммунобиологических препаратов, которые работают на ЗАО «Биолик» (Харьков), где производится вакцина туберкулин. Производитель препарата, отмечают в пресс-службе, контролирует его качество на всех этапах производства вакцины, а контроль за транспортировкой и хранением осуществляют медицинские заведения, которые используют туберкулин.

Туберкулин используется для своевременного выявления больных туберкулезом, лиц с повышенным риском заболевания и для отбора лиц, которые подлежат прививке против туберкулеза.

В России подобных случаев госпитализации школьников не наблюдалось. Однако часто ученики российских школ попадают в больницы в связи с пищевыми отравлениями. Так, к примеру, в марте этого года в Самарской области 32 школьника отравились в результате нарушения санитарных норм в школьной столовой. Инцидент произошел в поселке Ленинский Красноармейского района. В ходе проведенной проверки выяснилось, что условия, в которых хранились продукты в школьной столовой, не соответствовали установленным санитарным требованиям.

Прививка — Аналитический интернет-журнал Vласть

«Не плачьте, мамочка, у вас еще две дочки — будете ради них жить»

История про самое опасное осложнение после кори — подострый склерозирующий панэнцефалит

Фёдор Катасонов, педиатр: «В цивилизованной медицине нет понятия «медотвод»

Почему стратегия «подождать, пока окрепнет иммунитет» плохая и как вакцинировать детей, имеющих различные патологии

Осложнения после БЦЖ и других вакцин

Как их распознать и каков порядок регистрации

«Вы первая мать, которая спорит со мной из-за пробы Манту и не соглашается на медотвод»

Варианты реакций на пробу Манту и диагностика туберкулёза в Казахстане

Почему привитые люди тоже болеют туберкулёзом

Вакцине БЦЖ 100 лет и до сих пор это единственная защита от заболевания

Как в Казахстане «провалилась» вакцина от ВПЧ

Девушки остались без защиты от вируса, вызывающего рак шейки матки

Почему в Казахстане нет нормального доступа к дополнительным вакцинам?

Когда казахстанские дети и их родители смогут получить вакцину от ветряной оспы

«Вакцина стоит 220 тысяч, будете выкупать?»

Как защититься от бактериальных пневмоний и менингитов

Чем опасны вирусные гепатиты А, В и С?

И как они могут привести к раку, депрессии и трансплантации

COVID-19 и плановая вакцинация

Как пандемия может спровоцировать новые вспышки туберкулеза, кори и полиомиелита

Так ли страшна прививка АКДС?

Разбираем историю создания вакцины АКДС, ее состав и возможные осложнения, которыми принято пугать в интернете

«Я жива благодаря коллективному иммунитету»

Как можно «нагнать» календарь прививок, если вам их не ставили в детстве

Может ли полиомиелит вернуться в Казахстан?

И почему борьба с этой инфекцией — один из самых успешных и непростых примеров в истории XX века

Жюль Хоффман, Нобелевский лауреат: «То, что происходит в вакцинологии сейчас — это фантастика»

Влияют ли прививки на иммунитет и зачем они вообще нужны

Почему врачи верят в мифы о вакцинах и ставят ложные медотводы?

О роли медиков в недоверии к вакцинации

Детские болезни, которые возвращаются

Почему почти забытые инфекции встречаются все чаще

Какие прививки входят в казахстанский календарь вакцинации

Зачем они нужны и действительно ли эффективны

«Складывается ощущение, что антипрививочное движение управляемо»

Про национальный прививочный календарь, новые вакцины и право выбора

Вакцинация во время беременности – эксперимент над ребенком или необходимость?

Истории женщин, живущих в Казахстане и за рубежом

Атопический дерматит, аллергия на куриный белок и вакцина КПК – что делать?

Международный опыт и история одной казахстанской семьи

Что ожидать от индийской вакцины от кори, паротита и краснухи?

Отвечаем на самые популярные вопросы

«Не у всех людей, получивших в детстве вакцину, формируется иммунитет»

Почему в Казахстане так часто происходят вспышки кори и когда может быть следующая

«Я не знала, что корь настолько страшна»

Две истории о детях, переболевших корью

Отделение иммунопрофилактики — деятельность направления и специалисты

Что такое вакцинация?

Вакцинация – наиболее эффективный и безопасный способ создания защиты против инфекционных заболеваний. Первичная вакцинация в зависимости от вида вакцины может состоять из одной или нескольких прививок (первичный вакцинальный комплекс). При проведении первичной вакцинации в организме вырабатываются специальные антитела в достаточном для защиты от инфекции количестве.

Ревакцинация – повторное введение вакцины через определённые промежутки времени. Ревакцинация необходима для поддержания количества антител на достаточном для защиты уровне.

Основные профилактические прививки

Гепатит В

Вирусная инфекция, при которой поражается печень. Передаётся от матери к ребёнку, через кровь инфицированного человека, нестерильные медицинские инструменты, при половом контакте.

Вакцина содержит только участки поверхностной оболочки вируса («живого» вируса в вакцине нет). Стандартный курс вакцинации состоит из трёх прививок по схеме: 0-1мес.-6мес. По усмотрению врача могут использоваться иные графики вакцинации.

Если ребёнок имеет высокий риск заражения (мама-носитель вируса гепатита В) вакцинацию проводят в четыре этапа: 0-1мес.-2мес.-12мес. Вводится внутримышечно в область плеча или бедра. Поствакцинальные реакции наблюдаются редко. Возможна болезненность в месте введения в первые 1-3 дня после прививки. Вакцины различных производителей являются взаимозаменяемыми. В России используются как отечественные вакцины («Регевак»), так и импортные («Энджерикс», Бельгия).

Туберкулёз

Бактериальная инфекция, при которой могут поражаться лёгкие, кости, почки, лимфатические узлы и другие органы. У детей раннего возраста возможно развитие тяжелейшего туберкулёзного менингита. Заражение происходит воздушно-капельным путём.

Вакцина содержит живые ослабленные микобактерии туберкулёза. В России используется только отечественный препарат в двух дозировках (БЦЖ, БЦЖ-М). Вводится внутрикожно в область левого плеча. Через 4-6 недель в месте введения развивается инфильтрат, далее появляется корочка и постепенно формируется небольшой рубчик. Ревакцинации проводятся в 7 и 14 лет детям с отрицательной р. Манту. Реакция Манту проводится ежегодно и не является прививкой.

Коклюш

Бактериальная инфекция, вызывает приступы мучительного спастического кашля в течение нескольких недель. Особенно опасна для детей раннего возраста. Передаётся воздушно-капельным путём.

Вакцина – содержит либо целую «убитую» коклюшную клетку (цельноклеточная отечественная вакцина) либо только 2-3 необходимых для выработки защиты компонента клетки (ацеллюлярные импортные вакцины). Как правило, коклюшный компонент входит в состав той или иной комбинированной вакцины (3-х, 5-ти валентной). Вакцинальный комплекс у детей состоит из трёх прививок с интервалом 1,5 мес. 1-ю ревакцинацию проводят через 1год после окончания вакцинального комплекса. 2-ю ревакцинацию желательно провести 6 лет (только ацеллюлярной вакциной). Вводится только внутримышечно в область бедра или плеча. Поствакцинальные реакции наблюдаются в первые 1-3 дня в виде развития покраснения, болезненности, уплотнения в месте введения и повышения температуры.

В России используются следующие вакцины, содержащие коклюшный компонент: отечественная трёхкомпонентная вакцина АКДС, четырехвалентная «Бубо-Кок» (цельноклеточные) и ацеллюлярные импортные вакцины (трёхкомпонентная «Инфанрикс», Бельгия; пятикомпонентная «Пентаксим», Франция).

Дифтерия

Бактериальная инфекция, при которой развивается отёк гортани, поражается сердце, нервная система. Заражение происходит воздушно-капельным путём.

Столбняк

Споры столбняка поражают нервную систему. Действие нейротоксина вызывает судороги и паралич мышц в том числе дыхательных, что может привести к смерти. Споры проникают в организм через загрязнённые раны.

Вакцины против дифтерии и столбняка — не содежат живых микроорганизмов. В их состав входят только дифтерийный и столбнячный анатоксины. Как правило, эти компоненты входят в состав той или иной комбинированной вакцины (2-х, 3-х, 5-ти валентной). Вакцинальный комплекс у детей состоит из трёх прививок с интервалом 1,5 мес. 1-ю ревакцинацию проводят через 1год после окончания вакцинального комплекса. 2-ю ревакцинацию – перед школой. 3-ю ревакцинацию – в 14 лет. Далее ставится по одной прививке каждые 10 лет. Вводится внутримышечно (подросткам и взрослым можно вводить глубоко подкожно). Поствакцинальные реакции наблюдаются в первые 1-3 дня в виде покраснения, болезненности в месте введения и повышения температуры. Вакцины различных производителей являются взаимозаменяемыми. В России используются следующие вакцины, содержащие дифтерийный и столбнячный анатоксины: отечественные (трёхкомпонентная вакцина АКДС, двухкомпонентные АДС и АДС-М), а также импортные вакцины (трёхкомпонентная «Инфанрикс», Бельгия; пятикомпонентная «Пентаксим», Франция).

Полиомиелит

Вызывается вирусом, который поражает нервную систему с развитием парезов и параличей. Путь заражения – фекально-оральный.

Существует два вида вакцин. Первая, инактивированная полиомиелитная вакцина (ИПВ)- содержит «убитый» вирус. Применяется как в составе комбинированных вакцин (5-ти валентная вакцина) так и как монопрепарат. У детей первого года жизни для проведения первых 2-х прививок должна использоваться только ИПВ (исключает риск развития вакциноассоциированного полиомиелита). Вакцина вводится внутримышечно. Поствакцинальные реакции, как правило, отсутствуют. В России зарегистрированы следующие инактивированные моновакцины: «Имовакс Полио», Франция; «Полиорикс», Бельгия. ИПВ компонент входит в состав пятивалентной вакцины «Пентаксим», Франция. Второй вид, оральная полиомиелитная вакцина (ОПВ, Россия), содержит живой вирус. Её рекомендовано использовать для проведения ревакцинаций (на 2-м году жизни и в 14 лет). Вакцина закапывается в рот (4 капли). Поствакцинальные реакции наблюдаются редко.

Пневмококковая и гемофильная инфекции

Вызваны бактериями, которые могут приводить к развитию отита, синусита, бронхита, пневмонии, менингита и сепсиса. Заболеваниям, вызванным этими бактериями больше подвержены дети до 5 лет (особенно до 2-х лет) в силу незрелого иммунного ответа. Вакцинация против пневмококковой и гемофильной инфекций детей первого года жизни включена в Национальные календари иммунизации большинства развитых стран. Заражение происходит воздушно-капельным путём от больных или носителей.
Вакцины и от пневмококковой и от гемофильной инфекции не содержат живых бактерий – только участки оболочки микроба. Вводятся внутримышечно в область плеча или бедра. Поствакцинальные реакции наблюдаются не часто в виде местной (уплотнение, покраснение) и общей реакции (недомогание, повышение температуры) в первые 1-3 дня после прививки.

Вакцины от пневмококковой инфекции бывают конъюгированными («Превенар», США, применяется с 2-х мес. жизни по схеме согласно инструкции в зависимости от возраста ребёнка) и полисахаридными («Пневмо 23», Франция, применяется с 2-х лет).
Вакцины от гемофильной инфекции могут входить в состав комплексных вакцин (5-ти валентная «Пентаксим», Франция) или применяются как монопрепараты («Хиберикс», Бельгия; «Акт-Хиб», Франция). Рекомендованы для детей с 3-х мес. жизни до 5-ти лет. Схема вакцинации зависит от возраста ребёнка.

Грипп

Острая вирусная респираторная инфекция. Опасна высокой температурой (повышается риск развития фебрильных судорог) и частотой осложнений (отит, пневмония). Заражение происходит воздушно-капельным путём.

Вакцины от гриппа, разрешённые к применению у детей, не содержат живых вирусов – только частички разрушенного вируса. Начинать прививать ребёнка можно с 6-ти мес. Первый раз (если ребёнок не болел и не прививался ранее от гриппа) рекомендуется ставить две прививки с интервалом 1 мес. и далее ежегодно в сентябре-октябре. Поствакцинальные реакции наблюдаются редко. Возможна болезненность и покраснение в месте укола, недомогание в первые 1-3 дня. В России для вакцинации детей используется отечественная вакцина «Гриппол плюс» и различные импортные препараты («Инфлювак», Нидерланды; «Ваксигрип», Франция; «Агриппал», Италия; «Флюарикс», Бельгия).

Корь, краснуха, паротит

Острые вирусные инфекции сопровождающиеся повышением температуры и появлением характерной сыпи (корь, краснуха). При паротите (свинка) увеличиваются околоушные железы. Передаются воздушно-капельным путём.

Вакцины – содержат живые ослабленные вирусы. Могут быть использованы как моновакцины, так и комбинированные препараты («Приорикс», Бельгия). Вакцинация проводится в 1 год, а ревакцинация в 6 лет. Вводятся вакцины подкожно. Поствакцинальные реакции редки, но возможны в период с 5 по 15 день чаще всего в виде повышения температуры и появления сыпи.

Ветряная оспа

Острое вирусное заболевание, при котором характерны лихорадка и сыпь в виде пузырьков. Чем старше ребёнок, тем тяжелее он переносит заболевание ветряной оспой. Реактивация вируса после перенесённой «ветрянки» в дальнейшем может проявиться опоясывающим герпесом. Передаётся воздушно-капельным путём.
Вакцина – содержит живые ослабленные вирусы. Вакцинация проводится однократно (для подростков и взрослых может быть предусмотрена ревакцинация). Препарат вводится подкожно. Поствакцинальные реакции редки, но возможны через 1-3 недели после прививки чаще всего ввиде повышения температуры и появления сыпи. В России зарегистрированы две вакцины («Варилрикс», Бельгия; «Окавакс», Франция).

Клещевой энцефалит

Вирусная инфекция, при которой поражаются клетки центральной нервной системы. Существует риск развития тяжёлых инвалидизирующих последствий и смерти. Вирус передаётся при укусе клеща и при употреблении сырого молока.

Вакцина – не содержит живых вирусных частиц, только разрушенные, инактивированные вирусы. Вакцинировать импортными вакцинами можно с возраста 1год (при необходимости с 6-ти мес.), так как существуют специальные детские дозировки. В России зарегистрированы: «ФСМЕ-Иммун», Австрия; «Энцепур», Германия. Отечественной вакциной можно вакцинировать — с 3-х лет. Стандартный вакцинальный комплекс состоит трёх прививок (первый год две прививки с интервалом 1-3 мес., на следующий год ещё одна) и далее проводят ревакцинации с интервалом 3-5 лет. Существуют ускоренные схемы иммунизации. Все используемые вакцины при необходимости взаимозаменяемы. После прививки в первые 1-3 дня может наблюдаться недомогание, редко — повышение температуры, покраснение в месте введения.

Гепатит А

Вирусная инфекция, при которой поражаются клетки печени. Путь заражения фекально-оральный (через воду, продукты и т.п.).

Вакцина – не содержит живых вирусных частиц, только инактивированные вирусы. Вакцинация проводится в два этапа с интервалом 6-12мес. Вакцина вводится внутримышечно в область плеча. Поствакцинальные реакции, как правило, отсутствуют. Возможно, лёгкое недомогание в первые три дня после прививки. Вакцины различных производителей являются взаимозаменяемыми.

В России зарегистрированы: отечественная вакцина «Геп-А-ин-ВАК» (используется только с 3-х лет) и импортные препараты («Хаврикс», Бельгия; «Аваксим», Франция).

Папилломавирусная инфекция (ВПЧ-инфекция)

Вирусная инфекция, при которой вирус проникает внутрь клеток кожи, слизистой и, встраиваясь в геном клеток, вызывает их патологические изменения. Инфицирование 6 и 11 типом ВПЧ проявляется разрастанием в виде «цветной капусты» на слизистой аногенитальной области и гортани. При инфицировании онкогенными 16 и 18 типами ВПЧ возрастает риск развития рака на слизитой аногенитальной области и шейки матки. Заражение происходит при прямом контакте заражённой слизистой со здоровой (половой путь передачи). Возможна передача от матери ребёнку в процессе родов (6 и 11тип вызывают кандиломатоз гортани).

Вакцины – содержат только участки поверхностной оболочки вируса («живого» вируса в вакцине нет). Существует две вакцины: четырехвалентная («Гардасил», США, защищает от 6,11,16 и 18 типов ВПЧ) и двухвалентная («Церварикс», Бельгия, защищает от 16 и 18 типов ВПЧ). Вакцинация рекомендована девочкам, начиная с возраста 9-10 лет. Курс вакцинации состоит их трёх прививок в течение полугода. Вакцина вводится внутримышечно в область плеча. В поствакцинальном периоде иногда наблюдается болезненность в месте введения и кратковременное легкое недомогание в первые три дня после прививки.

Вакцинация от других инфекций.

Менигококковая инфекция

Вызывается бактерией, проявляется гнойным воспалением оболочек головного мозга. Путь заражения преимущественно воздушно-капельный.

Вакцинация в России проводится полисахаридными вакцинами (содержат только участки оболочки бактерии) с 18-24 мес. жизни. Вакцинация также рекомендована взрослым, выезжающим в страны Африки, Ближнего и Среднего Востока. Используются вакцины: «Менцевакс ACWY», Бельгия; «Менинго А+С», Франция.

Дизентерия

Бактериальная кишечная инфекция. Путь передачи фекально-оральный.
Вакцинация детей возможна с 3-х лет. Защищает на 1 год. Содержит убитые бактерии. Рекомендована для детей, выезжающих в организованные детские коллективы (летние лагеря). Рекомендована вакцинация взрослых при поездках в эндемичные районы (например, Средняя Азия) и работе в сфере общественного питания и коммунального хозяйства. Используется отечественная вакцина «Шигеллвак».

Брюшной тиф

Бактериальная кишечная инфекция. Путь передачи фекально-оральный.
Вакцина инактивированная (живых бактерий не содержит). Прививка рекомендована для туристов, выезжающих в Африку и Азию. У детей может применяется с 3-х лет. Защищает на три года. Используется отечественная вакцина «Вианвак».

Гармония здоровья — медицинский центр

В этой статье мы собрали самую необходимую информацию по вопросам, которые задают посетители поликлиники «Гармония здоровья»

о вакцинации детей.

Что такое Вакцинация?

Вакцинация означает введение в организм вещества, стимулирующего развитие иммунитета к определенному заболеванию. Вводимая в организм вакцина представляет собой небольшое количество определенных бактерий или вирусов, которые вызывают заболевание. Организм реагирует на это выработкой собственной защиты против данного заболевания, так чтобы он смог справиться с инфекцией собственными силами, если она снова попадет в организм. Для того чтобы добиться максимальной защиты, необходимо провести полный курс вакцинации.

Цель вакцинации – предотвратить развитие инфекционного заболевания или ослабить его проявления.

При инфекционном заболевании формируется естественный специфический иммунитет, направленный на уничтожение конкретного возбудителя инфекции и предотвращение развития данной болезни при повторном заражении. Но само заболевание несет серьезную угрозу для здоровья человека, поскольку нередко развиваются осложнения и неблагоприятные последствия. Поэтому для формирования искусственного специфического иммунитета безопасным путем используют вакцинацию – введение в организм специальных препаратов (вакцин), содержащих определенные фрагменты возбудителей инфекции (антигены). В результате этого в организме запускается иммунный ответ на антигены, приводящий к синтезу антител против возбудителя.

Вакцинация детей:

Вирусный гепатит В– инфекционное заболевание, характеризующееся тяжелым поражением печени. Вирус передается половым путем, при контакте с кровью и другими биологическими жидкостями зараженного человека, а также может передаваться от инфицированной матери к ребенку во время беременности, родов или кормления грудью. Возможна передача и при тесном длительном бытовом контакте (прежде всего в семьях, где есть носитель вируса). Острый вирусный гепатит В может переходить в хроническую форму: у новорожденных в 90%, у грудных детей в 50%, а у взрослых в 10% случаев. У детей первых лет жизни летальность от гепатита приблизительно в 10 раз выше, чем у взрослых. Хронический гепатит В может длительно протекать в скрытой форме и никак не проявляться. Нередко у носителей вируса через несколько десятилетий может развиться цирроз и/или рак печени. В большинстве случаев курс вакцинации начинается в первые сутки жизни – таким образом можно предотвратить заражение новорожденных от матерей-носителей вируса (тестирование во время беременности не всегда позволяет выявить вирус у женщины). В настоящее время для прививки используют рекомбинантные вакцины, которые содержат поверхностный антиген вируса («австралийский антиген», HBsAg). Имеются также комбинированные вакцины в которые включен компонент против гепатита В вместе с коклюшно-дифтерийно- столбнячной вакциной, дифтерийно-столбнячным анатоксином или вакциной против гепатита А. Вакцины против гепатита В разных производителей не имеют принципиальных отличий и взаимозаменяемы.

В поликлинике «Гармония здоровья» вакцинация против гепатита В проводится вакциной Регевак-В или Комбиотех.

Туберкулез– инфекционное заболевание, вызываемое микобактериями туберкулеза и характеризующееся различными фазами течения. Опасность заражения туберкулезом велика и угрожает практически любому человеку. Наиболее часто эта болезнь поражает легкие, но могут поражаться практически все органы. Лечение туберкулеза является очень сложным и проводится многие месяцы, а иногда и годы. Вакцинация защищает, прежде всего, от тяжелых форм туберкулезной инфекции – менингита, распространенного поражения легких, поражения костей, вылечить которые труднее всего. Развитие заболевания возможно и у привитых детей, но у них оно обычно протекает в легкой форме. Учитывая сохраняющуюся высокую заболеваемость туберкулезом, в России вакцинацию проводят новорожденным в родильном доме на 3–7 сутки жизни. Для прививки в настоящее время используют вакцины российского производства, которые содержат живые ослабленные микобактерии бычьего типа (в большинстве регионов страны применяют препарат с уменьшенным количеством микобактерий — БЦЖ-М). Ежегодное проведение туберкулинодиагностики позволяет своевременно выявить заражение ребенка микобактерией туберкулеза. При отрицательной пробе Манту в 7 и 14 лет проводят ревакцинацию.

В поликлинике «Гармония здоровья» диагностика туберкулеза проводится наиболее точным методом Диаскинтест.

Коклюш— острозаразная бактериальная инфекция дыхательных путей. Возбудитель передается воздушно- капельным путем. При коклюше могут развиваться серьезные осложнения — пневмония, поражение головного мозга (судороги, энцефалопатия) и другие. Очень опасен коклюш для детей первого года жизни, поскольку протекает в этом возрасте тяжело и нередко приводит к остановке дыхания. До введения вакцинации коклюшем болели преимущественно дети в возрасте до 5 лет. Для вакцинации используют комбинированные вакцины против коклюша, дифтерии и столбняка. Существует 2 типа вакцин: АКДС (адсорбированная коклюшно- дифтерийно-столбнячная вакцина) — цельноклеточная, которая содержит инактивированные (убитые) коклюшные палочки и АаКДС — ацеллюлярная (бесклеточная), которая содержит 2–4 отдельных компонента (антигена) коклюшной палочки. Российский календарь прививок допускает использование обоих типов вакцин. По эффективности разные типы вакцин мало отличаются, но бесклеточная вакцина (АаКДС) значительно реже вызывает постпривочные реакции, чем цельноклеточная (АКДС).

В поликлинике «Гармония здоровья» вакцинация против коклюша проводится комбинированными вакцинами Пентаксим, Инфанрикс, Инфанрикс Гекса или Адасель (с 4-х лет).

Дифтерия— острая бактериальная инфекция. Возбудитель дифтерии вырабатывает токсин, который вызывает гибель клеток с образованием фибринозных пленок (чаще в верхних дыхательных путях – ротоглотке, гортани, носу), а также нарушает функцию нервной и сердечно- сосудистой системы, надпочечников, почек. Возбудитель передается воздушно-капельным путем. При дифтерии нередко развивают серьезные осложнения: поражение сердечной мышцы (миокардит), поражение нервов с развитием параличей, поражение почек (нефроз), асфиксия (удушье при закрытии просвета гортани пленками), токсический шок, пневмония и другие. Для вакцинации используют дифтерийный анатоксин, который применяют отдельно или в составе комбинированных вакцин: АКДС, АаКДС, АДС, АДС-М и ряда других. При контакте непривитых (или привитых с нарушением календаря) с больным необходимо проведение экстренной вакцинации.

В поликлинике «Гармония здоровья» вакцинация против дифтерии проводится комбинированными вакцинами Пентаксим, Инфанрикс, Инфанрикс Гекса или Адасель (с 4-х лет).

Столбняк– острая бактериальная инфекция, для которой характерно очень тяжелое поражение нервной системы. Возбудитель столбняка вырабатывает сильнейший токсин, вызывающий генерализованные судороги скелетных мышц. Источником инфекции являются животные и человек, у которых бактерия обитает в кишечнике и с калом попадает в почву, где сохраняется длительное время в виде спор. Заражение развивается при попадании возбудителя в рану. Больной не заразен для окружающих Для вакцинации используют столбнячный анатоксин, который применяют отдельно или в составе комбинированных вакцин: АКДС, АаКДС, АДС, АДС-М и ряда других. При ранениях у непривитых или в случае нарушения календаря прививок необходимо проведение экстренной профилактики столбняка, которая включает не только введение анатоксина, но и применение по показаниям противостолбнячной сыворотки или противостолбнячного иммуноглобулина.

В поликлинике «Гармония здоровья» вакцинация против столбняка проводится комбинированными вакцинами Пентаксим, Инфанрикс, Инфанрикс Гекса или Адасель (с 4-х лет).

Полиомиелит– острая вирусная инфекция, для которой характерны поражение системы пищеварения, верхних дыхательных путей и нервной системы с развитием параличей, преимущественно в нижних конечностях. Заболевание развивается при попадании полиовируса в желудочно-кишечный тракт, обычно через грязные руки или пищу. В большинстве случаев полиомиелит протекает в виде респираторной или кишечной инфекции. Болеют полиомиелитом преимущественно дети до 5 лет. Для вакцинации используют 2 типа вакцин: оральная полиомиелитная вакцина (ОПВ), которая содержит живые ослабленные полиовирусы и инактивированная полиомиелитная вакцина (ИПВ), которая содержит убитые полиовирусы. В очень редких случаях у людей с нарушением иммунитета вирусы, входящие в ОПВ, могут вызывать вакциноассоциированный паралитический полиомиелит — как у привитых, так и у лиц, которые были с ними в контакте.

В поликлинике «Гармония здоровья» вакцинация против полиомиелита проводится комбинированными вакцинами Пентаксим и Инфанрикс Гекса или живой вакциной БиВАК полио.

Корь– острозаразная вирусная инфекция. Вирус передается воздушно-капельным путем, контагиозность кори близка к 100 %, то есть заболевают практически все, кто был в контакте с больным. При кори могут развиваться серьезные осложнения – пневмония, поражение головного мозга (энцефалит), поражение глаз, нарушение слуха и другие. Болеют корью преимущественно дети от 1 года до 7 лет. Дети грудного возраста болеют редко и, как правило, нетяжело за счет пассивного иммунитета, полученного от матери, который может сохраняться после рождения до 6 месяцев. Для вакцинации используют живую коревую вакцину (ЖКВ), содержащую ослабленный вирус. Вакцина также входит в состав дивакцины (вместе с вакциной против эпидемического паротита) и тривакцины (вместе с вакциной против эпидемического паротита и краснухи).

В поликлинике «Гармония здоровья» вакцинация против кори проводится комбинированной вакциной M—M—R II (Нидерланды) или живой Коревой вакциной.

Эпидемический паротит («свинка»)– острозаразная вирусная инфекция. При эпидпаротите развивается воспаление слюнных желез, а также других желез (поджелудочной, яичек, яичников, предстательной, молочной, слезных, щитовидной). Вирус передается воздушно- капельным путем. Летальность при эпидемическом паротите крайне низкая, однако могут развиваться серьезные осложнения – сахарный диабет (при поражении поджелудочной железы), менингит или менингоэнцефалит, глухота и другие. Наиболее значимое осложнение — мужское бесплодие, самой частой причиной которого является воспаление яичек (орхит) при эпидпаротите. Частота орхита существенно увеличивается с возрастом: он редко отмечается у мальчиков дошкольного возраста, но развивается у большинства заболевших подростков и взрослых мужчин. Болеют эпидпаротитом преимущественно дети школьного возраста. Для вакцинации используют живую паротитную вакцину (ЖПВ), содержащую ослабленный вирус. Вакцина также входит в состав дивакцины (вместе с вакциной против кори и тривакцины (вместе с вакциной против кори и краснухи).

В поликлинике «Гармония здоровья» вакцинация против паротита проводится комбинированной вакциной M—M—R II (Нидерланды) или живой вакциной против паротита.

Краснуха— острозаразная вирусная инфекция. Болеют краснухой преимущественно дети от 2 до 9 лет. В этом возрасте заболевание нередко протекает малосимптомно и может быть нераспознанным. У подростков и взрослых краснуха обычно протекает более тяжело. Очень серьезную опасность представляет краснуха для беременной женщины, особенно в первый триместр. В большинстве случаев происходит инфицирование плода, что приводит к выкидышу, мертворождению или развитию синдрома врожденной краснухи, который проявляется в виде тяжелых пороков развития со стороны глаз, органа слуха, сердца, головного мозга и других органов. Для вакцинации используют живую краснушную вакцину, содержащую ослабленный вирус. Также может применяться тривакцина (вместе с вакциной против эпидемического паротита и кори).

В поликлинике «Гармония здоровья» вакцинация против паротита проводится комбинированной вакциной M—M—R II (Нидерланды) или живой вакциной против краснухи.

Грипп– чрезвычайно заразная острая респираторная вирусная инфекция, вспышки которой наблюдаются ежегодно. Грипп может протекать в молниеносной форме с быстрым развитием вирусной пневмонии и высокой вероятностью летального исхода. При гриппе возможно развитие бактериальной пневмонии, воспаление головного мозга (энцефалит), воспаление сердечной мышцы (миокардит), поражение почек и других органов. В группу риска тяжелого течения гриппа входят грудные дети, беременные, пожилые люди, «лежачие» больные, лица с хроническими заболеваниями сердца и легких. От гриппа ежегодно в мире умирает от 250 до 500 тысяч человек. В каждый сезон меняются свойства вируса, вызывающие заболевание. Поэтому рекомендуют ежегодно проводить прививку от сезонного гриппа вакциной, которая содержит антигены трех наиболее актуальных штаммов в данном году. Эффективность вакцинации составляет от 60 до 90% при условии массовой иммунизации. Установлено, что при массовой вакцинации снижается заболеваемость и среди непривитых. Многолетний анализ показывает, что в России подъем заболеваемости гриппом обычно начинается в январе, достигает максимума в марте и заканчивается в мае. Поэтому, наиболее целесообразно проведение вакцинации с сентября по декабрь. По эпидемическим показаниям возможно проведение прививки от отдельных штаммов вируса специально разработанными вакцинами. В настоящее время используют преимущественно 2 типа вакцин от сезонного гриппа — инактивированные субъединичные и расщепленные (сплит-вакцины). Субъединичные вакцины содержат наружные антигены вируса. Сплит-вакцины содержат также внутренние антигены, которые не изменяются и тем самым обеспечивают также некоторую защиту от штаммов, не включенных в состав вакцины.

В поликлинике «Гармония здоровья» вакцинация проводится различными вакцинами, в том числе Гриппол плюс.

Гриппол плюс (Производитель — НПО ПЕТРОВАКС ФАРМ, Россия) – представляет собой трехвалентную субъединичную (вакцины третьего поколения) инактивированную гриппозную вакцину, состоящую из поверхностных антигенов, культивированных на куриных эмбрионах здоровых кур, вирусов гриппа типа А и В.

Включенный в вакцинный препарат иммуномодулятор полиоксидоний (азоксимера бромид), обладающий иммуностимулирующим действием, обеспечивает увеличение иммуногенности вакцины. Антигенный состав гриппозной вакцины ежегодно обновляется согласно рекомендациям Всемирной Организации Здравоохранения (ВОЗ).

Вакцина показана для проведения специфической профилактики гриппа у детей с 3-летнего возраста и взрослых.Вакцина особенно показана лицам с высоким риском возникновения осложнений в случае заболевания гриппом:

детям дошкольного возраста, школьникам, лицам старше 60 лет;
взрослым и детям, часто болеющим ОРВИ, страдающим хроническими соматическими заболеваниями, в т.ч. бронхиальной астмой, сахарным диабетом, хроническими заболеваниями почек, болезнями сердечно-сосудистой, дыхательной и нервной системы, болезнями обмена веществ, аутоиммунными заболеваниями, различными аллергическими заболеваниями (кроме аллергии к куриным белкам), хронической анемией, иммуннодефицитными состояниями. Например, больной бронхиальной астмой или хронический курильщик при заболевании истинным гриппом, а не ОРВИ, практически лишен шанса избежать длительного тяжелого бронхита или пневмонии.

Вакцина также показана лицам, по роду профессии имеющим высокий риск заболевания гриппом или заражения им других лиц, в том числе медработникам, работникам образовательных учреждений, сферы социального обслуживания.

Иммунитет против гриппа от прививки формируется спустя две недели

и продолжается весь год.

Прививки не входящие

в национальный календарь прививок

Гемофильная инфекция (ХИБ-инфекция) вызывается гемофильной палочкой типа b – Haemophilusinfluenzaetype b. Она может стать причиной острых инфекционных болезней – гнойного менингита, пневмонии (воспаления легких), эпиглоттита (воспаления надгортанника), артрита (воспаления суставов), а также гнойного поражения всего организма – сепсиса.

Гемофильная инфекция характеризуется преимущественным поражением органов дыхания, центральной нервной системы и развитием гнойных очагов в различных органах. Бактерия H. influenzae локализуется в носоглотке, откуда может передаваться другим людям воздушно-капельным путем. Только у очень небольшого числа из тех, у кого в носоглотке локализуется возбудитель, развивается заболевание с клиническими проявлениями, однако носители H. influenzae являются важным источником распространения возбудителя.

В поликлинике «Гармония здоровья» вакцинация детей от гемофильной инфекции проводится комбинированными вакцинами Пентаксим или Инфанрикс Гекса.

Ротавирусная инфекция широко распространена во всем мире и является одной из самых распространенных кишечных инфекций и детей и взрослых. Для малышей до 3 лет данная инфекция наиболее опасна в плане развития тяжелых осложнений – токсикоз, обезвоживание, судороги на фоне повышения температуры и прочие неприятности.

Всемирная организация здравоохранения рекомендует включение оральной ротавирусной вакцины во все национальные программы иммунизации. Вакцина представляет собой раствор для перорального применения, то есть капли в рот, а значит никаких уколов, которых так боятся детки. Первая доза вакцины вводится детям в возрасте от 6 до 12 недель. Вакцина вводится трижды с интервалом между прививками в 4–10 недель. До возраста 8 месяцев необходимо завершить полный курс этих прививок.

В поликлинике «Гармония здоровья» вакцинация против ротавирусной инфекции проводится вакциной РотаТек.

Ветряная оспа (ветрянка, варицелла) – острая, высококозаразная антропонозная (только у людей) вирусная инфекция, передающаяся воздушно-капельным и контактным путём, сопровождающаяся везикулёзной сыпью и сопутствующей интоксикацией.

Восприимчивость к вирусу ветрянки высокая (т.к. он очень летуч – преодолевает расстояния до 20 м), особенно для тех, кто не переболел ветряной оспой ранее или не был привит. Заражение ветрянкой происходит даже при мимолётном контакте с больным. Сезонность заболевания осенне-зимняя, а эпидемические вспышки регистрируются раз в 5 лет. Часто болеют ветряной оспой дети 5-9 лет, дети до 6 месяцев обычно не болеют из-за антител, полученных от матери (если мать в детстве переболела ветряной оспой). Взрослые также болеют редко.

После перенесённой инфекции формируется пожизненный иммунитет, но в 3% случаях наблюдается повторное заражение. Также следует упомянуть, что ранее инфицированные люди становятся не только носителями, но и источниками при обострении инфекции; их заболевание протекает в виде Опоясывающего герпеса (опоясывающего лишая).

В целях профилактики ветряной оспы при отсутствии противопоказаний ребенку можно сделать вакцинацию против ветрянки.

В поликлинике «Гармония здоровья» вакцинация против ветряной оспы проводится вакциной Варилрикс.

Варилрикс— применяется для профилактики ветряной оспы в первую очередь у лиц, отнесенных к группам высокого риска, не болевших ветряной оспой и не привитых ранее.

Варилрикс используется и для экстренной профилактики ветряной оспы у лиц, не болевших ветряной оспой и не привитых ранее, находившихся в тесном контакте с больными ветряной оспой (члены семей, врачи, средний и младший медицинский персонал, а также другие лица).

Вакцинация проводится в дозе 0,5 миллилитра детям возрастной группы от 12 месяцев и до 13 лет — однократно.
Детям старше 13 лет «Варилрикс» тоже вводится дважды, с интервалом 6–10 недель в стандартной дозе 0,5 миллилитра.
Экстренная вакцинация «Варилрикс» проводится однократно в стандартной дозе в течение 4 суток после контакта с заболевшим «ветрянкой».

Пневмококковая инфекция – группа инфекционных заболеваний человека, вызываемых пневмококком, имеющих всеобщую распространенность, поражающих преимущественно детское население и проявляющиеся разнообразными симптомами с возможным развитием менингита, пневмонии, сепсиса.

Возбудитель – пневмококк или Streptococcus pneumoniae, является представителем нормальной микрофлоры верхних дыхательных путей

Источником инфекции являются:

1) больные клинически выраженной формой болезни,

2) носители пневмококков.

Основной путь заражения – воздушно-капельный. Инфицирование происходит при чихании, кашле, разговоре с источником инфекции. Наиболее подвержены заражению лица, находящиеся в непосредственном контакте с источником инфекции (при чихании и кашле – это аэрозольное облако 3 метра в диаметре).

Восприимчивость человека к пневмококковым инфекциям высокая. Возможны семейные вспышки и вспышки в детских коллективах.

Группы риска заражения:

1) Дети до 2х лет, иммунные клетки которых не способны бороться с возбудителем. Дети первого полугодия жизни имеют материнские антитела, количество которых спустя 6 мес жизни сильно снижается, в связи с чем увеличивается риск развития инфекции.
2) Дети и взрослые с иммунодефицитом (хронические заболевания органов дыхания, сердечнососудистой системы, сахарный диабет, почечная недостаточность, цирроз печени; ВИЧ-инфекция, онкологические болезни, заболевания крови).
3) Возрастной иммунодефицит (лица старше 65 лет).
4) Лица с табачной и алкогольной зависимостью.

Основные типы пневмококков, встречаемые у детей раннего возраста и ответственные за подавляющее число случаев данной инфекции, использованы при разработке вакцин для специфической профилактики.

В поликлинике «Гармония здоровья» вакцинация против пневмококковой инфекции применяются Превенар 13 и Пневмо 23.

Превенар 13— производитель компания «Вайет» (США). Вакцина содержит 13 наиболее опасных видов пневмококковых бактерий, циркулирующих среди населения. Отличительная особенность препарата Превенар 13 — включение в состав дополнительных компонентов против дифтерии. Первые препараты Превенар были произведены на основе семи самых опасных форм пневмо-бактерий, в последнее время вакцина содержит 13 видов опасных бактерий.

Назначение вакцины Превенар 13 — иммунизация детей до пяти лет. Вакцинация Превенар 13 показана с двухмесячного возраста.

Пневмо 23 — вакцина от пневмококковой инфекции «Пневмо 23» выпускается во Франции, завод Санофи Пастер.

Пневмококки являются наиболее частой причиной развития следующих заболеваний:

· пневмония

· гнойный отит

· бактериальные менингиты

· плевриты;

· эндокардиты;

· артриты.

В состав одной дозы вакцины Пневмо 23 входят капсульные очищенные полисахариды Streptococcus pneumoniae двадцати трех серотипов. Вакцина представляет собой порошок, разведенный водой для инъекций. Иммунизацию проводят внутримышечно в дельтавидную мышцу плеча однократно. Допускается введение препарата Пневмо 23 и подкожно. Доза введения составляет 0.5 мл. Ревакцинацию проводят через три года в тех же пропорциях однократно.

После шестилетнего возраста дополнительная иммунизация препаратом Пневмо 23 считается нецелесообразной по причине выработки достаточно устойчивой формы антигенов к пневмобактериям.

Очищенные белковые производные туберкулина

FEMS Immunol Med Microbiol. Авторская рукопись; Доступен в PMC 2013 декабря 1.

Опубликовано в окончательной редактированной форме AS:

PMCID: PMC34

NIHMSID: NIHMMS3

Государственный университет Колорадо, Департамент микробиологии, иммунологии и патологии, Форт-Коллинз, Colorado 80523

^* Автор, ответственный за переписку: Карен М. Добос, Почтовый адрес: 1682 Campus Delivery, отделение микробиологии, иммунологии и патологии; Университет штата Колорадо, Форт. Collins, CO 80523-1682, тел.: 970-491-6549, [email protected] См. другие статьи в PMC, в которых цитируется опубликованная статья.
Abstract
Туберкулиновая кожная проба, которая включает мониторинг иммунной реакции на инъекцию очищенного производного белка (PPD), была наиболее широко используемым методом для выявления инфекции Mycobacterium tuberculosis с момента ее разработки в 1930-х годах. До недавнего времени молекулярный состав PPD был неизвестен. Это помешало открытию улучшенных реагентов для кожных тестов и резко затруднило усилия по определению механизма действия.Протеомная оценка PPD в сочетании с подробным анализом на модели туберкулеза морской свинки привела к дальнейшему определению молекулярного состава PPD. В этом сообщении рассматривается история и текущее состояние PPD, в дополнение к описанию реагентов-кандидатов PPD следующего поколения, основанных на использовании отдельного белка или белковых коктейлей.
Ключевые слова: Туберкулез, Очищенное производное белка, Туберкулиновая кожная проба, Диагностика2 – 1,5 миллиона смертей и 8,5 – 9,2 миллиона случаев заболевания в 2010 г. , причем большинство этих трагических событий произошло в развивающихся странах (ВОЗ, 2011 г.). Его тяжесть усугубляется способностью Mycobacterium tuberculosis ( Mtb ), возбудителя туберкулеза, сохраняться в виде персистирующей бессимптомной инфекции, называемой латентной туберкулезной инфекцией (ЛТБИ). В течение почти столетия лица, инфицированные Mtb , выявлялись с помощью туберкулиновой кожной пробы (ТКП). В 1890 году Роберт Кох предположил, что глицериновый экстракт туберкулезных бацилл может как лечить, так и предотвращать туберкулез.Хотя «Старый туберкулин» Коха в конечном итоге потерпел неудачу в качестве терапии, его открытия стали катализатором разработки современной ТКП, наиболее важного инструмента для выявления потенциальных случаев ТБ на сегодняшний день (Shingadia & Novelli, 2008).
ТКП также известна как проба Манту в честь французского врача Шарля Манту (1877–1947), который установил диагностические критерии для чтения ТКП. Метод Манту, одобренный Американским торакальным обществом и Центрами по контролю и профилактике заболеваний (CDC), в настоящее время является золотым стандартом для определения того, инфицирован ли человек Mtb. Этот иммунологический тест состоит из двух частей. Сначала реагент очищенного производного белка (PPD) вводят внутрикожно в предплечье. Во-вторых, реакцию гиперчувствительности замедленного типа (ГЗТ) отслеживают через 48-72 часа после инъекции путем измерения диаметра уплотнения (отека из-за воспаления) в миллиметрах в месте инъекции. Обычным явлением является визуализация эритемы (покраснения) в течение первых 24 часов после введения PPD; это не следует измерять, так как это не указывает на инфекцию.Проведение и чтение результатов этого теста должны выполняться обученными медицинскими работниками, которые могут интерпретировать факторы риска наряду с измерением при определении положительной реакции (Mackin, 1998).
Помимо своей роли индикатора инфекции Mtb , ТКП также используется в качестве эпидемиологического инструмента для оценки распространенности латентной туберкулезной инфекции (ЛТБИ). Прогноз о том, что одна треть населения мира инфицирована Mtb , частично основан на частоте положительной ТКП (Dye , et al. , 1999).
В текущем обзоре мы представляем обзор истории, развития и текущего использования PPD. Кроме того, будут рассмотрены исследования, направленные на определение ключевых молекулярных компонентов PPD и его биологической активности.
Прошлое и настоящее использование PPD
Первая кожная туберкулиновая проба была введена в 1907 г. фон Пирке (1874–1929), австрийским ученым и педиатром (Turk, 1987). В его исследовании использовалась ОТ Коха, нагретый бульон, состоящий из неочищенной неопределенной смеси белков и других макромолекул, полученных из туберкулезной палочки.OT Коха готовили из концентрированного фильтрата глицерино-пептонного бульона, в котором Mtb росли в течение 6–8 недель. OT Koch и аналогичные продукты не используются в качестве реагентов для ТКП в США из-за недостаточной чистоты, различий в эффективности и специфичности, а также из-за недостаточной стандартизации.
В 1930 г. из фильтрата культуры Mtb был получен альтернативный состав, известный как MA-100, в виде состава, не содержащего полисахаридов (Masucci & McAlpine, 1930). Было обнаружено, что МА-100 значительно более эффективен, чем ОТ Коха; однако его использование в качестве стандартного диагностического реагента было ограничено — в основном из-за сенсибилизирующего действия, наблюдаемого при повторных инъекциях в кожу.
В 1934 году Флоренс Б. Зайберт (1897–1991), биохимик из Института Генри Фиппса Пенсильванского университета, разработала более стабильный и последовательный препарат (Seibert, 1934). Первоначально обозначенный по способу его производства, SOTT, аббревиатура от «синтетический средний преципитат туберкулина трихлоруксусной кислоты», этот продукт позже был назван очищенным белковым производным или PPD. Его получали пропариванием культур Mtb в стерилизаторе Arnold и очисткой белков повторным осаждением сульфатом аммония (Seibert & Glen, 1941).По сравнению с предыдущими туберкулиновыми реагентами, в этом методе приготовления PPD было значительно снижено содержание полисахаридов, нуклеиновых кислот и липидов, и, таким образом, это был реагент, богатый белком. В 1944 году большая партия этого улучшенного PPD (партия 49608), переименованного в PPD-S (PPD-Standard), была предоставлена в качестве эталонного продукта в Соединенных Штатах. PPD-S состоял примерно из 92,9% белка, 5,9% полисахаридов и 1,2% нуклеиновой кислоты (Seibert & Glen, 1941). Из-за повышенной чистоты и активности PPD-S был принят Всемирной организацией здравоохранения (ВОЗ) в качестве международного стандарта туберкулина в 1952 году (Guld , et al., 1958). С 1978 г. Управление по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов (FDA) потребовало, чтобы все партии PPD были квалифицированы биологическим анализом и должны демонстрировать активность, эквивалентную активности PPD-S (Sbarbaro, 1978). Международная единица (МЕ) для PPD была определена как часть этого эффекта; одна МЕ равна биологической активности, содержащейся в 0,028 мкг ППД-С (0,02 мкг ППД с 0,008 мкг солей). Однако в США и Канаде эффективность PPD выражается в туберкулиновых единицах (TU), а не в IU. Один TU определяется как 0.02 мкг PPD-S (Edwards & Edwads, 1960). Пять ТЕ являются стандартной дозой для внутрикожного диагностического применения, как определено в эпидемиологических исследованиях (Bothamley, и др., , 1999).
PPD-S2, текущий стандарт США на туберкулин PPD, был разработан в ожидании возможного истощения запасов PPD-S (Villarino, et al. ., 2000). В настоящее время Aplisol ^® (JHP Pharmaceuticals, Inc, Рочестер, Мичиган) и Tubersol ^® (Sanofi Pasteur Limited, Swiftwater, PA) являются двумя широко используемыми коммерчески доступными продуктами PPD-S2 (Jensen, et al., 2005). Результаты кожных испытаний с Aplisol ^® и Tubersol ^® вполне сравнимы с результатами оригинального стандарта PPD, PPD-S (Villarino, et al. ., 1999). Однако переход от Tubersol ^® к Aplisol ^® или наоборот привел к отклонениям от нормы кожных тестов, хотя точная причина до сих пор неясна (Gillenwater, et al . , 2006, Mehta, et al. , 2009).
Помимо PPD-S, существует несколько других составов PPD, используемых за пределами США и Канады (Li , et al., 2008). Некоторые из этих туберкулиновых продуктов, включая PPD RT23, производятся Государственным институтом сывороток (SSI) (Comstock, и др., , 1964). В настоящее время ВОЗ и Международный союз по борьбе с туберкулезом и заболеваниями легких (IUATLD) рекомендуют 2 ТЕ PPD-RT23 с твином 80. RT23 является наиболее широко используемым продуктом PPD во всем мире (Rangel-Frausto, и др. , 2001). Несколько исследований по всему миру использовали PPD RT23 для оценки распространенности инфекции туберкулезной палочкой, включая Индию (Rao , et al. , 2008), (Vashishtha & John, 2010), Гана (Addo et al. 2010), Йемен (Al-Absi, et al. , 2009), Южная Африка (Kritzinger, et al. , 2009) (Hanifa, et al. , 2009), Непале (Shrestha, et al. , 2008), Бразилии (Lopes, et al. , 2008) и Индонезии (Bachtiar, et al. ). , 2008). Кроме того, он также использовался для оценки крупномасштабных контактов с больными туберкулезом в Нидерландах (Borgen, et al. , 2008).
В дополнение к вышеупомянутым продуктам PPD также используются другие варианты PPD, такие как PPD RT23 Mexico (Laboratorio Nacional de Salud, Secretaria de Salud, Мехико, Мексика), продукт PPD, используемый в Латинской Америке (Rangel-Frausto и др., 2001), и японский продукт PPD-s. (Кимура, и др., 2005 ). Многочисленные продукты PPD, используемые в настоящее время, перечислены в .
Таблица 1
Препараты PPD, используемые в настоящее время для лечения людей
PPD S2 (Aplisol ^® ) JHP Pharmaceuticals, Inc, Рочестер, Мичиган, США 5 TU, 0allarino (V0illarino, 1999) PPD S2 (Tubersol ^®) Sanofi Pasteur Limited, Swiftwater, PA, США 5 TU (Villarino , et al. , 1999, Teixeira , et al. , 2000, Rangel-frusto , et al. , 2001) 9000, 2001) PPD RT23 SSI Статус институт сыворотки, Копенгаген, Дания 2 TU (Maes , et al. , 2011, Teixeira , и др. , 2000) PPD RT23 Mexico Laboratorio Nacional de Salud, Secretaria de Salud, Mexico City, Mexico 2 TU, 5.0et0alto, 2001) PPD RT23 (Evans PPD) Celltech Pharma SA, Мадрид, Испания 2 TU (Fernandez-Villar , et al. , 2004) PPD-S Nihon BCG Seizo Co., Токио, Япония 3 TU (Shigeto, 1990) PPD IC-65 Cantacuzino Институт, Бухарест, Румыния 2 TU (Ulea , et al al. 2010)

Поскольку существует несколько производителей PPD, важно оценить различия в эффективности этих продуктов PPD.Из-за ограниченных знаний о точном составе каждого продукта PPD невозможно использовать традиционные методы контроля качества для сравнения препаратов PPD. Поэтому сравнения с использованием животных, инфицированных микобактериями, проводятся для оценки биологической активности продуктов PPD. При этом продукты PPD должны вводиться в тех же условиях, в которых они будут использоваться в клинических условиях (Hansen , et al. , 1964).

Первое опубликованное сравнение эффективности PPD было проведено между PPD-S и PPD-RT23.Исследование, проведенное среди 6 групп населения в США, включая детей-эскимосов, больных туберкулезом и новобранцев в учебных центрах ВМС США, показало, что 2,5 ТЕ PPD-RT23, содержащего твин 80, обладают эффективностью, аналогичной 5 ТЕ PPD-S. (Комсток , и др. , 1964). Совсем недавно исследование 69 больных туберкулезом и 1189 субъектов с низким риском в США сравнило PPD-S2 с PPD-S1. Было обнаружено, что эти два продукта статистически неразличимы у больных туберкулезом. Кроме того, такая же высокая специфичность наблюдалась среди субъектов с низким риском.Это исследование показало, что PPD-S2 функционально эквивалентен PPD-S1 и может легко заменить его (Villarino , et al. , 2000). Многочисленные исследования сравнивали активность RT23, полученного в SSI, с другими источниками PPD, включая IC-65, и среди них была обнаружена эквивалентная эффективность (Ulea , et al. , 2010), (Chadha , et al. , 2003), (Шиллер и др. 2010). Однако аналогичное исследование в Мексике сравнило эффективность местного производства PPD RT23 (Мексика), Tubersol ^® и PPD RT23 (SSI) и выявило, что из трех, RT23 (Мексика) имел гораздо более низкую чувствительность (Rangel- Фраусто и др., 2001). RT23 и туберкулин Merieux (разработанный в Pasteur-Merieux) также недавно сравнивали по их относительной активности. Оба препарата были получены из нескольких штаммов микобактерий (RT23 был получен из семи штаммов Mtb , Merieux был получен из трех штаммов Mtb, плюс M. bovis ) и, по-видимому, обладают биологической активностью, эквивалентной PPD-S. , который является продуктом одного штамма. Однако RT23 часто вызывает более сильную антигенную реакцию, чем препарат Мерье (Sgountzos, et al., 2009). Недавно Schiller et al. сравнили диагностическую надежность PPD из разных источников с помощью инновационного подхода к мониторингу ответов интерферона-γ в культурах цельной крови (Schiller , et al. 2010). В этом исследовании образцы цельной крови стимулировали несколькими различными туберкулинами, и через 24 часа после стимуляции отслеживали реакцию IFN-γ. Их результаты подтверждают, что существуют значительные различия между депрессорами из разных источников, и указывают на необходимость дальнейшей стандартизации продуктов депрессоров.Была введена количественная шкала, обозначенная как RP30 (относительная активность 30), определяемая как концентрация белка, при которой конкретный препарат PPD имеет 30% максимальной активности. RP30 можно использовать в качестве инструмента для быстрого сравнения биологической активности партий и источников PPD. Хотя в этих отчетах подчеркивается важность оценки биологической активности продуктов PPD из разных источников, расхождения в эффективности трудно объяснить из-за сложности и неоднозначности молекулярного состава PPD.Протеомная характеристика PPD была описана нашей лабораторией (Cho, et al. , 2012) и другими (Borsuk , et al. , 2009), демонстрируя, что PPD состоит из сотен различных белков. Дополнительный сравнительный протеомный, биологический и гистологический анализы использовались для измерения относительных различий в молекулярном составе и биологической активности между PPD-S2, RT23 и PPD-KIT (PPD Корейского технологического института) (Cho, et al ., 2012). Это исследование продемонстрировало, что, хотя все 3 препарата PPD были неразличимы по своей способности индуцировать ответ ГЗТ, были очевидны гистологические различия и различия в относительном количестве нескольких белков, включая членов семейства белков Esx, что позволяет предположить корреляцию между повышенной гистопатологией и повышенная концентрация белков Esx в PPD (Cho, et al ., 2012). В совокупности все эти сравнительные отчеты иллюстрируют сложность PPD и проблемы, связанные с созданием стандартизированного реагента.

Подводные камни PPD

Несмотря на то, что в прошлом столетии ТКП была стандартом для выявления лиц, подверженных риску активного ТБ, она имеет несколько фундаментальных недостатков, которые служат стимулом для разработки более стандартизированной методологии и более эффективных инструментов для выявления ЛТБИ. Основной проблемой текущего теста является высокий уровень ложноположительных результатов, вызванный неспособностью TST отличить инфекцию Mtb от воздействия нетуберкулезных микобактерий или вакцинации M.bovis Bacille Calmett-Guérin (BCG) (Huebner, и др. , 1993). Оба случая ложноположительных ответов обычно приписывают иммунному ответу, запускаемому гомологичными антигенами либо при вакцинации БЦЖ, либо от микобактерий из окружающей среды (Harboe, 1981, Huebner, и др., , 1993). Эти предположения были недавно подтверждены молекулярным анализом PPD, показывающим, что четыре белка теплового шока (GroEl, GroEs, DnaK и HspX) составляют примерно 60% протеомного содержания PPD (Cho, et al ., 2012, Борсук и др. , 2009). Эти белки-шапероны обладают высокой гомологией (более 70%) и консервативны среди большинства видов микобактерий (Cho, et al. ., 2012, Borsuk , et al. , 2009). Это усложняет использование ТКП в качестве инструмента как для эпидемиологических исследований, так и для выявления лиц, инфицированных Mtb , из-за потенциальной перекрестной реактивности от вакцинации БЦЖ или инфицирования нетуберкулезными микобактериями. Ложноотрицательные результаты также проблематичны, особенно у детей и лиц с ослабленным иммунитетом (Farhat, и др., )., 2006 г., Шингадия и Новелли, 2008 г.). Это связано с тем, что положительный PPD требует эффективного ответа DTH. Поэтому вполне вероятно, что PPD не может служить индикатором инфекции Mtb в тех популяциях, где отсутствует надежный Т-клеточный иммунитет. Наконец, хотя ТКП можно использовать для выявления ЛТБИ, он не позволяет провести различие между этим заболеванием, активным заболеванием или выздоравливающим пациентом. Несмотря на эти подводные камни, TST остается наиболее часто используемым инструментом для обнаружения инфекции Mtb .

Будущее PPD – открытие и разработка PPD следующего поколения

Разработка новых и более эффективных реагентов для выявления ЛТБИ является ключом к успеху в борьбе с туберкулезом. Улучшенное обнаружение латентных бацилл приведет к стратегиям раннего вмешательства и, вероятно, снизит заболеваемость и разорвет цикл передачи болезни.

Не следует упускать из виду усовершенствование существующих реагентов ТКП, поскольку мы движемся к цели создания новых реагентов для обнаружения ЛТБИ; однако стоит отметить, что метод количественной оценки иммунного ответа весьма субъективен.Вместо измерения диаметра уплотнений в миллиметрах тестируется несколько новых методов. К ним относятся: лазерная допплеровская визуализация у людей (Harrison, et al. , 1993), использование ручного спектрофотометра для измерения реакции ГЗТ (Chambers, et al. , 2002) и ультразвуковое исследование у пациентов ( Ciftci и др. , 2005). Эти альтернативные методы могут применяться для объективного количественного определения TST и могут преодолевать ограничения обычного способа измерения; однако следует учитывать возможность использования дорогостоящих технологий в регионах с ограниченными ресурсами.

В дополнение к улучшению метода измерения для улучшения стандартизации теста, можно улучшить фактический состав депрессора. Определение молекулярного состава PPD в течение многих лет было серьезным препятствием. Длительное нагревание сырого туберкулина для приготовления PPD способствовало денатурации, частичной деградации и агрегации многих белковых компонентов. Многочисленные исследования идентифицировали PPD как смесь очень гетерогенных белков размером от очень больших агрегатов до очень маленьких деградировавших молекул (Klausen, et al ., 1994, Rowland, et al. ., 1999, Ho, et al. , 2006). Точно так же мало было известно о том, какой из этих компонентов в PPD отвечает за реакцию DTH. С недавней идентификацией более ста белков из четырех различных PPD с помощью масс-спектрометрии (Borsuk , et al. , 2009, Cho , et al. , 2012) можно применять новые подходы для определения того, какие из этих компонентов незаконный ответ DTH.

Почти за два десятилетия до публикации молекулярного состава PPD были проведены многочисленные исследования отдельных белков для проверки их способности индуцировать реакцию ГЗТ (Klausen , et al. , 1994). Такие исследования по-прежнему имеют решающее значение для оптимизации PPD и понимания того, как он модулирует иммунную систему. Антигены, тестируемые в качестве будущих реагентов PPD, приведены в .

Таблица 2

Антигены в настоящее время под оценкой как следующее поколение PPD кандидаты

, 2004)

Gene Number	Antigen	Animals	Дозировка (мкг)	Страна	Ссылка

Rv1980c	МПТ 64	ГП	0. 1	Denmark	(Oettinger , et al. , 1995)
RV3875 / RV1980C	ESAT-6 / MPT 64	GP	1	Denmark	(ELHAY , et al. , 1998)
RV0652	RV0652	Рибосомальный белок L7 / L12	GP	0.2	Япония	(Kitaura , et al. , 1999)
RV0061	DPPD	GP / Hu	2 (GP)	USA	(Coler , et al., 2000)
RV3874	CFP10	GP	GP	2	USA	(Colangeli , et al. , 2000)
RV3875 / RV3874	ESAT-6 / CFP10	GP / CA	1 (GP) 2 (CA)	UK	(Van Pinxteren , et al. , 2000)
RV3875	ESAT-6	CA	25-400	25-400	Дания	(Pollock , et al., 2003)
RV0061
DPPD	HU	Hu	0.2-5	США	(Campos-Neto , et al. , 2001)
RV0061	DPPD	GP	5	USA	(Liu , et al. , 2004)
RV3875	ESAT-6	GP		GP	0.01-1	Дания	(Aggerbeck & Madsen, 2006)
Rv3875	ESAT-6	Ху	0. 01-1	Нидерланды / Дания	(Arend , et al. , 2008)
RV3875	ESAT-6	GP / HU	0,1-1 (GP) 1 (HU)	China	(WU , et al. , 2008)
RV0934	TPA38	GP / HU	3-5	China	(He , et al. , 2007)
Rv0350	ДНК	ГП	0.4	USA	(Yang, et al. , 2011)
RV0685	GREL2	GP	0.4	USA	(Yang, et al. , 2011)

Помимо протеомики, геномика сыграла ключевую роль в идентификации Mtb -специфических антигенов. Геномное сравнение штамма Mtb h47Rv и нескольких вакцинных штаммов M. bovis выявило 129 ORF, уникальных для Mtb , сгруппированных в 16 областях различий (RD) на хромосоме.Оценка и включение белков, кодируемых из этих областей, может играть жизненно важную роль в создании реагентов PPD следующего поколения, более специфичных к Mtb (Mustafa, 2001). Среди этих 16 RD наиболее изученным является RD1; гены, предсказанные в этом сегменте ДНК, удалены из всех вакцинных штаммов БЦЖ, в то время как они сохраняются во всех лабораторных и клинических изолятах M. bovis и Mtb , проверенных до сих пор (Mahairas , et al. , 1996).Двумя кандидатами, специфичными для комплекса Mtb и кодируемыми областью RD1, являются низкомолекулярные секретируемые белки CFP10 и ESAT-6 (Olsen , et al. , 2000, van Pinxteren , et al. , 2000, Brusasca и др. , 2001, Mustafa, 2002, Aagaard и др. , 2004).

ESAT-6 (Rv3875) и CFP10 (Rv3874), хорошо изученные Т-клеточные антигены, отсутствующие в БЦЖ, в настоящее время используются в качестве реагентов для диагностики туберкулеза с помощью анализа высвобождения гамма-интерферона (IGRA) (Mazurek, 2005). , Чанг К.С. и Леунг К.С., 2010).Рекомбинантный ESAT-6 вызывает положительный кожный ответ у инфицированных Mtb морских свинок и людей (Wu, et al. ., 2008). По сравнению с максимальным ответом ГЗТ через 72 часа, индуцированным PPD, ответ ГЗТ на ESAT-6 достиг пика через 24 часа (Pollock , et al. , 2003). Интересно, что комбинация ESAT-6 и CFP10 оказалась высокочувствительной и специфичной по ответу DTH (van Pinxteren , et al. , 2000). CFP10 действует как шаперон и связывается с ESAT-6 в плотном комплексе 1:1, стабилизируя его складчатую структуру (Renshaw , et al., 2002). Исследование рекомбинантного димера ESAT-6 (rdESAT-6), сверхэкспрессированного в Lactococcus lactis , показало, что он может быть успешным диагностическим средством, поскольку он отличает инфекцию Mtb от вакцинации БЦЖ и профили токсичности rdESAT-6 на нескольких животных моделях. утвердили rdESAT-6 как безопасный реагент для ТКП (Aggerbeck & Madsen, 2006). Недавно было завершено двойное слепое рандомизированное исследование фазы I, сравнивающее rdESAT-6 и RT23 у людей. Хотя это исследование показало очень многообещающие результаты в отношении дозировки и безопасности, необходимы дальнейшие исследования, чтобы в достаточной мере продемонстрировать побочные эффекты и эффективность, а также устранить сенсибилизацию (Arend , et al., 2008). Эффективность ESAT-6 и CFP10 в отношении индукции ответов DTH также является предметом споров, поскольку было показано, что они вызывают некротические ответы (Elhay , et al. , 1998).

В аналогичных исследованиях ESAT-6 сочетали со вторым белком культурального фильтрата, MPT64 (Rv1980c). Было показано, что, как и ESAT-6, рекомбинантный MPT64 вызывает ответ DTH у Mtb инфицированных морских свинок. Дальнейшие эксперименты показали, что 15 остатков между аминокислотами Gly-173 и Ala-187 являются ключевыми для вызова реакции ГЗТ (Oettinger , et al., 1995). Животные, подвергшиеся воздействию смеси ESAT-6-MPT64, показали, что эта комбинация имеет потенциал в качестве высокоспецифичного реагента (Elhay , et al. , 1998). В 2007 году сообщалось, что MPT64 находится на стадии III клинических испытаний для оценки его потенциала для замены PPD (Wang , et al. , 2007).

Ген Rv0061 уникален для комплекса Mtb и кодирует белок DPPD, который способен индуцировать сильную реакцию ГЗН у морских свинок, инфицированных Mtb (Coler , et al., 2000). Последующие исследования больных туберкулезом и клинически здоровых людей убедительно свидетельствуют о том, что DPPD является многообещающей альтернативой PPD (Campos-Neto , et al. , 2001, Liu , et al. , 2004). Недавнее исследование подтвердило биологическую активность очищенного рекомбинантного DPPD с использованием мононуклеарных клеток периферической крови от PPD-положительных доноров крови, что указывает на то, что DPPD можно использовать в качестве очищенного антигена для обнаружения туберкулеза (Kashino & Campos-Neto, 2011).

Перспективы и выводы

Несмотря на идентификацию более дюжины белков-кандидатов для включения в реагенты PPD следующего поколения и обнадеживающие предварительные данные исследований на животных и людях, создание нового реагента – одного или нескольких антигенов – для замены PPD остается испытывающий. ТКП, специфичная для выявления исключительно активного или латентного туберкулеза, могла бы принести большую пользу диагностическим и эпидемиологическим программам. Таким образом, необходимо использовать новые стратегии для обнаружения более чувствительных и специфичных антигенов кожных тестов.С другой стороны, один антиген не может эффективно заменить PPD, поскольку для оптимального реагента PPD следующего поколения может потребоваться коктейль антигенов или комбинация нескольких DTH-индуцирующих эпитопов (Oettinger , et al. , 1995). , Лященко , и др. , 1998, Родос , и др. , 2000).

Для достижения этой цели идентификация молекулярного состава PPD облегчает разработку более совершенного реагента. Протеомные исследования выявили высококонсервативные шапероны GroES, GroEL2 и DnaK как три наиболее доминирующих белка, которые могут объяснить положительные свойства и сниженную специфичность PPD (Borsuk , et al., 2009, Чо и др. , 2012). Наша группа недавно идентифицировала два новых препарата, DnaK/GroEL2/Rv0685 и DnaK/GroEL2/Rv0009, которые были способны индуцировать ответы DTH, эквивалентные PPD, в модели Mtb морских свинок (Yang , et al. , 2011). . Лучшее понимание реакции DTH, вызванной этими определенными белками, может способствовать открытию быстрых и чувствительных реагентов для кожных тестов следующего поколения для обнаружения инфекции Mtb .

Благодарности

Эта работа финансировалась в рамках контракта на материалы для испытаний и исследований противотуберкулезной вакцины (HHSN266200400091C) с NIH.

Сноски

Конкурирующие интересы: Не заявлено.

Этическое одобрение: Не требуется.

Ссылки

Aagaard C, Brock I, Olsen A, Ottenhoff TH, Weldingh K, Andersen P. Картирование иммунной реактивности по отношению к Rv2653 и Rv2654: два новых низкомолекулярных антигена, обнаруженных специфически в комплексе Mycobacterium tuberculosis. J заразить Dis. 2004; 189: 812–819. [PubMed] [Google Scholar]
Addo KK, Hof SV, Mensah GI, et al.Опрос туберкулиновых кожных проб среди ганских школьников. Общественное здравоохранение BMC. 2010;10:35. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
Aggerbeck H, Madsen SM. Безопасность ЭСАТ-6. Туберкулез (Эдинб) 2006; 86: 363–373. [PubMed] [Google Scholar]
Аль-Абси А., Бассили А., Абдул Бари Х. и др. Снижение заболеваемости туберкулезом в Йемене: оценка на основе двух общенациональных туберкулиновых обследований. Int J Tuberc Lung Dis. 2009;13:1100–1105. [PubMed] [Google Scholar]
Аренд С.М., Франкен В.П., Аггербек Х. и др.Двойное слепое рандомизированное исследование фазы I, сравнивающее rdESAT-6 с туберкулином в качестве реагента для кожных тестов при диагностике туберкулезной инфекции. Туберкулез (Эдинб) 2008; 88: 249–261. [PubMed] [Google Scholar]
Bachtiar A, Miko TY, Machmud R, et al. Годовой риск заражения туберкулезом в провинции Западная Суматра, Индонезия. Int J Tuberc Lung Dis. 2008; 12: 255–261. [PubMed] [Google Scholar]
Борген К., Костер Б., Мейер Х., Куйвенховен В., ван дер Санде М., Кобеленс Ф. Оценка крупномасштабного расследования контакта с туберкулезом в Нидерландах. Eur Respir J. 2008; 32: 419–425. [PubMed] [Google Scholar]
Борсук С., Ньюкомб Дж., Мендум Т.А., Деллагостин О.А., Макфадден Дж. Идентификация белков из очищенного туберкулином белкового производного (PPD) с помощью ЖХ-МС/МС. Туберкулез (Эдинб) 2009;89:423–430. [PubMed] [Google Scholar]
Ботамли Г.Х., Кэтти Д., Клифтон-Хэдли Р., Гриффин Ф., Хьюинсон Г., Поллок Дж. Иммунодиагностика микобактериальной инфекции. Глава 10. Blackwell Science Ltd; Oxford: 1999. [Google Scholar]
Brusasca PN, Colangeli R, Lyashchenko KP, et al.Иммунологическая характеристика антигенов, кодируемых областью RD1 генома Mycobacterium tuberculosis. Сканд Дж. Иммунол. 2001; 54: 448–452. [PubMed] [Google Scholar]
Campos-Neto A, Rodrigues-Junior V, Pedral-Sampaio DB и др. Оценка DPPD, одного рекомбинантного белка Mycobacterium tuberculosis, в качестве альтернативного антигена для реакции Манту. Туберкулез (Эдинб) 2001;81:353–358. [PubMed] [Google Scholar]
Чадха В.К., Джаганнатха П. С., Вайдьянатан П.С., Джагота П.PPD RT23 для туберкулиновых обследований в Индии. Int J Tuberc Lung Dis. 2003; 7: 172–179. [PubMed] [Google Scholar]
Chambers MA, Jahans K, Whelan A, Hughes C, Sayers R, Perkins A, Glyn Hewinson R. Простое объективное измерение кожной реакции гиперчувствительности замедленного типа на туберкулин с помощью спектрофотометрии. Технология восстановления кожи. 2002; 8: 89–93. [PubMed] [Google Scholar]
Чо Ю.С., Добос К.М., Пренни Дж. и др. Расшифровка протеома реагента для прижизненной диагностики «очищенное белковое производное» микобактерий туберкулеза.Протеомика. 2012; 12: 979–991. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
Ciftci E, Ilgazli A, Gulleroglu B, Ara I, Akansel G. Ультрасонографическое измерение туберкулинового кожного теста: сравнение с ручным чтением. Infect Dis Clin Pract (Baltim Md) 2005; 13:20–23. [Google Scholar]
Colangeli R, Spencer JS, Bifani P, et al. MTSA-10, продукт гена Rv3874 Mycobacterium tuberculosis, вызывает туберкулёзную гиперчувствительность замедленного типа у морских свинок. Заразить иммун.2000;68:990–993. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
Coler RN, Skeiky YA, Ovendale PJ, et al. Клонирование гена Mycobacterium tuberculosis, кодирующего очищенный белковый производный белок, который вызывает сильную туберкулёзную специфическую гиперчувствительность замедленного типа. J заразить Dis. 2000; 182: 224–233. [PubMed] [Google Scholar]
Comstock GW, Edwards LB, Philip RN, Winn WA. Сравнение в Соединенных Штатах Америки двух туберкулинов, Ppd-S и Rt 23. Bull World Health Organ.1964; 31: 161–170. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
Dye C, Scheele S, Dolin P, Pathania V, Raviglione MC. Заявление о консенсусе. Глобальное бремя туберкулеза: оценка заболеваемости, распространенности и смертности по странам. Глобальный проект ВОЗ по эпиднадзору и мониторингу. ДЖАМА. 1999; 282: 677–686. [PubMed] [Google Scholar]
Edwards PQ, Edwads LB. История туберкулиновой пробы с эпидемиологической точки зрения. Ам преподобный Респир Дис. 1960; 81 (1 часть 2): 1–47. [PubMed] [Google Scholar]
Elhay MJ, Oettinger T, Andersen P.Реакция гиперчувствительности замедленного типа на ESAT-6 и MPT64 от Mycobacterium tuberculosis у морской свинки. Заразить иммун. 1998;66:3454–3456. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
Farhat M, Greenaway C, Pai M, Menzies D. Ложноположительные туберкулиновые кожные пробы: каков абсолютный эффект БЦЖ и нетуберкулезных микобактерий? Int J Tuberc Lung Dis. 2006; 10:1192–1204. [PubMed] [Google Scholar]
Фернандес-Вильяр А., Горис А., Отеро М., Чусино Н., Васкес Р., Муньос М.Дж., Пинейро Л.Консервация очищенного белкового производного туберкулина РТ-23. Арка Бронконемол. 2004;40:301–303. [PubMed] [Google Scholar]
Gillenwater KA, Sapp SC, Pearce K, Siberry GK. Увеличение числа конвертеров туберкулиновых кожных проб среди медицинских работников после перехода с туберсола на аплисол. Am J Infect Control. 2006; 34: 651–654. [PubMed] [Google Scholar]
Guld J, Bentzon MW, Bleiker MA, Griep WA, Magnusson M, Waaler H. Стандартизация новой партии очищенного туберкулина (PPD), предназначенного для международного использования.Всемирный орган здравоохранения Быка. 1958; 19: 845–951. [Статья бесплатно PMC] [PubMed] [Google Scholar]
Hanifa Y, Grant AD, Lewis J, Corbett EL, Fielding K, Churchyard G. Распространенность латентной туберкулезной инфекции среди золотодобытчиков в Южной Африке. Int J Tuberc Lung Dis. 2009; 13:39–46. [PubMed] [Google Scholar]
Хансен О.Г., Линдквист К., Валер Х. Оценка эффективности туберкулина у людей и морских свинок. Всемирный орган здравоохранения Быка. 1964; 31: 171–182. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
Harrison DK, Abbot NC, Beck JS, McCollum PT.Предварительная оценка лазерной допплеровской визуализации перфузии кожи человека с использованием туберкулиновой реакции в качестве модели. Физиол Изм. 1993; 14: 241–252. [PubMed] [Google Scholar]
He XY, Luo YA, Zhang XG и др. Клиническая оценка рекомбинантного белка 38 кДа Mycobacterium tuberculosis. Scand J Infect Dis. 2007: 1–6. [PubMed] [Google Scholar]
Ho MM, Kairo SK, Corbel MJ. Иммуноанализ очищенных белковых производных туберкулина (PPD) в качестве альтернативного анализа in vitro для идентификации и подтверждения активности.Гум Вакцина. 2006; 2:29–33. [PubMed] [Google Scholar]
Дженсен П.А., Ламберт Л.А., Ядемарко М.Ф., Ридзон Р. Руководство по предотвращению передачи микобактерий туберкулеза в медицинских учреждениях, 2005 г. MMWR Recomm Rep. 2005; 54:1–141. [PubMed] [Google Scholar]
Кимура М., Комсток Г.В., Мори Т. Сравнение эритемы и уплотнения по результатам туберкулиновых тестов. Int J Tuberc Lung Dis. 2005; 9: 853–857. [PubMed] [Google Scholar]
Kitaura H, Kinomoto M, Yamada T. Рибосомальный белок L7, включенный в состав очищенного белкового производного туберкулина (PPD), является основным термоустойчивым белком, вызывающим сильную гиперчувствительность замедленного типа.Сканд Дж. Иммунол. 1999; 50: 580–587. [PubMed] [Google Scholar]
Клаузен Дж., Магнуссон М., Андерсен А.Б., Кох С. Характеристика очищенного белкового производного туберкулина с использованием моноклональных антител: выделение реактивного компонента гиперчувствительности замедленного типа из культурального фильтрата M.tuberculosis. Сканд Дж. Иммунол. 1994;40:345–349. [PubMed] [Google Scholar]
Kritzinger FE, den Boon S, Verver S, et al. Отсутствие снижения годового риска заражения туберкулезом в эндемичных районах Кейптауна, Южная Африка.Троп Мед Int Health. 2009; 14:136–142. [PubMed] [Google Scholar]
Li J, Munsiff SS, Agerton TB. Распространенность положительных результатов туберкулиновых кожных проб среди клинического населения в Нью-Йорке. J Immigr Minor Health 2008 [PubMed] [Google Scholar]
Liu C, Flamoe E, Chen HJ, Carter D, Reed SG, Campos-Neto A. Экспрессия и очистка иммунологически реактивного DPPD, рекомбинантного антигена кожного теста Mycobacterium tuberculosis, с использованием клеток-хозяев Mycobacterium smegmatis и Escherichia coli.Может J Microbiol. 2004; 50:97–105. [PubMed] [Google Scholar]
Лопес Л.К., Телес С.А., Соуза А.С., Рабахи М.Ф., Типпл А.Ф. Риск туберкулеза среди медсестер из Центральной Бразилии. Am J Infect Control. 2008; 36: 148–151. [PubMed] [Google Scholar]
Лященко К., Манка С., Коланджели Р., Хейбель А., Уильямс А., Дженнаро М.Л. Использование коктейлей специфических антигенов комплекса микобактерий туберкулеза для кожных тестов, специфичных для туберкулеза. Заразить иммун. 1998;66:3606–3610. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
Mackin LA.Скрининг на туберкулез в учреждениях первичной медико-санитарной помощи. Lippincotts Prim Care Pract. 1998; 2: 599–610. викторина 611–593. [PubMed] [Google Scholar]
Maes M, Gimenez JF, D’Alessandro A, De Waard JH. Стабильность человеческого, бычьего и птичьего очищенного белкового производного туберкулина (PPD) J Infect Dev Ctries. 2011;5:781–785. [PubMed] [Google Scholar]
Mahairas GG, Sabo PJ, Hickey MJ, Singh DC, Stover CK. Молекулярный анализ генетических различий между Mycobacterium bovis BCG и вирулентными M.крупный рогатый скот J Бактериол. 1996; 178:1274–1282. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
Masucci P, McAlpine KL. Биохимические исследования бактериальных производных. X. Получение белка туберкулезной палочки человека МА-100. Proc Soc Exp Biol Med. 1930; 27: 661–663. [Google Scholar]
Мехта С.Р., МакГрудер С., Луни Д., Джонс С., Смит Д.М. Различия в туберкулиновой реактивности, установленной в программе обследования здоровья сотрудников администрации ветеранов. Клин Вакцина Иммунол. 2009; 16: 541–543.[Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
Мустафа А.С. Биотехнология в разработке новых вакцин и диагностических реагентов против туберкулеза. Карр Фарм Биотехнолог. 2001; 2: 157–173. [PubMed] [Google Scholar]
Мустафа А.С. Разработка новых вакцин и диагностических реагентов против туберкулеза. Мол Иммунол. 2002; 39: 113–119. [PubMed] [Google Scholar]
Эттингер Т., Холм А., Мтони И.М., Андерсен А.Б., Хаслоов К. Картирование эпитопа секретируемого белка MPT64 Mycobacterium tuberculosis, вызывающего гиперчувствительность замедленного типа.Заразить иммун. 1995;63:4613–4618. [Статья бесплатно PMC] [PubMed] [Google Scholar]
Olsen AW, Hansen PR, Holm A, Andersen P. Эффективная защита от Mycobacterium tuberculosis путем вакцинации одним субдоминантным эпитопом антигена ESAT-6. Евр Дж Иммунол. 2000;30:1724–1732. [PubMed] [Google Scholar]
Pollock JM, McNair J, Bassett H, et al. Специфические реакции гиперчувствительности замедленного типа на ESAT-6 идентифицируют крупный рогатый скот, инфицированный туберкулезом. Дж. Клин Микробиол. 2003; 41: 1856–1860.[Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
Rangel-Frausto MS, Ponce-De-Leon-Rosales S, Martinez-Abaroa C, Haslov K. Туберкулез и качество туберкулина: лучшие намерения, вводящие в заблуждение результаты. Infect Control Hosp Epidemiol. 2001; 22: 481–484. [PubMed] [Google Scholar]
Рао В.Г., Гопи П.Г., Ядав Р. и др. Ежегодный риск заражения туберкулезом среди племенного населения центральной Индии. Троп Мед Int Health. 2008; 13:1372–1377. [PubMed] [Google Scholar]
Renshaw PS, Panagiotidou P, Whelan A, Gordon SV, Hewinson RG, Williamson RA, Carr MD.Убедительные доказательства того, что основные Т-клеточные антигены комплекса Mycobacterium tuberculosis ESAT-6 и CFP-10 образуют плотный комплекс 1:1, и характеристика структурных свойств ESAT-6, CFP-10 и ESAT-6* Комплекс КФП-10. Значение для патогенеза и вирулентности. Дж. Биол. Хим. 2002; 277:21598–21603. [PubMed] [Google Scholar]
Rhodes SG, Gavier-Widen D, Buddle BM, Whelan AO, Singh M, Hewinson RG, Vordermeier HM. Антигенная специфичность при экспериментальном туберкулезе крупного рогатого скота. Заразить иммун.2000;68:2573–2578. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
Rowland SS, Ruckert JL, Cummings PJ. Белковые структуры с низкой молекулярной массой в фильтратах культур микобактерий и очищенных белковых производных. FEMS Immunol Med Microbiol. 1999; 23:21–25. [PubMed] [Google Scholar]
Sbarbaro JA. Антигены кожных тестов: оценка, время которой пришло. Ам преподобный Респир Дис. 1978; 118:1–5. [PubMed] [Google Scholar]
Schiller I, Vordermeier HM, Waters WR, et al. Сравнение активности туберкулина с использованием гамма-интерферона для диагностики туберкулеза крупного рогатого скота.Ветеринар Рек. 2010; 167:322–326. [PubMed] [Google Scholar]
Seibert FB. Выделение и свойства очищенного белкового производного туберкулина. Ам преподобный Туберк. 1934; 30: 713–720. [Google Scholar]
Seibert FB, Glen JT. PPD-S состоял примерно из 92,1% белка, 5,9% полисахаридов и 1,2% нуклеиновой кислоты. Ам преподобный Туберк. 1941; 44: 9–24. [Google Scholar]
Sgountzos V, Simopoulou S, Kretsou S, Sakayianni K, Pavlerou S, Gourgoulianis K, Grigorakos L. Сравнительное исследование RT23 и туберкулина Мерье, протестированных на здоровых добровольцах.Int J Tuberc Lung Dis. 2009; 13:312–316. [PubMed] [Google Scholar]
Shigeto E. [Очищенные белковые производные, полученные из Mycobacterium tuberculosis (PPD) и M. intracellulare (PPD-B) в дифференциальной диагностике микобактериозов] Kekkaku. 1990; 65: 701–709. [PubMed] [Google Scholar]
Шингадия Д., Новелли В. Туберкулиновая кожная проба: сто, а не выход? Арч Дис Чайлд. 2008; 93: 189–190. [PubMed] [Google Scholar]
Shrestha KB, Malla P, Jha KK, Shakya TM, Akhtar M, Gunneberg C, van der Werf MJ.Первое национальное туберкулиновое обследование в Непале. Int J Tuberc Lung Dis. 2008; 12: 909–915. [PubMed] [Google Scholar]
Teixeira L, Maciel E, Dutra ME, Perkins MD, Johnson JL, do Valle Dettoni V. Одновременное сравнение реактивности очищенного белкового производного RT-23 и туберсола у медицинских работников в Витории, Бразилия . Int J Tuberc Lung Dis. 2000;4:1074–1077. [PubMed] [Google Scholar]
Turk JL. Фон Пирке, аллергия и инфекционные заболевания: обзор. JR Soc Med. 1987; 80: 31–33.[Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
Ulea I, Murgoci G, Popa ML, Popa L, Stavri H. Сравнительное исследование туберкулинов RT23 и IC-65, испытанных на детях с туберкулезом. Роум Арч Микробиол Иммунол. 2010;69:75–78. [PubMed] [Google Scholar]
Ван Пинкстерен Л.А., Равн П., Аггер Э.М., Поллок Дж., Андерсен П. Диагностика туберкулеза на основе двух специфических антигенов ESAT-6 и CFP10. Клин Диагн Лаб Иммунол. 2000;7:155–160. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
Vashishtha VM, John TJ.Распространенность инфекции Mycobacterium tuberculosis у детей в Западном Уттар-Прадеше. Индийский педиатр. 2010;47:97–100. [PubMed] [Google Scholar]
Villarino ME, Burman W, Wang YC, et al. Сопоставимая специфичность двух коммерческих туберкулиновых реагентов у лиц с низким риском туберкулезной инфекции. ДЖАМА. 1999; 281:169–171. [PubMed] [Google Scholar]
Villarino ME, Brennan MJ, Nolan CM, et al. Сравнительное тестирование действующих (PPD-S1) и предложенных (PPD-S2) эталонных стандартов туберкулина.Am J Respir Crit Care Med. 2000; 161:1167–1171. [PubMed] [Google Scholar]
Wang Z, Potter BM, Gray AM, Sacksteder KA, Geisbrecht BV, Laity JH. Структура раствора антигена MPT64 Mycobacterium tuberculosis определяет новое семейство белков бета-захвата. Дж Мол Биол. 2007; 366: 375–381. [PubMed] [Google Scholar]
ВОЗ. Доклад Всемирной организации здравоохранения за 2011 г. 2011 г. Глобальная борьба с туберкулезом. [Google Scholar]
Wu X, Zhang L, Zhang J, Zhang C, Zhu L, Shi Y. Рекомбинантный белок-мишень 6 раннего секретируемого антигена в качестве антигена кожного теста для специфического выявления инфекции Mycobacterium tuberculosis.Клин Эксп Иммунол. 2008; 152:81–87. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
Yang HL, Troudt J, Grover A, et al. Три белковых коктейля опосредуют ответы ГЗТ, неотличимые от PPD в модели Mycobacterium tuberculosis на морских свинках. Infect Immun 2011 [бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]

Очищенные белковые производные туберкулина

FEMS Immunol Med Microbiol. Авторская рукопись; Доступен в PMC 2013 декабря 1.

Опубликовано в окончательной редактированной форме AS:

PMCID: PMC34

NIHMSID: NIHMMS3

^* Автор, ответственный за переписку: Карен М.Добос, почтовый адрес: 1682 Campus Delivery, кафедра микробиологии, иммунологии и патологии; Университет штата Колорадо, Форт. Collins, CO 80523-1682, тел.: 970-491-6549, [email protected] См. другие статьи в PMC, в которых цитируется опубликованная статья.
Abstract
Туберкулиновая кожная проба, которая включает мониторинг иммунной реакции на инъекцию очищенного производного белка (PPD), была наиболее широко используемым методом для выявления инфекции Mycobacterium tuberculosis с момента ее разработки в 1930-х годах.До недавнего времени молекулярный состав PPD был неизвестен. Это помешало открытию улучшенных реагентов для кожных тестов и резко затруднило усилия по определению механизма действия. Протеомная оценка PPD в сочетании с подробным анализом на модели туберкулеза морской свинки привела к дальнейшему определению молекулярного состава PPD. В этом сообщении рассматривается история и текущее состояние PPD, в дополнение к описанию реагентов-кандидатов PPD следующего поколения, основанных на использовании отдельного белка или белковых коктейлей.
Ключевые слова: Туберкулез, Очищенный белковый производный, Туберкулиновая кожная проба, Диагностика причем большинство этих трагических событий произошло в развивающихся странах (ВОЗ, 2011 г.). Его тяжесть усугубляется способностью Mycobacterium tuberculosis ( Mtb ), возбудителя туберкулеза, сохраняться в виде персистирующей бессимптомной инфекции, называемой латентной туберкулезной инфекцией (ЛТБИ).В течение почти столетия лица, инфицированные Mtb , выявлялись с помощью туберкулиновой кожной пробы (ТКП). В 1890 году Роберт Кох предположил, что глицериновый экстракт туберкулезных бацилл может как лечить, так и предотвращать туберкулез. Хотя «Старый туберкулин» Коха в конечном итоге потерпел неудачу в качестве терапии, его открытия стали катализатором разработки современной ТКП, наиболее важного инструмента для выявления потенциальных случаев ТБ на сегодняшний день (Shingadia & Novelli, 2008).
ТКП также известна как проба Манту в честь французского врача Шарля Манту (1877–1947), который установил диагностические критерии для чтения ТКП.Метод Манту, одобренный Американским торакальным обществом и Центрами по контролю и профилактике заболеваний (CDC), в настоящее время является золотым стандартом для определения того, инфицирован ли человек Mtb. Этот иммунологический тест состоит из двух частей. Сначала реагент очищенного производного белка (PPD) вводят внутрикожно в предплечье. Во-вторых, реакцию гиперчувствительности замедленного типа (ГЗТ) отслеживают через 48-72 часа после инъекции путем измерения диаметра уплотнения (отека из-за воспаления) в миллиметрах в месте инъекции.Обычным явлением является визуализация эритемы (покраснения) в течение первых 24 часов после введения PPD; это не следует измерять, так как это не указывает на инфекцию. Проведение и чтение результатов этого теста должны выполняться обученными медицинскими работниками, которые могут интерпретировать факторы риска наряду с измерением при определении положительной реакции (Mackin, 1998).
Помимо своей роли индикатора инфекции Mtb , ТКП также используется в качестве эпидемиологического инструмента для оценки распространенности латентной туберкулезной инфекции (ЛТБИ).Прогноз о том, что одна треть населения мира инфицирована Mtb , частично основан на частоте положительной ТКП (Dye , et al. , 1999).
В текущем обзоре мы представляем обзор истории, развития и текущего использования PPD. Кроме того, будут рассмотрены исследования, направленные на определение ключевых молекулярных компонентов PPD и его биологической активности.
Прошлое и настоящее использование PPD
Первая кожная туберкулиновая проба была введена в 1907 г. фон Пирке (1874–1929), австрийским ученым и педиатром (Turk, 1987).В его исследовании использовалась ОТ Коха, нагретый бульон, состоящий из неочищенной неопределенной смеси белков и других макромолекул, полученных из туберкулезной палочки. OT Коха готовили из концентрированного фильтрата глицерино-пептонного бульона, в котором Mtb росли в течение 6–8 недель. OT Koch и аналогичные продукты не используются в качестве реагентов для ТКП в США из-за недостаточной чистоты, различий в эффективности и специфичности, а также из-за недостаточной стандартизации.
В 1930 г. из фильтрата культуры Mtb был получен альтернативный состав, известный как MA-100, в виде состава, не содержащего полисахаридов (Masucci & McAlpine, 1930).Было обнаружено, что МА-100 значительно более эффективен, чем ОТ Коха; однако его использование в качестве стандартного диагностического реагента было ограничено — в основном из-за сенсибилизирующего действия, наблюдаемого при повторных инъекциях в кожу.
В 1934 году Флоренс Б. Зайберт (1897–1991), биохимик из Института Генри Фиппса Пенсильванского университета, разработала более стабильный и последовательный препарат (Seibert, 1934). Первоначально обозначенный по способу его производства, SOTT, аббревиатура от «синтетический средний преципитат туберкулина трихлоруксусной кислоты», этот продукт позже был назван очищенным белковым производным или PPD.Его получали пропариванием культур Mtb в стерилизаторе Arnold и очисткой белков повторным осаждением сульфатом аммония (Seibert & Glen, 1941). По сравнению с предыдущими туберкулиновыми реагентами, в этом методе приготовления PPD было значительно снижено содержание полисахаридов, нуклеиновых кислот и липидов, и, таким образом, это был реагент, богатый белком. В 1944 году большая партия этого улучшенного PPD (партия 49608), переименованного в PPD-S (PPD-Standard), была предоставлена в качестве эталонного продукта в Соединенных Штатах.PPD-S состоял примерно из 92,9% белка, 5,9% полисахаридов и 1,2% нуклеиновой кислоты (Seibert & Glen, 1941). Из-за повышенной чистоты и активности PPD-S был принят Всемирной организацией здравоохранения (ВОЗ) в качестве международного стандарта туберкулина в 1952 г. (Guld , et al. , 1958). С 1978 г. Управление по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов (FDA) потребовало, чтобы все партии PPD были квалифицированы биологическим анализом и должны демонстрировать активность, эквивалентную активности PPD-S (Sbarbaro, 1978). Международная единица (МЕ) для PPD была определена как часть этого эффекта; одна МЕ равна биологической активности, содержащейся в 0.028 мкг PPD-S (0,02 мкг PPD с 0,008 мкг солей). Однако в США и Канаде эффективность PPD выражается в туберкулиновых единицах (TU), а не в IU. Одна TU определяется как 0,02 мкг PPD-S (Edwards & Edwads, 1960). Пять ТЕ являются стандартной дозой для внутрикожного диагностического применения, как определено в эпидемиологических исследованиях (Bothamley, и др., , 1999).
PPD-S2, текущий стандарт США на туберкулин PPD, был разработан в ожидании возможного истощения PPD-S (Villarino, et al ., 2000). В настоящее время Aplisol ^® (JHP Pharmaceuticals, Inc, Рочестер, Мичиган) и Tubersol ^® (Sanofi Pasteur Limited, Swiftwater, PA) являются двумя широко используемыми коммерчески доступными продуктами PPD-S2 (Jensen, et al. ). , 2005). Результаты кожных испытаний с Aplisol ^® и Tubersol ^® вполне сравнимы с результатами оригинального стандарта PPD, PPD-S (Villarino, et al. ., 1999). Однако переход от Tubersol ^® к Aplisol ^® или наоборот привел к отклонениям в кожных тестах, хотя точная причина до сих пор неясна (Gillenwater, et al ., 2006, Мехта, и др. , 2009).
Помимо PPD-S, за пределами США и Канады используется несколько других составов PPD (Li , et al. , 2008). Некоторые из этих туберкулиновых продуктов, включая PPD RT23, производятся Государственным институтом сывороток (SSI) (Comstock, и др., , 1964). В настоящее время ВОЗ и Международный союз по борьбе с туберкулезом и заболеваниями легких (IUATLD) рекомендуют 2 ТЕ PPD-RT23 с твином 80. RT23 является наиболее широко используемым продуктом PPD во всем мире (Rangel-Frausto, и др. ., 2001). Несколько исследований по всему миру использовали PPD RT23 для оценки распространенности инфекции туберкулезной палочкой, включая Индию (Rao , et al. , 2008), (Vashishtha & John, 2010), Гану (Addo , et al. 2010), Йемен (Аль-Абси, и др. , 2009), Южная Африка (Критцингер, и др. , 2009) (Ханифа, и др. , 2009), Непал (Шреста, et , 2008), Бразилии (Lopes, и др. , 2008) и Индонезии (Bachtiar, и др. )., 2008). Кроме того, он также использовался для оценки крупномасштабных контактов с больными туберкулезом в Нидерландах (Borgen, et al. , 2008).
В дополнение к вышеупомянутым продуктам PPD также используются другие варианты PPD, такие как PPD RT23 Mexico (Laboratorio Nacional de Salud, Secretaria de Salud, Мехико, Мексика), продукт PPD, используемый в Латинской Америке (Rangel-Frausto , и др. , 2001), и японский продукт PPD-s. (Кимура, и др., 2005 ). Многочисленные продукты PPD, используемые в настоящее время, перечислены в .
Таблица 1
Препараты PPD, используемые в настоящее время для лечения людей
PPD S2 (APLisol ^®) JHP Pharmaceuticals, Inc, Rochester, Mi, USA 5 TU (Villarino , et al. , 1999) PPD S2 (Tubersol ^®) Санофи Пастер Лимитед, Свифтуотер, Пенсильвания, США 5 ТУ (Вилларино , и др., 1999, Teixeira и др. , 2000, Rangel-Frausto и др. , 2001) PPD RT23 SSI Statens SSI Статус институт сыворотки, Копенгаген, Дания 2 TU (Maes , et al. , 2011, Teixeira , et al. , 2000) PPD RT23 Мексика Laboratorio Nacional de Salud, Секретария де Салюд, Мехико, Мексика 2 TU (Rangel-Frusto , et al. , 2001) PPD RT23 (Evans PPD) Селлтек Фарма С.А., Мадрид, Испания 2 TU (Fernandez-Villar , et al. , 2004) PPD-S Nihon BCG Seizo Co., Токио, Япония 3 TU ( Shigeto, 1990) PPD IC-65 PPD IC-65 Cantacuzino Институт, Бухарест, Румыния 2 TU (Ulea , et al. 2010)
Так как есть несколько производителей PPD важно оценить различия в эффективности этих продуктов PPD.Из-за ограниченных знаний о точном составе каждого продукта PPD невозможно использовать традиционные методы контроля качества для сравнения препаратов PPD. Поэтому сравнения с использованием животных, инфицированных микобактериями, проводятся для оценки биологической активности продуктов PPD. При этом продукты PPD должны вводиться в тех же условиях, в которых они будут использоваться в клинических условиях (Hansen , et al. , 1964).
Первое опубликованное сравнение эффективности PPD было проведено между PPD-S и PPD-RT23.Исследование, проведенное среди 6 групп населения в США, включая детей-эскимосов, больных туберкулезом и новобранцев в учебных центрах ВМС США, показало, что 2,5 ТЕ PPD-RT23, содержащего твин 80, обладают эффективностью, аналогичной 5 ТЕ PPD-S. (Комсток , и др. , 1964). Совсем недавно исследование 69 больных туберкулезом и 1189 субъектов с низким риском в США сравнило PPD-S2 с PPD-S1. Было обнаружено, что эти два продукта статистически неразличимы у больных туберкулезом. Кроме того, такая же высокая специфичность наблюдалась среди субъектов с низким риском.Это исследование показало, что PPD-S2 функционально эквивалентен PPD-S1 и может легко заменить его (Villarino , et al. , 2000). Многочисленные исследования сравнивали активность RT23, полученного в SSI, с другими источниками PPD, включая IC-65, и среди них была обнаружена эквивалентная эффективность (Ulea , et al. , 2010), (Chadha , et al. , 2003), (Шиллер и др. 2010). Однако аналогичное исследование в Мексике сравнило эффективность местного производства PPD RT23 (Мексика), Tubersol ^® и PPD RT23 (SSI) и выявило, что из трех, RT23 (Мексика) имел гораздо более низкую чувствительность (Rangel- Фраусто и др., 2001). RT23 и туберкулин Merieux (разработанный в Pasteur-Merieux) также недавно сравнивали по их относительной активности. Оба препарата были получены из нескольких штаммов микобактерий (RT23 был получен из семи штаммов Mtb , Merieux был получен из трех штаммов Mtb, плюс M. bovis ) и, по-видимому, обладают биологической активностью, эквивалентной PPD-S. , который является продуктом одного штамма. Однако RT23 часто вызывает более сильную антигенную реакцию, чем препарат Мерье (Sgountzos, et al., 2009). Недавно Schiller et al. сравнили диагностическую надежность PPD из разных источников с помощью инновационного подхода к мониторингу ответов интерферона-γ в культурах цельной крови (Schiller , et al. 2010). В этом исследовании образцы цельной крови стимулировали несколькими различными туберкулинами, и через 24 часа после стимуляции отслеживали реакцию IFN-γ. Их результаты подтверждают, что существуют значительные различия между депрессорами из разных источников, и указывают на необходимость дальнейшей стандартизации продуктов депрессоров.Была введена количественная шкала, обозначенная как RP30 (относительная активность 30), определяемая как концентрация белка, при которой конкретный препарат PPD имеет 30% максимальной активности. RP30 можно использовать в качестве инструмента для быстрого сравнения биологической активности партий и источников PPD. Хотя в этих отчетах подчеркивается важность оценки биологической активности продуктов PPD из разных источников, расхождения в эффективности трудно объяснить из-за сложности и неоднозначности молекулярного состава PPD.Протеомная характеристика PPD была описана нашей лабораторией (Cho, et al. , 2012) и другими (Borsuk , et al. , 2009), демонстрируя, что PPD состоит из сотен различных белков. Дополнительный сравнительный протеомный, биологический и гистологический анализы использовались для измерения относительных различий в молекулярном составе и биологической активности между PPD-S2, RT23 и PPD-KIT (PPD Корейского технологического института) (Cho, et al ., 2012). Это исследование продемонстрировало, что, хотя все 3 препарата PPD были неразличимы по своей способности индуцировать ответ ГЗТ, были очевидны гистологические различия и различия в относительном количестве нескольких белков, включая членов семейства белков Esx, что позволяет предположить корреляцию между повышенной гистопатологией и повышенная концентрация белков Esx в PPD (Cho, et al ., 2012). В совокупности все эти сравнительные отчеты иллюстрируют сложность PPD и проблемы, связанные с созданием стандартизированного реагента.
Подводные камни PPD
Несмотря на то, что в прошлом столетии ТКП была стандартом для выявления лиц, подверженных риску активного ТБ, она имеет несколько фундаментальных недостатков, которые служат стимулом для разработки более стандартизированной методологии и более эффективных инструментов для выявления ЛТБИ. Основной проблемой текущего теста является высокий уровень ложноположительных результатов, вызванный неспособностью TST отличить инфекцию Mtb от воздействия нетуберкулезных микобактерий или вакцинации M.bovis Bacille Calmett-Guérin (BCG) (Huebner, и др. , 1993). Оба случая ложноположительных ответов обычно приписывают иммунному ответу, запускаемому гомологичными антигенами либо при вакцинации БЦЖ, либо от микобактерий из окружающей среды (Harboe, 1981, Huebner, и др., , 1993). Эти предположения были недавно подтверждены молекулярным анализом PPD, показывающим, что четыре белка теплового шока (GroEl, GroEs, DnaK и HspX) составляют примерно 60% протеомного содержания PPD (Cho, et al ., 2012, Борсук и др. , 2009). Эти белки-шапероны обладают высокой гомологией (более 70%) и консервативны среди большинства видов микобактерий (Cho, et al. ., 2012, Borsuk , et al. , 2009). Это усложняет использование ТКП в качестве инструмента как для эпидемиологических исследований, так и для выявления лиц, инфицированных Mtb , из-за потенциальной перекрестной реактивности от вакцинации БЦЖ или инфицирования нетуберкулезными микобактериями. Ложноотрицательные результаты также проблематичны, особенно у детей и лиц с ослабленным иммунитетом (Farhat, и др., )., 2006 г., Шингадия и Новелли, 2008 г.). Это связано с тем, что положительный PPD требует эффективного ответа DTH. Поэтому вполне вероятно, что PPD не может служить индикатором инфекции Mtb в тех популяциях, где отсутствует надежный Т-клеточный иммунитет. Наконец, хотя ТКП можно использовать для выявления ЛТБИ, он не позволяет провести различие между этим заболеванием, активным заболеванием или выздоравливающим пациентом. Несмотря на эти подводные камни, TST остается наиболее часто используемым инструментом для обнаружения инфекции Mtb .
Будущее PPD – открытие и разработка PPD следующего поколения
Разработка новых и более эффективных реагентов для выявления ЛТБИ является ключом к успеху в борьбе с туберкулезом. Улучшенное обнаружение латентных бацилл приведет к стратегиям раннего вмешательства и, вероятно, снизит заболеваемость и разорвет цикл передачи болезни.
Не следует упускать из виду усовершенствование существующих реагентов ТКП, поскольку мы движемся к цели создания новых реагентов для обнаружения ЛТБИ; однако стоит отметить, что метод количественной оценки иммунного ответа весьма субъективен.Вместо измерения диаметра уплотнений в миллиметрах тестируется несколько новых методов. К ним относятся: лазерная допплеровская визуализация у людей (Harrison, et al. , 1993), использование ручного спектрофотометра для измерения реакции ГЗТ (Chambers, et al. , 2002) и ультразвуковое исследование у пациентов ( Ciftci и др. , 2005). Эти альтернативные методы могут применяться для объективного количественного определения TST и могут преодолевать ограничения обычного способа измерения; однако следует учитывать возможность использования дорогостоящих технологий в регионах с ограниченными ресурсами.
В дополнение к улучшению метода измерения для улучшения стандартизации теста, можно улучшить фактический состав депрессора. Определение молекулярного состава PPD в течение многих лет было серьезным препятствием. Длительное нагревание сырого туберкулина для приготовления PPD способствовало денатурации, частичной деградации и агрегации многих белковых компонентов. Многочисленные исследования идентифицировали PPD как смесь очень гетерогенных белков размером от очень больших агрегатов до очень маленьких деградировавших молекул (Klausen, et al ., 1994, Rowland, et al. ., 1999, Ho, et al. , 2006). Точно так же мало было известно о том, какой из этих компонентов в PPD отвечает за реакцию DTH. С недавней идентификацией более ста белков из четырех различных PPD с помощью масс-спектрометрии (Borsuk , et al. , 2009, Cho , et al. , 2012) можно применять новые подходы для определения того, какие из этих компонентов незаконный ответ DTH.
Почти за два десятилетия до публикации молекулярного состава PPD были проведены многочисленные исследования отдельных белков для проверки их способности индуцировать реакцию ГЗТ (Klausen , et al., 1994). Такие исследования по-прежнему имеют решающее значение для оптимизации PPD и понимания того, как он модулирует иммунную систему. Антигены, тестируемые в качестве будущих реагентов PPD, приведены в .
Таблица 2
Антигены в настоящее время под оценкой как следующее поколение PPD кандидаты
, 2004)
Gene Number Antigen Animals Дозировка (мкг) Страна Ссылка
Rv1980c МПТ 64 ГП 0.1 Denmark (Oettinger , et al. , 1995)
RV3875 / RV1980C ESAT-6 / MPT 64 GP 1 Denmark (ELHAY , et al. , 1998)
RV0652 RV0652 Рибосомальный белок L7 / L12 GP 0.2 Япония (Kitaura , et al. , 1999)
RV0061 DPPD GP / Hu 2 (GP) USA (Coler , et al., 2000)
RV3874 CFP10 GP GP 2 USA (Colangeli , et al. , 2000)
RV3875 / RV3874 ESAT-6 / CFP10 GP / CA 1 (GP)
2 (CA) UK (Van Pinxteren , et al. , 2000)
RV3875 ESAT-6 CA 25-400 25-400 Дания (Pollock , et al., 2003)
RV0061
DPPD HU Hu 0.2-5 США (Campos-Neto , et al. , 2001)
RV0061 DPPD GP 5 USA (Liu , et al. , 2004)
RV3875 ESAT-6 GP GP 0.01-1 Дания (Aggerbeck & Madsen, 2006)
Rv3875 ESAT-6 Ху 0.01-1 Нидерланды / Дания (Arend , et al. , 2008)
RV3875 ESAT-6 GP / HU 0,1-1 (GP)
1 (HU) China (WU , et al. , 2008)
RV0934 TPA38 GP / HU 3-5 China (He , et al. , 2007)
Rv0350 ДНК ГП 0.4 USA (Yang, et al. , 2011)
RV0685 GREL2 GP 0.4 USA (Yang, et al. , 2011)
Помимо протеомики, геномика сыграла ключевую роль в идентификации Mtb -специфических антигенов. Геномное сравнение штамма Mtb h47Rv и нескольких вакцинных штаммов M. bovis выявило 129 ORF, уникальных для Mtb , сгруппированных в 16 областях различий (RD) на хромосоме.Оценка и включение белков, кодируемых из этих областей, может играть жизненно важную роль в создании реагентов PPD следующего поколения, более специфичных к Mtb (Mustafa, 2001). Среди этих 16 RD наиболее изученным является RD1; гены, предсказанные в этом сегменте ДНК, удалены из всех вакцинных штаммов БЦЖ, в то время как они сохраняются во всех лабораторных и клинических изолятах M. bovis и Mtb , проверенных до сих пор (Mahairas , et al. , 1996).Двумя кандидатами, специфичными для комплекса Mtb и кодируемыми областью RD1, являются низкомолекулярные секретируемые белки CFP10 и ESAT-6 (Olsen , et al. , 2000, van Pinxteren , et al. , 2000, Brusasca и др. , 2001, Mustafa, 2002, Aagaard и др. , 2004).
ESAT-6 (Rv3875) и CFP10 (Rv3874), хорошо изученные Т-клеточные антигены, отсутствующие в БЦЖ, в настоящее время используются в качестве реагентов для диагностики туберкулеза с помощью анализа высвобождения гамма-интерферона (IGRA) (Mazurek, 2005). , Чанг К.С. и Леунг К.С., 2010).Рекомбинантный ESAT-6 вызывает положительный кожный ответ у инфицированных Mtb морских свинок и людей (Wu, et al. ., 2008). По сравнению с максимальным ответом ГЗТ через 72 часа, индуцированным PPD, ответ ГЗТ на ESAT-6 достиг пика через 24 часа (Pollock , et al. , 2003). Интересно, что комбинация ESAT-6 и CFP10 оказалась высокочувствительной и специфичной по ответу DTH (van Pinxteren , et al. , 2000). CFP10 действует как шаперон и связывается с ESAT-6 в плотном комплексе 1:1, стабилизируя его складчатую структуру (Renshaw , et al., 2002). Исследование рекомбинантного димера ESAT-6 (rdESAT-6), сверхэкспрессированного в Lactococcus lactis , показало, что он может быть успешным диагностическим средством, поскольку он отличает инфекцию Mtb от вакцинации БЦЖ и профили токсичности rdESAT-6 на нескольких животных моделях. утвердили rdESAT-6 как безопасный реагент для ТКП (Aggerbeck & Madsen, 2006). Недавно было завершено двойное слепое рандомизированное исследование фазы I, сравнивающее rdESAT-6 и RT23 у людей. Хотя это исследование показало очень многообещающие результаты в отношении дозировки и безопасности, необходимы дальнейшие исследования, чтобы в достаточной мере продемонстрировать побочные эффекты и эффективность, а также устранить сенсибилизацию (Arend , et al., 2008). Эффективность ESAT-6 и CFP10 в отношении индукции ответов DTH также является предметом споров, поскольку было показано, что они вызывают некротические ответы (Elhay , et al. , 1998).
В аналогичных исследованиях ESAT-6 сочетали со вторым белком культурального фильтрата, MPT64 (Rv1980c). Было показано, что, как и ESAT-6, рекомбинантный MPT64 вызывает ответ DTH у Mtb инфицированных морских свинок. Дальнейшие эксперименты показали, что 15 остатков между аминокислотами Gly-173 и Ala-187 являются ключевыми для вызова реакции ГЗТ (Oettinger , et al., 1995). Животные, подвергшиеся воздействию смеси ESAT-6-MPT64, показали, что эта комбинация имеет потенциал в качестве высокоспецифичного реагента (Elhay , et al. , 1998). В 2007 году сообщалось, что MPT64 находится на стадии III клинических испытаний для оценки его потенциала для замены PPD (Wang , et al. , 2007).
Ген Rv0061 уникален для комплекса Mtb и кодирует белок DPPD, который способен индуцировать сильную реакцию ГЗН у морских свинок, инфицированных Mtb (Coler , et al., 2000). Последующие исследования больных туберкулезом и клинически здоровых людей убедительно свидетельствуют о том, что DPPD является многообещающей альтернативой PPD (Campos-Neto , et al. , 2001, Liu , et al. , 2004). Недавнее исследование подтвердило биологическую активность очищенного рекомбинантного DPPD с использованием мононуклеарных клеток периферической крови от PPD-положительных доноров крови, что указывает на то, что DPPD можно использовать в качестве очищенного антигена для обнаружения туберкулеза (Kashino & Campos-Neto, 2011).
Перспективы и выводы
Несмотря на идентификацию более дюжины белков-кандидатов для включения в реагенты PPD следующего поколения и обнадеживающие предварительные данные исследований на животных и людях, создание нового реагента – одного или нескольких антигенов – для замены PPD остается испытывающий. ТКП, специфичная для выявления исключительно активного или латентного туберкулеза, могла бы принести большую пользу диагностическим и эпидемиологическим программам. Таким образом, необходимо использовать новые стратегии для обнаружения более чувствительных и специфичных антигенов кожных тестов.С другой стороны, один антиген не может эффективно заменить PPD, поскольку для оптимального реагента PPD следующего поколения может потребоваться коктейль антигенов или комбинация нескольких DTH-индуцирующих эпитопов (Oettinger , et al. , 1995). , Лященко , и др. , 1998, Родос , и др. , 2000).
Для достижения этой цели идентификация молекулярного состава PPD облегчает разработку более совершенного реагента. Протеомные исследования выявили высококонсервативные шапероны GroES, GroEL2 и DnaK как три наиболее доминирующих белка, которые могут объяснить положительные свойства и сниженную специфичность PPD (Borsuk , et al., 2009, Чо и др. , 2012). Наша группа недавно идентифицировала два новых препарата, DnaK/GroEL2/Rv0685 и DnaK/GroEL2/Rv0009, которые были способны индуцировать ответы DTH, эквивалентные PPD, в модели Mtb морских свинок (Yang , et al. , 2011). . Лучшее понимание реакции DTH, вызванной этими определенными белками, может способствовать открытию быстрых и чувствительных реагентов для кожных тестов следующего поколения для обнаружения инфекции Mtb .
Благодарности
Эта работа финансировалась в рамках контракта на материалы для испытаний и исследований противотуберкулезной вакцины (HHSN266200400091C) с NIH.
Сноски
Конкурирующие интересы: Не заявлено.
Этическое одобрение: Не требуется.
Ссылки
Aagaard C, Brock I, Olsen A, Ottenhoff TH, Weldingh K, Andersen P. Картирование иммунной реактивности по отношению к Rv2653 и Rv2654: два новых низкомолекулярных антигена, обнаруженных специфически в комплексе Mycobacterium tuberculosis. J заразить Dis. 2004; 189: 812–819. [PubMed] [Google Scholar]
Addo KK, Hof SV, Mensah GI, et al.Опрос туберкулиновых кожных проб среди ганских школьников. Общественное здравоохранение BMC. 2010;10:35. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
Aggerbeck H, Madsen SM. Безопасность ЭСАТ-6. Туберкулез (Эдинб) 2006; 86: 363–373. [PubMed] [Google Scholar]
Аль-Абси А., Бассили А., Абдул Бари Х. и др. Снижение заболеваемости туберкулезом в Йемене: оценка на основе двух общенациональных туберкулиновых обследований. Int J Tuberc Lung Dis. 2009;13:1100–1105. [PubMed] [Google Scholar]
Аренд С.М., Франкен В.П., Аггербек Х. и др.Двойное слепое рандомизированное исследование фазы I, сравнивающее rdESAT-6 с туберкулином в качестве реагента для кожных тестов при диагностике туберкулезной инфекции. Туберкулез (Эдинб) 2008; 88: 249–261. [PubMed] [Google Scholar]
Bachtiar A, Miko TY, Machmud R, et al. Годовой риск заражения туберкулезом в провинции Западная Суматра, Индонезия. Int J Tuberc Lung Dis. 2008; 12: 255–261. [PubMed] [Google Scholar]
Борген К., Костер Б., Мейер Х., Куйвенховен В., ван дер Санде М., Кобеленс Ф. Оценка крупномасштабного расследования контакта с туберкулезом в Нидерландах.Eur Respir J. 2008; 32: 419–425. [PubMed] [Google Scholar]
Борсук С., Ньюкомб Дж., Мендум Т.А., Деллагостин О.А., Макфадден Дж. Идентификация белков из очищенного туберкулином белкового производного (PPD) с помощью ЖХ-МС/МС. Туберкулез (Эдинб) 2009;89:423–430. [PubMed] [Google Scholar]
Ботамли Г.Х., Кэтти Д., Клифтон-Хэдли Р., Гриффин Ф., Хьюинсон Г., Поллок Дж. Иммунодиагностика микобактериальной инфекции. Глава 10. Blackwell Science Ltd; Oxford: 1999. [Google Scholar]
Brusasca PN, Colangeli R, Lyashchenko KP, et al.Иммунологическая характеристика антигенов, кодируемых областью RD1 генома Mycobacterium tuberculosis. Сканд Дж. Иммунол. 2001; 54: 448–452. [PubMed] [Google Scholar]
Campos-Neto A, Rodrigues-Junior V, Pedral-Sampaio DB и др. Оценка DPPD, одного рекомбинантного белка Mycobacterium tuberculosis, в качестве альтернативного антигена для реакции Манту. Туберкулез (Эдинб) 2001;81:353–358. [PubMed] [Google Scholar]
Чадха В.К., Джаганнатха П.С., Вайдьянатан П.С., Джагота П.PPD RT23 для туберкулиновых обследований в Индии. Int J Tuberc Lung Dis. 2003; 7: 172–179. [PubMed] [Google Scholar]
Chambers MA, Jahans K, Whelan A, Hughes C, Sayers R, Perkins A, Glyn Hewinson R. Простое объективное измерение кожной реакции гиперчувствительности замедленного типа на туберкулин с помощью спектрофотометрии. Технология восстановления кожи. 2002; 8: 89–93. [PubMed] [Google Scholar]
Чо Ю.С., Добос К.М., Пренни Дж. и др. Расшифровка протеома реагента для прижизненной диагностики «очищенное белковое производное» микобактерий туберкулеза.Протеомика. 2012; 12: 979–991. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
Ciftci E, Ilgazli A, Gulleroglu B, Ara I, Akansel G. Ультрасонографическое измерение туберкулинового кожного теста: сравнение с ручным чтением. Infect Dis Clin Pract (Baltim Md) 2005; 13:20–23. [Google Scholar]
Colangeli R, Spencer JS, Bifani P, et al. MTSA-10, продукт гена Rv3874 Mycobacterium tuberculosis, вызывает туберкулёзную гиперчувствительность замедленного типа у морских свинок. Заразить иммун.2000;68:990–993. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
Coler RN, Skeiky YA, Ovendale PJ, et al. Клонирование гена Mycobacterium tuberculosis, кодирующего очищенный белковый производный белок, который вызывает сильную туберкулёзную специфическую гиперчувствительность замедленного типа. J заразить Dis. 2000; 182: 224–233. [PubMed] [Google Scholar]
Comstock GW, Edwards LB, Philip RN, Winn WA. Сравнение в Соединенных Штатах Америки двух туберкулинов, Ppd-S и Rt 23. Bull World Health Organ.1964; 31: 161–170. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
Dye C, Scheele S, Dolin P, Pathania V, Raviglione MC. Заявление о консенсусе. Глобальное бремя туберкулеза: оценка заболеваемости, распространенности и смертности по странам. Глобальный проект ВОЗ по эпиднадзору и мониторингу. ДЖАМА. 1999; 282: 677–686. [PubMed] [Google Scholar]
Edwards PQ, Edwads LB. История туберкулиновой пробы с эпидемиологической точки зрения. Ам преподобный Респир Дис. 1960; 81 (1 часть 2): 1–47. [PubMed] [Google Scholar]
Elhay MJ, Oettinger T, Andersen P.Реакция гиперчувствительности замедленного типа на ESAT-6 и MPT64 от Mycobacterium tuberculosis у морской свинки. Заразить иммун. 1998;66:3454–3456. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
Farhat M, Greenaway C, Pai M, Menzies D. Ложноположительные туберкулиновые кожные пробы: каков абсолютный эффект БЦЖ и нетуберкулезных микобактерий? Int J Tuberc Lung Dis. 2006; 10:1192–1204. [PubMed] [Google Scholar]
Фернандес-Вильяр А., Горис А., Отеро М., Чусино Н., Васкес Р., Муньос М.Дж., Пинейро Л.Консервация очищенного белкового производного туберкулина РТ-23. Арка Бронконемол. 2004;40:301–303. [PubMed] [Google Scholar]
Gillenwater KA, Sapp SC, Pearce K, Siberry GK. Увеличение числа конвертеров туберкулиновых кожных проб среди медицинских работников после перехода с туберсола на аплисол. Am J Infect Control. 2006; 34: 651–654. [PubMed] [Google Scholar]
Guld J, Bentzon MW, Bleiker MA, Griep WA, Magnusson M, Waaler H. Стандартизация новой партии очищенного туберкулина (PPD), предназначенного для международного использования.Всемирный орган здравоохранения Быка. 1958; 19: 845–951. [Статья бесплатно PMC] [PubMed] [Google Scholar]
Hanifa Y, Grant AD, Lewis J, Corbett EL, Fielding K, Churchyard G. Распространенность латентной туберкулезной инфекции среди золотодобытчиков в Южной Африке. Int J Tuberc Lung Dis. 2009; 13:39–46. [PubMed] [Google Scholar]
Хансен О.Г., Линдквист К., Валер Х. Оценка эффективности туберкулина у людей и морских свинок. Всемирный орган здравоохранения Быка. 1964; 31: 171–182. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
Harrison DK, Abbot NC, Beck JS, McCollum PT.Предварительная оценка лазерной допплеровской визуализации перфузии кожи человека с использованием туберкулиновой реакции в качестве модели. Физиол Изм. 1993; 14: 241–252. [PubMed] [Google Scholar]
He XY, Luo YA, Zhang XG и др. Клиническая оценка рекомбинантного белка 38 кДа Mycobacterium tuberculosis. Scand J Infect Dis. 2007: 1–6. [PubMed] [Google Scholar]
Ho MM, Kairo SK, Corbel MJ. Иммуноанализ очищенных белковых производных туберкулина (PPD) в качестве альтернативного анализа in vitro для идентификации и подтверждения активности.Гум Вакцина. 2006; 2:29–33. [PubMed] [Google Scholar]
Дженсен П.А., Ламберт Л.А., Ядемарко М.Ф., Ридзон Р. Руководство по предотвращению передачи микобактерий туберкулеза в медицинских учреждениях, 2005 г. MMWR Recomm Rep. 2005; 54:1–141. [PubMed] [Google Scholar]
Кимура М., Комсток Г.В., Мори Т. Сравнение эритемы и уплотнения по результатам туберкулиновых тестов. Int J Tuberc Lung Dis. 2005; 9: 853–857. [PubMed] [Google Scholar]
Kitaura H, Kinomoto M, Yamada T. Рибосомальный белок L7, включенный в состав очищенного белкового производного туберкулина (PPD), является основным термоустойчивым белком, вызывающим сильную гиперчувствительность замедленного типа.Сканд Дж. Иммунол. 1999; 50: 580–587. [PubMed] [Google Scholar]
Клаузен Дж., Магнуссон М., Андерсен А.Б., Кох С. Характеристика очищенного белкового производного туберкулина с использованием моноклональных антител: выделение реактивного компонента гиперчувствительности замедленного типа из культурального фильтрата M.tuberculosis. Сканд Дж. Иммунол. 1994;40:345–349. [PubMed] [Google Scholar]
Kritzinger FE, den Boon S, Verver S, et al. Отсутствие снижения годового риска заражения туберкулезом в эндемичных районах Кейптауна, Южная Африка.Троп Мед Int Health. 2009; 14:136–142. [PubMed] [Google Scholar]
Li J, Munsiff SS, Agerton TB. Распространенность положительных результатов туберкулиновых кожных проб среди клинического населения в Нью-Йорке. J Immigr Minor Health 2008 [PubMed] [Google Scholar]
Liu C, Flamoe E, Chen HJ, Carter D, Reed SG, Campos-Neto A. Экспрессия и очистка иммунологически реактивного DPPD, рекомбинантного антигена кожного теста Mycobacterium tuberculosis, с использованием клеток-хозяев Mycobacterium smegmatis и Escherichia coli.Может J Microbiol. 2004; 50:97–105. [PubMed] [Google Scholar]
Лопес Л.К., Телес С.А., Соуза А.С., Рабахи М.Ф., Типпл А.Ф. Риск туберкулеза среди медсестер из Центральной Бразилии. Am J Infect Control. 2008; 36: 148–151. [PubMed] [Google Scholar]
Лященко К., Манка С., Коланджели Р., Хейбель А., Уильямс А., Дженнаро М.Л. Использование коктейлей специфических антигенов комплекса микобактерий туберкулеза для кожных тестов, специфичных для туберкулеза. Заразить иммун. 1998;66:3606–3610. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
Mackin LA.Скрининг на туберкулез в учреждениях первичной медико-санитарной помощи. Lippincotts Prim Care Pract. 1998; 2: 599–610. викторина 611–593. [PubMed] [Google Scholar]
Maes M, Gimenez JF, D’Alessandro A, De Waard JH. Стабильность человеческого, бычьего и птичьего очищенного белкового производного туберкулина (PPD) J Infect Dev Ctries. 2011;5:781–785. [PubMed] [Google Scholar]
Mahairas GG, Sabo PJ, Hickey MJ, Singh DC, Stover CK. Молекулярный анализ генетических различий между Mycobacterium bovis BCG и вирулентными M.крупный рогатый скот J Бактериол. 1996; 178:1274–1282. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
Masucci P, McAlpine KL. Биохимические исследования бактериальных производных. X. Получение белка туберкулезной палочки человека МА-100. Proc Soc Exp Biol Med. 1930; 27: 661–663. [Google Scholar]
Мехта С.Р., МакГрудер С., Луни Д., Джонс С., Смит Д.М. Различия в туберкулиновой реактивности, установленной в программе обследования здоровья сотрудников администрации ветеранов. Клин Вакцина Иммунол. 2009; 16: 541–543.[Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
Мустафа А.С. Биотехнология в разработке новых вакцин и диагностических реагентов против туберкулеза. Карр Фарм Биотехнолог. 2001; 2: 157–173. [PubMed] [Google Scholar]
Мустафа А.С. Разработка новых вакцин и диагностических реагентов против туберкулеза. Мол Иммунол. 2002; 39: 113–119. [PubMed] [Google Scholar]
Эттингер Т., Холм А., Мтони И.М., Андерсен А.Б., Хаслоов К. Картирование эпитопа секретируемого белка MPT64 Mycobacterium tuberculosis, вызывающего гиперчувствительность замедленного типа.Заразить иммун. 1995;63:4613–4618. [Статья бесплатно PMC] [PubMed] [Google Scholar]
Olsen AW, Hansen PR, Holm A, Andersen P. Эффективная защита от Mycobacterium tuberculosis путем вакцинации одним субдоминантным эпитопом антигена ESAT-6. Евр Дж Иммунол. 2000;30:1724–1732. [PubMed] [Google Scholar]
Pollock JM, McNair J, Bassett H, et al. Специфические реакции гиперчувствительности замедленного типа на ESAT-6 идентифицируют крупный рогатый скот, инфицированный туберкулезом. Дж. Клин Микробиол. 2003; 41: 1856–1860.[Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
Rangel-Frausto MS, Ponce-De-Leon-Rosales S, Martinez-Abaroa C, Haslov K. Туберкулез и качество туберкулина: лучшие намерения, вводящие в заблуждение результаты. Infect Control Hosp Epidemiol. 2001; 22: 481–484. [PubMed] [Google Scholar]
Рао В.Г., Гопи П.Г., Ядав Р. и др. Ежегодный риск заражения туберкулезом среди племенного населения центральной Индии. Троп Мед Int Health. 2008; 13:1372–1377. [PubMed] [Google Scholar]
Renshaw PS, Panagiotidou P, Whelan A, Gordon SV, Hewinson RG, Williamson RA, Carr MD.Убедительные доказательства того, что основные Т-клеточные антигены комплекса Mycobacterium tuberculosis ESAT-6 и CFP-10 образуют плотный комплекс 1:1, и характеристика структурных свойств ESAT-6, CFP-10 и ESAT-6* Комплекс КФП-10. Значение для патогенеза и вирулентности. Дж. Биол. Хим. 2002; 277:21598–21603. [PubMed] [Google Scholar]
Rhodes SG, Gavier-Widen D, Buddle BM, Whelan AO, Singh M, Hewinson RG, Vordermeier HM. Антигенная специфичность при экспериментальном туберкулезе крупного рогатого скота. Заразить иммун.2000;68:2573–2578. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
Rowland SS, Ruckert JL, Cummings PJ. Белковые структуры с низкой молекулярной массой в фильтратах культур микобактерий и очищенных белковых производных. FEMS Immunol Med Microbiol. 1999; 23:21–25. [PubMed] [Google Scholar]
Sbarbaro JA. Антигены кожных тестов: оценка, время которой пришло. Ам преподобный Респир Дис. 1978; 118:1–5. [PubMed] [Google Scholar]
Schiller I, Vordermeier HM, Waters WR, et al. Сравнение активности туберкулина с использованием гамма-интерферона для диагностики туберкулеза крупного рогатого скота.Ветеринар Рек. 2010; 167:322–326. [PubMed] [Google Scholar]
Seibert FB. Выделение и свойства очищенного белкового производного туберкулина. Ам преподобный Туберк. 1934; 30: 713–720. [Google Scholar]
Seibert FB, Glen JT. PPD-S состоял примерно из 92,1% белка, 5,9% полисахаридов и 1,2% нуклеиновой кислоты. Ам преподобный Туберк. 1941; 44: 9–24. [Google Scholar]
Sgountzos V, Simopoulou S, Kretsou S, Sakayianni K, Pavlerou S, Gourgoulianis K, Grigorakos L. Сравнительное исследование RT23 и туберкулина Мерье, протестированных на здоровых добровольцах.Int J Tuberc Lung Dis. 2009; 13:312–316. [PubMed] [Google Scholar]
Shigeto E. [Очищенные белковые производные, полученные из Mycobacterium tuberculosis (PPD) и M. intracellulare (PPD-B) в дифференциальной диагностике микобактериозов] Kekkaku. 1990; 65: 701–709. [PubMed] [Google Scholar]
Шингадия Д., Новелли В. Туберкулиновая кожная проба: сто, а не выход? Арч Дис Чайлд. 2008; 93: 189–190. [PubMed] [Google Scholar]
Shrestha KB, Malla P, Jha KK, Shakya TM, Akhtar M, Gunneberg C, van der Werf MJ.Первое национальное туберкулиновое обследование в Непале. Int J Tuberc Lung Dis. 2008; 12: 909–915. [PubMed] [Google Scholar]
Teixeira L, Maciel E, Dutra ME, Perkins MD, Johnson JL, do Valle Dettoni V. Одновременное сравнение реактивности очищенного белкового производного RT-23 и туберсола у медицинских работников в Витории, Бразилия . Int J Tuberc Lung Dis. 2000;4:1074–1077. [PubMed] [Google Scholar]
Turk JL. Фон Пирке, аллергия и инфекционные заболевания: обзор. JR Soc Med. 1987; 80: 31–33.[Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
Ulea I, Murgoci G, Popa ML, Popa L, Stavri H. Сравнительное исследование туберкулинов RT23 и IC-65, испытанных на детях с туберкулезом. Роум Арч Микробиол Иммунол. 2010;69:75–78. [PubMed] [Google Scholar]
Ван Пинкстерен Л.А., Равн П., Аггер Э.М., Поллок Дж., Андерсен П. Диагностика туберкулеза на основе двух специфических антигенов ESAT-6 и CFP10. Клин Диагн Лаб Иммунол. 2000;7:155–160. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
Vashishtha VM, John TJ.Распространенность инфекции Mycobacterium tuberculosis у детей в Западном Уттар-Прадеше. Индийский педиатр. 2010;47:97–100. [PubMed] [Google Scholar]
Villarino ME, Burman W, Wang YC, et al. Сопоставимая специфичность двух коммерческих туберкулиновых реагентов у лиц с низким риском туберкулезной инфекции. ДЖАМА. 1999; 281:169–171. [PubMed] [Google Scholar]
Villarino ME, Brennan MJ, Nolan CM, et al. Сравнительное тестирование действующих (PPD-S1) и предложенных (PPD-S2) эталонных стандартов туберкулина.Am J Respir Crit Care Med. 2000; 161:1167–1171. [PubMed] [Google Scholar]
Wang Z, Potter BM, Gray AM, Sacksteder KA, Geisbrecht BV, Laity JH. Структура раствора антигена MPT64 Mycobacterium tuberculosis определяет новое семейство белков бета-захвата. Дж Мол Биол. 2007; 366: 375–381. [PubMed] [Google Scholar]
ВОЗ. Доклад Всемирной организации здравоохранения за 2011 г. 2011 г. Глобальная борьба с туберкулезом. [Google Scholar]
Wu X, Zhang L, Zhang J, Zhang C, Zhu L, Shi Y. Рекомбинантный белок-мишень 6 раннего секретируемого антигена в качестве антигена кожного теста для специфического выявления инфекции Mycobacterium tuberculosis.Клин Эксп Иммунол. 2008; 152:81–87. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
Yang HL, Troudt J, Grover A, et al. Три белковых коктейля опосредуют ответы ГЗТ, неотличимые от PPD в модели Mycobacterium tuberculosis на морских свинках. Infect Immun 2011 [бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
Очищенные белковые производные туберкулина
FEMS Immunol Med Microbiol. Авторская рукопись; Доступен в PMC 2013 декабря 1.
Опубликовано в окончательной редактированной форме AS:
PMCID: PMC34
NIHMSID: NIHMMS3
Государственный университет Колорадо, Департамент микробиологии, иммунологии и патологии, Форт-Коллинз, Colorado 80523
^* Автор, ответственный за переписку: Карен М.Добос, почтовый адрес: 1682 Campus Delivery, кафедра микробиологии, иммунологии и патологии; Университет штата Колорадо, Форт. Collins, CO 80523-1682, тел.: 970-491-6549, [email protected] См. другие статьи в PMC, в которых цитируется опубликованная статья.
Abstract
Туберкулиновая кожная проба, которая включает мониторинг иммунной реакции на инъекцию очищенного производного белка (PPD), была наиболее широко используемым методом для выявления инфекции Mycobacterium tuberculosis с момента ее разработки в 1930-х годах.До недавнего времени молекулярный состав PPD был неизвестен. Это помешало открытию улучшенных реагентов для кожных тестов и резко затруднило усилия по определению механизма действия. Протеомная оценка PPD в сочетании с подробным анализом на модели туберкулеза морской свинки привела к дальнейшему определению молекулярного состава PPD. В этом сообщении рассматривается история и текущее состояние PPD, в дополнение к описанию реагентов-кандидатов PPD следующего поколения, основанных на использовании отдельного белка или белковых коктейлей.
Ключевые слова: Туберкулез, Очищенный белковый производный, Туберкулиновая кожная проба, Диагностика причем большинство этих трагических событий произошло в развивающихся странах (ВОЗ, 2011 г.). Его тяжесть усугубляется способностью Mycobacterium tuberculosis ( Mtb ), возбудителя туберкулеза, сохраняться в виде персистирующей бессимптомной инфекции, называемой латентной туберкулезной инфекцией (ЛТБИ).В течение почти столетия лица, инфицированные Mtb , выявлялись с помощью туберкулиновой кожной пробы (ТКП). В 1890 году Роберт Кох предположил, что глицериновый экстракт туберкулезных бацилл может как лечить, так и предотвращать туберкулез. Хотя «Старый туберкулин» Коха в конечном итоге потерпел неудачу в качестве терапии, его открытия стали катализатором разработки современной ТКП, наиболее важного инструмента для выявления потенциальных случаев ТБ на сегодняшний день (Shingadia & Novelli, 2008).
ТКП также известна как проба Манту в честь французского врача Шарля Манту (1877–1947), который установил диагностические критерии для чтения ТКП.Метод Манту, одобренный Американским торакальным обществом и Центрами по контролю и профилактике заболеваний (CDC), в настоящее время является золотым стандартом для определения того, инфицирован ли человек Mtb. Этот иммунологический тест состоит из двух частей. Сначала реагент очищенного производного белка (PPD) вводят внутрикожно в предплечье. Во-вторых, реакцию гиперчувствительности замедленного типа (ГЗТ) отслеживают через 48-72 часа после инъекции путем измерения диаметра уплотнения (отека из-за воспаления) в миллиметрах в месте инъекции.Обычным явлением является визуализация эритемы (покраснения) в течение первых 24 часов после введения PPD; это не следует измерять, так как это не указывает на инфекцию. Проведение и чтение результатов этого теста должны выполняться обученными медицинскими работниками, которые могут интерпретировать факторы риска наряду с измерением при определении положительной реакции (Mackin, 1998).
Помимо своей роли индикатора инфекции Mtb , ТКП также используется в качестве эпидемиологического инструмента для оценки распространенности латентной туберкулезной инфекции (ЛТБИ).Прогноз о том, что одна треть населения мира инфицирована Mtb , частично основан на частоте положительной ТКП (Dye , et al. , 1999).
В текущем обзоре мы представляем обзор истории, развития и текущего использования PPD. Кроме того, будут рассмотрены исследования, направленные на определение ключевых молекулярных компонентов PPD и его биологической активности.
Прошлое и настоящее использование PPD
Первая кожная туберкулиновая проба была введена в 1907 г. фон Пирке (1874–1929), австрийским ученым и педиатром (Turk, 1987).В его исследовании использовалась ОТ Коха, нагретый бульон, состоящий из неочищенной неопределенной смеси белков и других макромолекул, полученных из туберкулезной палочки. OT Коха готовили из концентрированного фильтрата глицерино-пептонного бульона, в котором Mtb росли в течение 6–8 недель. OT Koch и аналогичные продукты не используются в качестве реагентов для ТКП в США из-за недостаточной чистоты, различий в эффективности и специфичности, а также из-за недостаточной стандартизации.
В 1930 г. из фильтрата культуры Mtb был получен альтернативный состав, известный как MA-100, в виде состава, не содержащего полисахаридов (Masucci & McAlpine, 1930).Было обнаружено, что МА-100 значительно более эффективен, чем ОТ Коха; однако его использование в качестве стандартного диагностического реагента было ограничено — в основном из-за сенсибилизирующего действия, наблюдаемого при повторных инъекциях в кожу.
В 1934 году Флоренс Б. Зайберт (1897–1991), биохимик из Института Генри Фиппса Пенсильванского университета, разработала более стабильный и последовательный препарат (Seibert, 1934). Первоначально обозначенный по способу его производства, SOTT, аббревиатура от «синтетический средний преципитат туберкулина трихлоруксусной кислоты», этот продукт позже был назван очищенным белковым производным или PPD.Его получали пропариванием культур Mtb в стерилизаторе Arnold и очисткой белков повторным осаждением сульфатом аммония (Seibert & Glen, 1941). По сравнению с предыдущими туберкулиновыми реагентами, в этом методе приготовления PPD было значительно снижено содержание полисахаридов, нуклеиновых кислот и липидов, и, таким образом, это был реагент, богатый белком. В 1944 году большая партия этого улучшенного PPD (партия 49608), переименованного в PPD-S (PPD-Standard), была предоставлена в качестве эталонного продукта в Соединенных Штатах.PPD-S состоял примерно из 92,9% белка, 5,9% полисахаридов и 1,2% нуклеиновой кислоты (Seibert & Glen, 1941). Из-за повышенной чистоты и активности PPD-S был принят Всемирной организацией здравоохранения (ВОЗ) в качестве международного стандарта туберкулина в 1952 г. (Guld , et al. , 1958). С 1978 г. Управление по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов (FDA) потребовало, чтобы все партии PPD были квалифицированы биологическим анализом и должны демонстрировать активность, эквивалентную активности PPD-S (Sbarbaro, 1978). Международная единица (МЕ) для PPD была определена как часть этого эффекта; одна МЕ равна биологической активности, содержащейся в 0.028 мкг PPD-S (0,02 мкг PPD с 0,008 мкг солей). Однако в США и Канаде эффективность PPD выражается в туберкулиновых единицах (TU), а не в IU. Одна TU определяется как 0,02 мкг PPD-S (Edwards & Edwads, 1960). Пять ТЕ являются стандартной дозой для внутрикожного диагностического применения, как определено в эпидемиологических исследованиях (Bothamley, и др., , 1999).
PPD-S2, текущий стандарт США на туберкулин PPD, был разработан в ожидании возможного истощения PPD-S (Villarino, et al ., 2000). В настоящее время Aplisol ^® (JHP Pharmaceuticals, Inc, Рочестер, Мичиган) и Tubersol ^® (Sanofi Pasteur Limited, Swiftwater, PA) являются двумя широко используемыми коммерчески доступными продуктами PPD-S2 (Jensen, et al. ). , 2005). Результаты кожных испытаний с Aplisol ^® и Tubersol ^® вполне сравнимы с результатами оригинального стандарта PPD, PPD-S (Villarino, et al. ., 1999). Однако переход от Tubersol ^® к Aplisol ^® или наоборот привел к отклонениям в кожных тестах, хотя точная причина до сих пор неясна (Gillenwater, et al ., 2006, Мехта, и др. , 2009).
Помимо PPD-S, за пределами США и Канады используется несколько других составов PPD (Li , et al. , 2008). Некоторые из этих туберкулиновых продуктов, включая PPD RT23, производятся Государственным институтом сывороток (SSI) (Comstock, и др., , 1964). В настоящее время ВОЗ и Международный союз по борьбе с туберкулезом и заболеваниями легких (IUATLD) рекомендуют 2 ТЕ PPD-RT23 с твином 80. RT23 является наиболее широко используемым продуктом PPD во всем мире (Rangel-Frausto, и др. ., 2001). Несколько исследований по всему миру использовали PPD RT23 для оценки распространенности инфекции туберкулезной палочкой, включая Индию (Rao , et al. , 2008), (Vashishtha & John, 2010), Гану (Addo , et al. 2010), Йемен (Аль-Абси, и др. , 2009), Южная Африка (Критцингер, и др. , 2009) (Ханифа, и др. , 2009), Непал (Шреста, et , 2008), Бразилии (Lopes, и др. , 2008) и Индонезии (Bachtiar, и др. )., 2008). Кроме того, он также использовался для оценки крупномасштабных контактов с больными туберкулезом в Нидерландах (Borgen, et al. , 2008).
В дополнение к вышеупомянутым продуктам PPD также используются другие варианты PPD, такие как PPD RT23 Mexico (Laboratorio Nacional de Salud, Secretaria de Salud, Мехико, Мексика), продукт PPD, используемый в Латинской Америке (Rangel-Frausto , и др. , 2001), и японский продукт PPD-s. (Кимура, и др., 2005 ). Многочисленные продукты PPD, используемые в настоящее время, перечислены в .
Таблица 1
Препараты PPD, используемые в настоящее время для лечения людей
PPD S2 (APLisol ^®) JHP Pharmaceuticals, Inc, Rochester, Mi, USA 5 TU (Villarino , et al. , 1999) PPD S2 (Tubersol ^®) Санофи Пастер Лимитед, Свифтуотер, Пенсильвания, США 5 ТУ (Вилларино , и др., 1999, Teixeira и др. , 2000, Rangel-Frausto и др. , 2001) PPD RT23 SSI Statens SSI Статус институт сыворотки, Копенгаген, Дания 2 TU (Maes , et al. , 2011, Teixeira , et al. , 2000) PPD RT23 Мексика Laboratorio Nacional de Salud, Секретария де Салюд, Мехико, Мексика 2 TU (Rangel-Frusto , et al. , 2001) PPD RT23 (Evans PPD) Селлтек Фарма С.А., Мадрид, Испания 2 TU (Fernandez-Villar , et al. , 2004) PPD-S Nihon BCG Seizo Co., Токио, Япония 3 TU ( Shigeto, 1990) PPD IC-65 PPD IC-65 Cantacuzino Институт, Бухарест, Румыния 2 TU (Ulea , et al. 2010)
Так как есть несколько производителей PPD важно оценить различия в эффективности этих продуктов PPD.Из-за ограниченных знаний о точном составе каждого продукта PPD невозможно использовать традиционные методы контроля качества для сравнения препаратов PPD. Поэтому сравнения с использованием животных, инфицированных микобактериями, проводятся для оценки биологической активности продуктов PPD. При этом продукты PPD должны вводиться в тех же условиях, в которых они будут использоваться в клинических условиях (Hansen , et al. , 1964).
Первое опубликованное сравнение эффективности PPD было проведено между PPD-S и PPD-RT23.Исследование, проведенное среди 6 групп населения в США, включая детей-эскимосов, больных туберкулезом и новобранцев в учебных центрах ВМС США, показало, что 2,5 ТЕ PPD-RT23, содержащего твин 80, обладают эффективностью, аналогичной 5 ТЕ PPD-S. (Комсток , и др. , 1964). Совсем недавно исследование 69 больных туберкулезом и 1189 субъектов с низким риском в США сравнило PPD-S2 с PPD-S1. Было обнаружено, что эти два продукта статистически неразличимы у больных туберкулезом. Кроме того, такая же высокая специфичность наблюдалась среди субъектов с низким риском.Это исследование показало, что PPD-S2 функционально эквивалентен PPD-S1 и может легко заменить его (Villarino , et al. , 2000). Многочисленные исследования сравнивали активность RT23, полученного в SSI, с другими источниками PPD, включая IC-65, и среди них была обнаружена эквивалентная эффективность (Ulea , et al. , 2010), (Chadha , et al. , 2003), (Шиллер и др. 2010). Однако аналогичное исследование в Мексике сравнило эффективность местного производства PPD RT23 (Мексика), Tubersol ^® и PPD RT23 (SSI) и выявило, что из трех, RT23 (Мексика) имел гораздо более низкую чувствительность (Rangel- Фраусто и др., 2001). RT23 и туберкулин Merieux (разработанный в Pasteur-Merieux) также недавно сравнивали по их относительной активности. Оба препарата были получены из нескольких штаммов микобактерий (RT23 был получен из семи штаммов Mtb , Merieux был получен из трех штаммов Mtb, плюс M. bovis ) и, по-видимому, обладают биологической активностью, эквивалентной PPD-S. , который является продуктом одного штамма. Однако RT23 часто вызывает более сильную антигенную реакцию, чем препарат Мерье (Sgountzos, et al., 2009). Недавно Schiller et al. сравнили диагностическую надежность PPD из разных источников с помощью инновационного подхода к мониторингу ответов интерферона-γ в культурах цельной крови (Schiller , et al. 2010). В этом исследовании образцы цельной крови стимулировали несколькими различными туберкулинами, и через 24 часа после стимуляции отслеживали реакцию IFN-γ. Их результаты подтверждают, что существуют значительные различия между депрессорами из разных источников, и указывают на необходимость дальнейшей стандартизации продуктов депрессоров.Была введена количественная шкала, обозначенная как RP30 (относительная активность 30), определяемая как концентрация белка, при которой конкретный препарат PPD имеет 30% максимальной активности. RP30 можно использовать в качестве инструмента для быстрого сравнения биологической активности партий и источников PPD. Хотя в этих отчетах подчеркивается важность оценки биологической активности продуктов PPD из разных источников, расхождения в эффективности трудно объяснить из-за сложности и неоднозначности молекулярного состава PPD.Протеомная характеристика PPD была описана нашей лабораторией (Cho, et al. , 2012) и другими (Borsuk , et al. , 2009), демонстрируя, что PPD состоит из сотен различных белков. Дополнительный сравнительный протеомный, биологический и гистологический анализы использовались для измерения относительных различий в молекулярном составе и биологической активности между PPD-S2, RT23 и PPD-KIT (PPD Корейского технологического института) (Cho, et al ., 2012). Это исследование продемонстрировало, что, хотя все 3 препарата PPD были неразличимы по своей способности индуцировать ответ ГЗТ, были очевидны гистологические различия и различия в относительном количестве нескольких белков, включая членов семейства белков Esx, что позволяет предположить корреляцию между повышенной гистопатологией и повышенная концентрация белков Esx в PPD (Cho, et al ., 2012). В совокупности все эти сравнительные отчеты иллюстрируют сложность PPD и проблемы, связанные с созданием стандартизированного реагента.
Подводные камни PPD
Несмотря на то, что в прошлом столетии ТКП была стандартом для выявления лиц, подверженных риску активного ТБ, она имеет несколько фундаментальных недостатков, которые служат стимулом для разработки более стандартизированной методологии и более эффективных инструментов для выявления ЛТБИ. Основной проблемой текущего теста является высокий уровень ложноположительных результатов, вызванный неспособностью TST отличить инфекцию Mtb от воздействия нетуберкулезных микобактерий или вакцинации M.bovis Bacille Calmett-Guérin (BCG) (Huebner, и др. , 1993). Оба случая ложноположительных ответов обычно приписывают иммунному ответу, запускаемому гомологичными антигенами либо при вакцинации БЦЖ, либо от микобактерий из окружающей среды (Harboe, 1981, Huebner, и др., , 1993). Эти предположения были недавно подтверждены молекулярным анализом PPD, показывающим, что четыре белка теплового шока (GroEl, GroEs, DnaK и HspX) составляют примерно 60% протеомного содержания PPD (Cho, et al ., 2012, Борсук и др. , 2009). Эти белки-шапероны обладают высокой гомологией (более 70%) и консервативны среди большинства видов микобактерий (Cho, et al. ., 2012, Borsuk , et al. , 2009). Это усложняет использование ТКП в качестве инструмента как для эпидемиологических исследований, так и для выявления лиц, инфицированных Mtb , из-за потенциальной перекрестной реактивности от вакцинации БЦЖ или инфицирования нетуберкулезными микобактериями. Ложноотрицательные результаты также проблематичны, особенно у детей и лиц с ослабленным иммунитетом (Farhat, и др., )., 2006 г., Шингадия и Новелли, 2008 г.). Это связано с тем, что положительный PPD требует эффективного ответа DTH. Поэтому вполне вероятно, что PPD не может служить индикатором инфекции Mtb в тех популяциях, где отсутствует надежный Т-клеточный иммунитет. Наконец, хотя ТКП можно использовать для выявления ЛТБИ, он не позволяет провести различие между этим заболеванием, активным заболеванием или выздоравливающим пациентом. Несмотря на эти подводные камни, TST остается наиболее часто используемым инструментом для обнаружения инфекции Mtb .
Будущее PPD – открытие и разработка PPD следующего поколения
Разработка новых и более эффективных реагентов для выявления ЛТБИ является ключом к успеху в борьбе с туберкулезом. Улучшенное обнаружение латентных бацилл приведет к стратегиям раннего вмешательства и, вероятно, снизит заболеваемость и разорвет цикл передачи болезни.
Не следует упускать из виду усовершенствование существующих реагентов ТКП, поскольку мы движемся к цели создания новых реагентов для обнаружения ЛТБИ; однако стоит отметить, что метод количественной оценки иммунного ответа весьма субъективен.Вместо измерения диаметра уплотнений в миллиметрах тестируется несколько новых методов. К ним относятся: лазерная допплеровская визуализация у людей (Harrison, et al. , 1993), использование ручного спектрофотометра для измерения реакции ГЗТ (Chambers, et al. , 2002) и ультразвуковое исследование у пациентов ( Ciftci и др. , 2005). Эти альтернативные методы могут применяться для объективного количественного определения TST и могут преодолевать ограничения обычного способа измерения; однако следует учитывать возможность использования дорогостоящих технологий в регионах с ограниченными ресурсами.
В дополнение к улучшению метода измерения для улучшения стандартизации теста, можно улучшить фактический состав депрессора. Определение молекулярного состава PPD в течение многих лет было серьезным препятствием. Длительное нагревание сырого туберкулина для приготовления PPD способствовало денатурации, частичной деградации и агрегации многих белковых компонентов. Многочисленные исследования идентифицировали PPD как смесь очень гетерогенных белков размером от очень больших агрегатов до очень маленьких деградировавших молекул (Klausen, et al ., 1994, Rowland, et al. ., 1999, Ho, et al. , 2006). Точно так же мало было известно о том, какой из этих компонентов в PPD отвечает за реакцию DTH. С недавней идентификацией более ста белков из четырех различных PPD с помощью масс-спектрометрии (Borsuk , et al. , 2009, Cho , et al. , 2012) можно применять новые подходы для определения того, какие из этих компонентов незаконный ответ DTH.
Почти за два десятилетия до публикации молекулярного состава PPD были проведены многочисленные исследования отдельных белков для проверки их способности индуцировать реакцию ГЗТ (Klausen , et al., 1994). Такие исследования по-прежнему имеют решающее значение для оптимизации PPD и понимания того, как он модулирует иммунную систему. Антигены, тестируемые в качестве будущих реагентов PPD, приведены в .
Таблица 2
Антигены в настоящее время под оценкой как следующее поколение PPD кандидаты
, 2004)
Gene Number Antigen Animals Дозировка (мкг) Страна Ссылка
Rv1980c МПТ 64 ГП 0.1 Denmark (Oettinger , et al. , 1995)
RV3875 / RV1980C ESAT-6 / MPT 64 GP 1 Denmark (ELHAY , et al. , 1998)
RV0652 RV0652 Рибосомальный белок L7 / L12 GP 0.2 Япония (Kitaura , et al. , 1999)
RV0061 DPPD GP / Hu 2 (GP) USA (Coler , et al., 2000)
RV3874 CFP10 GP GP 2 USA (Colangeli , et al. , 2000)
RV3875 / RV3874 ESAT-6 / CFP10 GP / CA 1 (GP)
2 (CA) UK (Van Pinxteren , et al. , 2000)
RV3875 ESAT-6 CA 25-400 25-400 Дания (Pollock , et al., 2003)
RV0061
DPPD HU Hu 0.2-5 США (Campos-Neto , et al. , 2001)
RV0061 DPPD GP 5 USA (Liu , et al. , 2004)
RV3875 ESAT-6 GP GP 0.01-1 Дания (Aggerbeck & Madsen, 2006)
Rv3875 ESAT-6 Ху 0.01-1 Нидерланды / Дания (Arend , et al. , 2008)
RV3875 ESAT-6 GP / HU 0,1-1 (GP)
1 (HU) China (WU , et al. , 2008)
RV0934 TPA38 GP / HU 3-5 China (He , et al. , 2007)
Rv0350 ДНК ГП 0.4 USA (Yang, et al. , 2011)
RV0685 GREL2 GP 0.4 USA (Yang, et al. , 2011)
Помимо протеомики, геномика сыграла ключевую роль в идентификации Mtb -специфических антигенов. Геномное сравнение штамма Mtb h47Rv и нескольких вакцинных штаммов M. bovis выявило 129 ORF, уникальных для Mtb , сгруппированных в 16 областях различий (RD) на хромосоме.Оценка и включение белков, кодируемых из этих областей, может играть жизненно важную роль в создании реагентов PPD следующего поколения, более специфичных к Mtb (Mustafa, 2001). Среди этих 16 RD наиболее изученным является RD1; гены, предсказанные в этом сегменте ДНК, удалены из всех вакцинных штаммов БЦЖ, в то время как они сохраняются во всех лабораторных и клинических изолятах M. bovis и Mtb , проверенных до сих пор (Mahairas , et al. , 1996).Двумя кандидатами, специфичными для комплекса Mtb и кодируемыми областью RD1, являются низкомолекулярные секретируемые белки CFP10 и ESAT-6 (Olsen , et al. , 2000, van Pinxteren , et al. , 2000, Brusasca и др. , 2001, Mustafa, 2002, Aagaard и др. , 2004).
ESAT-6 (Rv3875) и CFP10 (Rv3874), хорошо изученные Т-клеточные антигены, отсутствующие в БЦЖ, в настоящее время используются в качестве реагентов для диагностики туберкулеза с помощью анализа высвобождения гамма-интерферона (IGRA) (Mazurek, 2005). , Чанг К.С. и Леунг К.С., 2010).Рекомбинантный ESAT-6 вызывает положительный кожный ответ у инфицированных Mtb морских свинок и людей (Wu, et al. ., 2008). По сравнению с максимальным ответом ГЗТ через 72 часа, индуцированным PPD, ответ ГЗТ на ESAT-6 достиг пика через 24 часа (Pollock , et al. , 2003). Интересно, что комбинация ESAT-6 и CFP10 оказалась высокочувствительной и специфичной по ответу DTH (van Pinxteren , et al. , 2000). CFP10 действует как шаперон и связывается с ESAT-6 в плотном комплексе 1:1, стабилизируя его складчатую структуру (Renshaw , et al., 2002). Исследование рекомбинантного димера ESAT-6 (rdESAT-6), сверхэкспрессированного в Lactococcus lactis , показало, что он может быть успешным диагностическим средством, поскольку он отличает инфекцию Mtb от вакцинации БЦЖ и профили токсичности rdESAT-6 на нескольких животных моделях. утвердили rdESAT-6 как безопасный реагент для ТКП (Aggerbeck & Madsen, 2006). Недавно было завершено двойное слепое рандомизированное исследование фазы I, сравнивающее rdESAT-6 и RT23 у людей. Хотя это исследование показало очень многообещающие результаты в отношении дозировки и безопасности, необходимы дальнейшие исследования, чтобы в достаточной мере продемонстрировать побочные эффекты и эффективность, а также устранить сенсибилизацию (Arend , et al., 2008). Эффективность ESAT-6 и CFP10 в отношении индукции ответов DTH также является предметом споров, поскольку было показано, что они вызывают некротические ответы (Elhay , et al. , 1998).
В аналогичных исследованиях ESAT-6 сочетали со вторым белком культурального фильтрата, MPT64 (Rv1980c). Было показано, что, как и ESAT-6, рекомбинантный MPT64 вызывает ответ DTH у Mtb инфицированных морских свинок. Дальнейшие эксперименты показали, что 15 остатков между аминокислотами Gly-173 и Ala-187 являются ключевыми для вызова реакции ГЗТ (Oettinger , et al., 1995). Животные, подвергшиеся воздействию смеси ESAT-6-MPT64, показали, что эта комбинация имеет потенциал в качестве высокоспецифичного реагента (Elhay , et al. , 1998). В 2007 году сообщалось, что MPT64 находится на стадии III клинических испытаний для оценки его потенциала для замены PPD (Wang , et al. , 2007).
Ген Rv0061 уникален для комплекса Mtb и кодирует белок DPPD, который способен индуцировать сильную реакцию ГЗН у морских свинок, инфицированных Mtb (Coler , et al., 2000). Последующие исследования больных туберкулезом и клинически здоровых людей убедительно свидетельствуют о том, что DPPD является многообещающей альтернативой PPD (Campos-Neto , et al. , 2001, Liu , et al. , 2004). Недавнее исследование подтвердило биологическую активность очищенного рекомбинантного DPPD с использованием мононуклеарных клеток периферической крови от PPD-положительных доноров крови, что указывает на то, что DPPD можно использовать в качестве очищенного антигена для обнаружения туберкулеза (Kashino & Campos-Neto, 2011).
Перспективы и выводы
Несмотря на идентификацию более дюжины белков-кандидатов для включения в реагенты PPD следующего поколения и обнадеживающие предварительные данные исследований на животных и людях, создание нового реагента – одного или нескольких антигенов – для замены PPD остается испытывающий. ТКП, специфичная для выявления исключительно активного или латентного туберкулеза, могла бы принести большую пользу диагностическим и эпидемиологическим программам. Таким образом, необходимо использовать новые стратегии для обнаружения более чувствительных и специфичных антигенов кожных тестов.С другой стороны, один антиген не может эффективно заменить PPD, поскольку для оптимального реагента PPD следующего поколения может потребоваться коктейль антигенов или комбинация нескольких DTH-индуцирующих эпитопов (Oettinger , et al. , 1995). , Лященко , и др. , 1998, Родос , и др. , 2000).
Для достижения этой цели идентификация молекулярного состава PPD облегчает разработку более совершенного реагента. Протеомные исследования выявили высококонсервативные шапероны GroES, GroEL2 и DnaK как три наиболее доминирующих белка, которые могут объяснить положительные свойства и сниженную специфичность PPD (Borsuk , et al., 2009, Чо и др. , 2012). Наша группа недавно идентифицировала два новых препарата, DnaK/GroEL2/Rv0685 и DnaK/GroEL2/Rv0009, которые были способны индуцировать ответы DTH, эквивалентные PPD, в модели Mtb морских свинок (Yang , et al. , 2011). . Лучшее понимание реакции DTH, вызванной этими определенными белками, может способствовать открытию быстрых и чувствительных реагентов для кожных тестов следующего поколения для обнаружения инфекции Mtb .
Благодарности
Эта работа финансировалась в рамках контракта на материалы для испытаний и исследований противотуберкулезной вакцины (HHSN266200400091C) с NIH.
Сноски
Конкурирующие интересы: Не заявлено.
Этическое одобрение: Не требуется.
Ссылки
Aagaard C, Brock I, Olsen A, Ottenhoff TH, Weldingh K, Andersen P. Картирование иммунной реактивности по отношению к Rv2653 и Rv2654: два новых низкомолекулярных антигена, обнаруженных специфически в комплексе Mycobacterium tuberculosis. J заразить Dis. 2004; 189: 812–819. [PubMed] [Google Scholar]
Addo KK, Hof SV, Mensah GI, et al.Опрос туберкулиновых кожных проб среди ганских школьников. Общественное здравоохранение BMC. 2010;10:35. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
Aggerbeck H, Madsen SM. Безопасность ЭСАТ-6. Туберкулез (Эдинб) 2006; 86: 363–373. [PubMed] [Google Scholar]
Аль-Абси А., Бассили А., Абдул Бари Х. и др. Снижение заболеваемости туберкулезом в Йемене: оценка на основе двух общенациональных туберкулиновых обследований. Int J Tuberc Lung Dis. 2009;13:1100–1105. [PubMed] [Google Scholar]
Аренд С.М., Франкен В.П., Аггербек Х. и др.Двойное слепое рандомизированное исследование фазы I, сравнивающее rdESAT-6 с туберкулином в качестве реагента для кожных тестов при диагностике туберкулезной инфекции. Туберкулез (Эдинб) 2008; 88: 249–261. [PubMed] [Google Scholar]
Bachtiar A, Miko TY, Machmud R, et al. Годовой риск заражения туберкулезом в провинции Западная Суматра, Индонезия. Int J Tuberc Lung Dis. 2008; 12: 255–261. [PubMed] [Google Scholar]
Борген К., Костер Б., Мейер Х., Куйвенховен В., ван дер Санде М., Кобеленс Ф. Оценка крупномасштабного расследования контакта с туберкулезом в Нидерландах.Eur Respir J. 2008; 32: 419–425. [PubMed] [Google Scholar]
Борсук С., Ньюкомб Дж., Мендум Т.А., Деллагостин О.А., Макфадден Дж. Идентификация белков из очищенного туберкулином белкового производного (PPD) с помощью ЖХ-МС/МС. Туберкулез (Эдинб) 2009;89:423–430. [PubMed] [Google Scholar]
Ботамли Г.Х., Кэтти Д., Клифтон-Хэдли Р., Гриффин Ф., Хьюинсон Г., Поллок Дж. Иммунодиагностика микобактериальной инфекции. Глава 10. Blackwell Science Ltd; Oxford: 1999. [Google Scholar]
Brusasca PN, Colangeli R, Lyashchenko KP, et al.Иммунологическая характеристика антигенов, кодируемых областью RD1 генома Mycobacterium tuberculosis. Сканд Дж. Иммунол. 2001; 54: 448–452. [PubMed] [Google Scholar]
Campos-Neto A, Rodrigues-Junior V, Pedral-Sampaio DB и др. Оценка DPPD, одного рекомбинантного белка Mycobacterium tuberculosis, в качестве альтернативного антигена для реакции Манту. Туберкулез (Эдинб) 2001;81:353–358. [PubMed] [Google Scholar]
Чадха В.К., Джаганнатха П.С., Вайдьянатан П.С., Джагота П.PPD RT23 для туберкулиновых обследований в Индии. Int J Tuberc Lung Dis. 2003; 7: 172–179. [PubMed] [Google Scholar]
Chambers MA, Jahans K, Whelan A, Hughes C, Sayers R, Perkins A, Glyn Hewinson R. Простое объективное измерение кожной реакции гиперчувствительности замедленного типа на туберкулин с помощью спектрофотометрии. Технология восстановления кожи. 2002; 8: 89–93. [PubMed] [Google Scholar]
Чо Ю.С., Добос К.М., Пренни Дж. и др. Расшифровка протеома реагента для прижизненной диагностики «очищенное белковое производное» микобактерий туберкулеза.Протеомика. 2012; 12: 979–991. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
Ciftci E, Ilgazli A, Gulleroglu B, Ara I, Akansel G. Ультрасонографическое измерение туберкулинового кожного теста: сравнение с ручным чтением. Infect Dis Clin Pract (Baltim Md) 2005; 13:20–23. [Google Scholar]
Colangeli R, Spencer JS, Bifani P, et al. MTSA-10, продукт гена Rv3874 Mycobacterium tuberculosis, вызывает туберкулёзную гиперчувствительность замедленного типа у морских свинок. Заразить иммун.2000;68:990–993. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
Coler RN, Skeiky YA, Ovendale PJ, et al. Клонирование гена Mycobacterium tuberculosis, кодирующего очищенный белковый производный белок, который вызывает сильную туберкулёзную специфическую гиперчувствительность замедленного типа. J заразить Dis. 2000; 182: 224–233. [PubMed] [Google Scholar]
Comstock GW, Edwards LB, Philip RN, Winn WA. Сравнение в Соединенных Штатах Америки двух туберкулинов, Ppd-S и Rt 23. Bull World Health Organ.1964; 31: 161–170. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
Dye C, Scheele S, Dolin P, Pathania V, Raviglione MC. Заявление о консенсусе. Глобальное бремя туберкулеза: оценка заболеваемости, распространенности и смертности по странам. Глобальный проект ВОЗ по эпиднадзору и мониторингу. ДЖАМА. 1999; 282: 677–686. [PubMed] [Google Scholar]
Edwards PQ, Edwads LB. История туберкулиновой пробы с эпидемиологической точки зрения. Ам преподобный Респир Дис. 1960; 81 (1 часть 2): 1–47. [PubMed] [Google Scholar]
Elhay MJ, Oettinger T, Andersen P.Реакция гиперчувствительности замедленного типа на ESAT-6 и MPT64 от Mycobacterium tuberculosis у морской свинки. Заразить иммун. 1998;66:3454–3456. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
Farhat M, Greenaway C, Pai M, Menzies D. Ложноположительные туберкулиновые кожные пробы: каков абсолютный эффект БЦЖ и нетуберкулезных микобактерий? Int J Tuberc Lung Dis. 2006; 10:1192–1204. [PubMed] [Google Scholar]
Фернандес-Вильяр А., Горис А., Отеро М., Чусино Н., Васкес Р., Муньос М.Дж., Пинейро Л.Консервация очищенного белкового производного туберкулина РТ-23. Арка Бронконемол. 2004;40:301–303. [PubMed] [Google Scholar]
Gillenwater KA, Sapp SC, Pearce K, Siberry GK. Увеличение числа конвертеров туберкулиновых кожных проб среди медицинских работников после перехода с туберсола на аплисол. Am J Infect Control. 2006; 34: 651–654. [PubMed] [Google Scholar]
Guld J, Bentzon MW, Bleiker MA, Griep WA, Magnusson M, Waaler H. Стандартизация новой партии очищенного туберкулина (PPD), предназначенного для международного использования.Всемирный орган здравоохранения Быка. 1958; 19: 845–951. [Статья бесплатно PMC] [PubMed] [Google Scholar]
Hanifa Y, Grant AD, Lewis J, Corbett EL, Fielding K, Churchyard G. Распространенность латентной туберкулезной инфекции среди золотодобытчиков в Южной Африке. Int J Tuberc Lung Dis. 2009; 13:39–46. [PubMed] [Google Scholar]
Хансен О.Г., Линдквист К., Валер Х. Оценка эффективности туберкулина у людей и морских свинок. Всемирный орган здравоохранения Быка. 1964; 31: 171–182. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
Harrison DK, Abbot NC, Beck JS, McCollum PT.Предварительная оценка лазерной допплеровской визуализации перфузии кожи человека с использованием туберкулиновой реакции в качестве модели. Физиол Изм. 1993; 14: 241–252. [PubMed] [Google Scholar]
He XY, Luo YA, Zhang XG и др. Клиническая оценка рекомбинантного белка 38 кДа Mycobacterium tuberculosis. Scand J Infect Dis. 2007: 1–6. [PubMed] [Google Scholar]
Ho MM, Kairo SK, Corbel MJ. Иммуноанализ очищенных белковых производных туберкулина (PPD) в качестве альтернативного анализа in vitro для идентификации и подтверждения активности.Гум Вакцина. 2006; 2:29–33. [PubMed] [Google Scholar]
Дженсен П.А., Ламберт Л.А., Ядемарко М.Ф., Ридзон Р. Руководство по предотвращению передачи микобактерий туберкулеза в медицинских учреждениях, 2005 г. MMWR Recomm Rep. 2005; 54:1–141. [PubMed] [Google Scholar]
Кимура М., Комсток Г.В., Мори Т. Сравнение эритемы и уплотнения по результатам туберкулиновых тестов. Int J Tuberc Lung Dis. 2005; 9: 853–857. [PubMed] [Google Scholar]
Kitaura H, Kinomoto M, Yamada T. Рибосомальный белок L7, включенный в состав очищенного белкового производного туберкулина (PPD), является основным термоустойчивым белком, вызывающим сильную гиперчувствительность замедленного типа.Сканд Дж. Иммунол. 1999; 50: 580–587. [PubMed] [Google Scholar]
Клаузен Дж., Магнуссон М., Андерсен А.Б., Кох С. Характеристика очищенного белкового производного туберкулина с использованием моноклональных антител: выделение реактивного компонента гиперчувствительности замедленного типа из культурального фильтрата M.tuberculosis. Сканд Дж. Иммунол. 1994;40:345–349. [PubMed] [Google Scholar]
Kritzinger FE, den Boon S, Verver S, et al. Отсутствие снижения годового риска заражения туберкулезом в эндемичных районах Кейптауна, Южная Африка.Троп Мед Int Health. 2009; 14:136–142. [PubMed] [Google Scholar]
Li J, Munsiff SS, Agerton TB. Распространенность положительных результатов туберкулиновых кожных проб среди клинического населения в Нью-Йорке. J Immigr Minor Health 2008 [PubMed] [Google Scholar]
Liu C, Flamoe E, Chen HJ, Carter D, Reed SG, Campos-Neto A. Экспрессия и очистка иммунологически реактивного DPPD, рекомбинантного антигена кожного теста Mycobacterium tuberculosis, с использованием клеток-хозяев Mycobacterium smegmatis и Escherichia coli.Может J Microbiol. 2004; 50:97–105. [PubMed] [Google Scholar]
Лопес Л.К., Телес С.А., Соуза А.С., Рабахи М.Ф., Типпл А.Ф. Риск туберкулеза среди медсестер из Центральной Бразилии. Am J Infect Control. 2008; 36: 148–151. [PubMed] [Google Scholar]
Лященко К., Манка С., Коланджели Р., Хейбель А., Уильямс А., Дженнаро М.Л. Использование коктейлей специфических антигенов комплекса микобактерий туберкулеза для кожных тестов, специфичных для туберкулеза. Заразить иммун. 1998;66:3606–3610. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
Mackin LA.Скрининг на туберкулез в учреждениях первичной медико-санитарной помощи. Lippincotts Prim Care Pract. 1998; 2: 599–610. викторина 611–593. [PubMed] [Google Scholar]
Maes M, Gimenez JF, D’Alessandro A, De Waard JH. Стабильность человеческого, бычьего и птичьего очищенного белкового производного туберкулина (PPD) J Infect Dev Ctries. 2011;5:781–785. [PubMed] [Google Scholar]
Mahairas GG, Sabo PJ, Hickey MJ, Singh DC, Stover CK. Молекулярный анализ генетических различий между Mycobacterium bovis BCG и вирулентными M.крупный рогатый скот J Бактериол. 1996; 178:1274–1282. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
Masucci P, McAlpine KL. Биохимические исследования бактериальных производных. X. Получение белка туберкулезной палочки человека МА-100. Proc Soc Exp Biol Med. 1930; 27: 661–663. [Google Scholar]
Мехта С.Р., МакГрудер С., Луни Д., Джонс С., Смит Д.М. Различия в туберкулиновой реактивности, установленной в программе обследования здоровья сотрудников администрации ветеранов. Клин Вакцина Иммунол. 2009; 16: 541–543.[Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
Мустафа А.С. Биотехнология в разработке новых вакцин и диагностических реагентов против туберкулеза. Карр Фарм Биотехнолог. 2001; 2: 157–173. [PubMed] [Google Scholar]
Мустафа А.С. Разработка новых вакцин и диагностических реагентов против туберкулеза. Мол Иммунол. 2002; 39: 113–119. [PubMed] [Google Scholar]
Эттингер Т., Холм А., Мтони И.М., Андерсен А.Б., Хаслоов К. Картирование эпитопа секретируемого белка MPT64 Mycobacterium tuberculosis, вызывающего гиперчувствительность замедленного типа.Заразить иммун. 1995;63:4613–4618. [Статья бесплатно PMC] [PubMed] [Google Scholar]
Olsen AW, Hansen PR, Holm A, Andersen P. Эффективная защита от Mycobacterium tuberculosis путем вакцинации одним субдоминантным эпитопом антигена ESAT-6. Евр Дж Иммунол. 2000;30:1724–1732. [PubMed] [Google Scholar]
Pollock JM, McNair J, Bassett H, et al. Специфические реакции гиперчувствительности замедленного типа на ESAT-6 идентифицируют крупный рогатый скот, инфицированный туберкулезом. Дж. Клин Микробиол. 2003; 41: 1856–1860.[Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
Rangel-Frausto MS, Ponce-De-Leon-Rosales S, Martinez-Abaroa C, Haslov K. Туберкулез и качество туберкулина: лучшие намерения, вводящие в заблуждение результаты. Infect Control Hosp Epidemiol. 2001; 22: 481–484. [PubMed] [Google Scholar]
Рао В.Г., Гопи П.Г., Ядав Р. и др. Ежегодный риск заражения туберкулезом среди племенного населения центральной Индии. Троп Мед Int Health. 2008; 13:1372–1377. [PubMed] [Google Scholar]
Renshaw PS, Panagiotidou P, Whelan A, Gordon SV, Hewinson RG, Williamson RA, Carr MD.Убедительные доказательства того, что основные Т-клеточные антигены комплекса Mycobacterium tuberculosis ESAT-6 и CFP-10 образуют плотный комплекс 1:1, и характеристика структурных свойств ESAT-6, CFP-10 и ESAT-6* Комплекс КФП-10. Значение для патогенеза и вирулентности. Дж. Биол. Хим. 2002; 277:21598–21603. [PubMed] [Google Scholar]
Rhodes SG, Gavier-Widen D, Buddle BM, Whelan AO, Singh M, Hewinson RG, Vordermeier HM. Антигенная специфичность при экспериментальном туберкулезе крупного рогатого скота. Заразить иммун.2000;68:2573–2578. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
Rowland SS, Ruckert JL, Cummings PJ. Белковые структуры с низкой молекулярной массой в фильтратах культур микобактерий и очищенных белковых производных. FEMS Immunol Med Microbiol. 1999; 23:21–25. [PubMed] [Google Scholar]
Sbarbaro JA. Антигены кожных тестов: оценка, время которой пришло. Ам преподобный Респир Дис. 1978; 118:1–5. [PubMed] [Google Scholar]
Schiller I, Vordermeier HM, Waters WR, et al. Сравнение активности туберкулина с использованием гамма-интерферона для диагностики туберкулеза крупного рогатого скота.Ветеринар Рек. 2010; 167:322–326. [PubMed] [Google Scholar]
Seibert FB. Выделение и свойства очищенного белкового производного туберкулина. Ам преподобный Туберк. 1934; 30: 713–720. [Google Scholar]
Seibert FB, Glen JT. PPD-S состоял примерно из 92,1% белка, 5,9% полисахаридов и 1,2% нуклеиновой кислоты. Ам преподобный Туберк. 1941; 44: 9–24. [Google Scholar]
Sgountzos V, Simopoulou S, Kretsou S, Sakayianni K, Pavlerou S, Gourgoulianis K, Grigorakos L. Сравнительное исследование RT23 и туберкулина Мерье, протестированных на здоровых добровольцах.Int J Tuberc Lung Dis. 2009; 13:312–316. [PubMed] [Google Scholar]
Shigeto E. [Очищенные белковые производные, полученные из Mycobacterium tuberculosis (PPD) и M. intracellulare (PPD-B) в дифференциальной диагностике микобактериозов] Kekkaku. 1990; 65: 701–709. [PubMed] [Google Scholar]
Шингадия Д., Новелли В. Туберкулиновая кожная проба: сто, а не выход? Арч Дис Чайлд. 2008; 93: 189–190. [PubMed] [Google Scholar]
Shrestha KB, Malla P, Jha KK, Shakya TM, Akhtar M, Gunneberg C, van der Werf MJ.Первое национальное туберкулиновое обследование в Непале. Int J Tuberc Lung Dis. 2008; 12: 909–915. [PubMed] [Google Scholar]
Teixeira L, Maciel E, Dutra ME, Perkins MD, Johnson JL, do Valle Dettoni V. Одновременное сравнение реактивности очищенного белкового производного RT-23 и туберсола у медицинских работников в Витории, Бразилия . Int J Tuberc Lung Dis. 2000;4:1074–1077. [PubMed] [Google Scholar]
Turk JL. Фон Пирке, аллергия и инфекционные заболевания: обзор. JR Soc Med. 1987; 80: 31–33.[Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
Ulea I, Murgoci G, Popa ML, Popa L, Stavri H. Сравнительное исследование туберкулинов RT23 и IC-65, испытанных на детях с туберкулезом. Роум Арч Микробиол Иммунол. 2010;69:75–78. [PubMed] [Google Scholar]
Ван Пинкстерен Л.А., Равн П., Аггер Э.М., Поллок Дж., Андерсен П. Диагностика туберкулеза на основе двух специфических антигенов ESAT-6 и CFP10. Клин Диагн Лаб Иммунол. 2000;7:155–160. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
Vashishtha VM, John TJ.Распространенность инфекции Mycobacterium tuberculosis у детей в Западном Уттар-Прадеше. Индийский педиатр. 2010;47:97–100. [PubMed] [Google Scholar]
Villarino ME, Burman W, Wang YC, et al. Сопоставимая специфичность двух коммерческих туберкулиновых реагентов у лиц с низким риском туберкулезной инфекции. ДЖАМА. 1999; 281:169–171. [PubMed] [Google Scholar]
Villarino ME, Brennan MJ, Nolan CM, et al. Сравнительное тестирование действующих (PPD-S1) и предложенных (PPD-S2) эталонных стандартов туберкулина.Am J Respir Crit Care Med. 2000; 161:1167–1171. [PubMed] [Google Scholar]
Wang Z, Potter BM, Gray AM, Sacksteder KA, Geisbrecht BV, Laity JH. Структура раствора антигена MPT64 Mycobacterium tuberculosis определяет новое семейство белков бета-захвата. Дж Мол Биол. 2007; 366: 375–381. [PubMed] [Google Scholar]
ВОЗ. Доклад Всемирной организации здравоохранения за 2011 г. 2011 г. Глобальная борьба с туберкулезом. [Google Scholar]
Wu X, Zhang L, Zhang J, Zhang C, Zhu L, Shi Y. Рекомбинантный белок-мишень 6 раннего секретируемого антигена в качестве антигена кожного теста для специфического выявления инфекции Mycobacterium tuberculosis.Клин Эксп Иммунол. 2008; 152:81–87. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
Yang HL, Troudt J, Grover A, et al. Три белковых коктейля опосредуют ответы ГЗТ, неотличимые от PPD в модели Mycobacterium tuberculosis на морских свинках. Infect Immun 2011 [бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
Очищенные белковые производные туберкулина
FEMS Immunol Med Microbiol. Авторская рукопись; Доступен в PMC 2013 декабря 1.
Опубликовано в окончательной редактированной форме AS:
PMCID: PMC34
NIHMSID: NIHMMS3
Государственный университет Колорадо, Департамент микробиологии, иммунологии и патологии, Форт-Коллинз, Colorado 80523
^* Автор, ответственный за переписку: Карен М.Добос, почтовый адрес: 1682 Campus Delivery, кафедра микробиологии, иммунологии и патологии; Университет штата Колорадо, Форт. Collins, CO 80523-1682, тел.: 970-491-6549, [email protected] См. другие статьи в PMC, в которых цитируется опубликованная статья.
Abstract
Туберкулиновая кожная проба, которая включает мониторинг иммунной реакции на инъекцию очищенного производного белка (PPD), была наиболее широко используемым методом для выявления инфекции Mycobacterium tuberculosis с момента ее разработки в 1930-х годах.До недавнего времени молекулярный состав PPD был неизвестен. Это помешало открытию улучшенных реагентов для кожных тестов и резко затруднило усилия по определению механизма действия. Протеомная оценка PPD в сочетании с подробным анализом на модели туберкулеза морской свинки привела к дальнейшему определению молекулярного состава PPD. В этом сообщении рассматривается история и текущее состояние PPD, в дополнение к описанию реагентов-кандидатов PPD следующего поколения, основанных на использовании отдельного белка или белковых коктейлей.
Ключевые слова: Туберкулез, Очищенный белковый производный, Туберкулиновая кожная проба, Диагностика причем большинство этих трагических событий произошло в развивающихся странах (ВОЗ, 2011 г.). Его тяжесть усугубляется способностью Mycobacterium tuberculosis ( Mtb ), возбудителя туберкулеза, сохраняться в виде персистирующей бессимптомной инфекции, называемой латентной туберкулезной инфекцией (ЛТБИ).В течение почти столетия лица, инфицированные Mtb , выявлялись с помощью туберкулиновой кожной пробы (ТКП). В 1890 году Роберт Кох предположил, что глицериновый экстракт туберкулезных бацилл может как лечить, так и предотвращать туберкулез. Хотя «Старый туберкулин» Коха в конечном итоге потерпел неудачу в качестве терапии, его открытия стали катализатором разработки современной ТКП, наиболее важного инструмента для выявления потенциальных случаев ТБ на сегодняшний день (Shingadia & Novelli, 2008).
ТКП также известна как проба Манту в честь французского врача Шарля Манту (1877–1947), который установил диагностические критерии для чтения ТКП.Метод Манту, одобренный Американским торакальным обществом и Центрами по контролю и профилактике заболеваний (CDC), в настоящее время является золотым стандартом для определения того, инфицирован ли человек Mtb. Этот иммунологический тест состоит из двух частей. Сначала реагент очищенного производного белка (PPD) вводят внутрикожно в предплечье. Во-вторых, реакцию гиперчувствительности замедленного типа (ГЗТ) отслеживают через 48-72 часа после инъекции путем измерения диаметра уплотнения (отека из-за воспаления) в миллиметрах в месте инъекции.Обычным явлением является визуализация эритемы (покраснения) в течение первых 24 часов после введения PPD; это не следует измерять, так как это не указывает на инфекцию. Проведение и чтение результатов этого теста должны выполняться обученными медицинскими работниками, которые могут интерпретировать факторы риска наряду с измерением при определении положительной реакции (Mackin, 1998).
Помимо своей роли индикатора инфекции Mtb , ТКП также используется в качестве эпидемиологического инструмента для оценки распространенности латентной туберкулезной инфекции (ЛТБИ).Прогноз о том, что одна треть населения мира инфицирована Mtb , частично основан на частоте положительной ТКП (Dye , et al. , 1999).
В текущем обзоре мы представляем обзор истории, развития и текущего использования PPD. Кроме того, будут рассмотрены исследования, направленные на определение ключевых молекулярных компонентов PPD и его биологической активности.
Прошлое и настоящее использование PPD
Первая кожная туберкулиновая проба была введена в 1907 г. фон Пирке (1874–1929), австрийским ученым и педиатром (Turk, 1987).В его исследовании использовалась ОТ Коха, нагретый бульон, состоящий из неочищенной неопределенной смеси белков и других макромолекул, полученных из туберкулезной палочки. OT Коха готовили из концентрированного фильтрата глицерино-пептонного бульона, в котором Mtb росли в течение 6–8 недель. OT Koch и аналогичные продукты не используются в качестве реагентов для ТКП в США из-за недостаточной чистоты, различий в эффективности и специфичности, а также из-за недостаточной стандартизации.
В 1930 г. из фильтрата культуры Mtb был получен альтернативный состав, известный как MA-100, в виде состава, не содержащего полисахаридов (Masucci & McAlpine, 1930).Было обнаружено, что МА-100 значительно более эффективен, чем ОТ Коха; однако его использование в качестве стандартного диагностического реагента было ограничено — в основном из-за сенсибилизирующего действия, наблюдаемого при повторных инъекциях в кожу.
В 1934 году Флоренс Б. Зайберт (1897–1991), биохимик из Института Генри Фиппса Пенсильванского университета, разработала более стабильный и последовательный препарат (Seibert, 1934). Первоначально обозначенный по способу его производства, SOTT, аббревиатура от «синтетический средний преципитат туберкулина трихлоруксусной кислоты», этот продукт позже был назван очищенным белковым производным или PPD.Его получали пропариванием культур Mtb в стерилизаторе Arnold и очисткой белков повторным осаждением сульфатом аммония (Seibert & Glen, 1941). По сравнению с предыдущими туберкулиновыми реагентами, в этом методе приготовления PPD было значительно снижено содержание полисахаридов, нуклеиновых кислот и липидов, и, таким образом, это был реагент, богатый белком. В 1944 году большая партия этого улучшенного PPD (партия 49608), переименованного в PPD-S (PPD-Standard), была предоставлена в качестве эталонного продукта в Соединенных Штатах.PPD-S состоял примерно из 92,9% белка, 5,9% полисахаридов и 1,2% нуклеиновой кислоты (Seibert & Glen, 1941). Из-за повышенной чистоты и активности PPD-S был принят Всемирной организацией здравоохранения (ВОЗ) в качестве международного стандарта туберкулина в 1952 г. (Guld , et al. , 1958). С 1978 г. Управление по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов (FDA) потребовало, чтобы все партии PPD были квалифицированы биологическим анализом и должны демонстрировать активность, эквивалентную активности PPD-S (Sbarbaro, 1978). Международная единица (МЕ) для PPD была определена как часть этого эффекта; одна МЕ равна биологической активности, содержащейся в 0.028 мкг PPD-S (0,02 мкг PPD с 0,008 мкг солей). Однако в США и Канаде эффективность PPD выражается в туберкулиновых единицах (TU), а не в IU. Одна TU определяется как 0,02 мкг PPD-S (Edwards & Edwads, 1960). Пять ТЕ являются стандартной дозой для внутрикожного диагностического применения, как определено в эпидемиологических исследованиях (Bothamley, и др., , 1999).
PPD-S2, текущий стандарт США на туберкулин PPD, был разработан в ожидании возможного истощения PPD-S (Villarino, et al ., 2000). В настоящее время Aplisol ^® (JHP Pharmaceuticals, Inc, Рочестер, Мичиган) и Tubersol ^® (Sanofi Pasteur Limited, Swiftwater, PA) являются двумя широко используемыми коммерчески доступными продуктами PPD-S2 (Jensen, et al. ). , 2005). Результаты кожных испытаний с Aplisol ^® и Tubersol ^® вполне сравнимы с результатами оригинального стандарта PPD, PPD-S (Villarino, et al. ., 1999). Однако переход от Tubersol ^® к Aplisol ^® или наоборот привел к отклонениям в кожных тестах, хотя точная причина до сих пор неясна (Gillenwater, et al ., 2006, Мехта, и др. , 2009).
Помимо PPD-S, за пределами США и Канады используется несколько других составов PPD (Li , et al. , 2008). Некоторые из этих туберкулиновых продуктов, включая PPD RT23, производятся Государственным институтом сывороток (SSI) (Comstock, и др., , 1964). В настоящее время ВОЗ и Международный союз по борьбе с туберкулезом и заболеваниями легких (IUATLD) рекомендуют 2 ТЕ PPD-RT23 с твином 80. RT23 является наиболее широко используемым продуктом PPD во всем мире (Rangel-Frausto, и др. ., 2001). Несколько исследований по всему миру использовали PPD RT23 для оценки распространенности инфекции туберкулезной палочкой, включая Индию (Rao , et al. , 2008), (Vashishtha & John, 2010), Гану (Addo , et al. 2010), Йемен (Аль-Абси, и др. , 2009), Южная Африка (Критцингер, и др. , 2009) (Ханифа, и др. , 2009), Непал (Шреста, et , 2008), Бразилии (Lopes, и др. , 2008) и Индонезии (Bachtiar, и др. )., 2008). Кроме того, он также использовался для оценки крупномасштабных контактов с больными туберкулезом в Нидерландах (Borgen, et al. , 2008).
В дополнение к вышеупомянутым продуктам PPD также используются другие варианты PPD, такие как PPD RT23 Mexico (Laboratorio Nacional de Salud, Secretaria de Salud, Мехико, Мексика), продукт PPD, используемый в Латинской Америке (Rangel-Frausto , и др. , 2001), и японский продукт PPD-s. (Кимура, и др., 2005 ). Многочисленные продукты PPD, используемые в настоящее время, перечислены в .
Таблица 1
Препараты PPD, используемые в настоящее время для лечения людей
PPD S2 (APLisol ^®) JHP Pharmaceuticals, Inc, Rochester, Mi, USA 5 TU (Villarino , et al. , 1999) PPD S2 (Tubersol ^®) Санофи Пастер Лимитед, Свифтуотер, Пенсильвания, США 5 ТУ (Вилларино , и др., 1999, Teixeira и др. , 2000, Rangel-Frausto и др. , 2001) PPD RT23 SSI Statens SSI Статус институт сыворотки, Копенгаген, Дания 2 TU (Maes , et al. , 2011, Teixeira , et al. , 2000) PPD RT23 Мексика Laboratorio Nacional de Salud, Секретария де Салюд, Мехико, Мексика 2 TU (Rangel-Frusto , et al. , 2001) PPD RT23 (Evans PPD) Селлтек Фарма С.А., Мадрид, Испания 2 TU (Fernandez-Villar , et al. , 2004) PPD-S Nihon BCG Seizo Co., Токио, Япония 3 TU ( Shigeto, 1990) PPD IC-65 PPD IC-65 Cantacuzino Институт, Бухарест, Румыния 2 TU (Ulea , et al. 2010)
Так как есть несколько производителей PPD важно оценить различия в эффективности этих продуктов PPD.Из-за ограниченных знаний о точном составе каждого продукта PPD невозможно использовать традиционные методы контроля качества для сравнения препаратов PPD. Поэтому сравнения с использованием животных, инфицированных микобактериями, проводятся для оценки биологической активности продуктов PPD. При этом продукты PPD должны вводиться в тех же условиях, в которых они будут использоваться в клинических условиях (Hansen , et al. , 1964).
Первое опубликованное сравнение эффективности PPD было проведено между PPD-S и PPD-RT23.Исследование, проведенное среди 6 групп населения в США, включая детей-эскимосов, больных туберкулезом и новобранцев в учебных центрах ВМС США, показало, что 2,5 ТЕ PPD-RT23, содержащего твин 80, обладают эффективностью, аналогичной 5 ТЕ PPD-S. (Комсток , и др. , 1964). Совсем недавно исследование 69 больных туберкулезом и 1189 субъектов с низким риском в США сравнило PPD-S2 с PPD-S1. Было обнаружено, что эти два продукта статистически неразличимы у больных туберкулезом. Кроме того, такая же высокая специфичность наблюдалась среди субъектов с низким риском.Это исследование показало, что PPD-S2 функционально эквивалентен PPD-S1 и может легко заменить его (Villarino , et al. , 2000). Многочисленные исследования сравнивали активность RT23, полученного в SSI, с другими источниками PPD, включая IC-65, и среди них была обнаружена эквивалентная эффективность (Ulea , et al. , 2010), (Chadha , et al. , 2003), (Шиллер и др. 2010). Однако аналогичное исследование в Мексике сравнило эффективность местного производства PPD RT23 (Мексика), Tubersol ^® и PPD RT23 (SSI) и выявило, что из трех, RT23 (Мексика) имел гораздо более низкую чувствительность (Rangel- Фраусто и др., 2001). RT23 и туберкулин Merieux (разработанный в Pasteur-Merieux) также недавно сравнивали по их относительной активности. Оба препарата были получены из нескольких штаммов микобактерий (RT23 был получен из семи штаммов Mtb , Merieux был получен из трех штаммов Mtb, плюс M. bovis ) и, по-видимому, обладают биологической активностью, эквивалентной PPD-S. , который является продуктом одного штамма. Однако RT23 часто вызывает более сильную антигенную реакцию, чем препарат Мерье (Sgountzos, et al., 2009). Недавно Schiller et al. сравнили диагностическую надежность PPD из разных источников с помощью инновационного подхода к мониторингу ответов интерферона-γ в культурах цельной крови (Schiller , et al. 2010). В этом исследовании образцы цельной крови стимулировали несколькими различными туберкулинами, и через 24 часа после стимуляции отслеживали реакцию IFN-γ. Их результаты подтверждают, что существуют значительные различия между депрессорами из разных источников, и указывают на необходимость дальнейшей стандартизации продуктов депрессоров.Была введена количественная шкала, обозначенная как RP30 (относительная активность 30), определяемая как концентрация белка, при которой конкретный препарат PPD имеет 30% максимальной активности. RP30 можно использовать в качестве инструмента для быстрого сравнения биологической активности партий и источников PPD. Хотя в этих отчетах подчеркивается важность оценки биологической активности продуктов PPD из разных источников, расхождения в эффективности трудно объяснить из-за сложности и неоднозначности молекулярного состава PPD.Протеомная характеристика PPD была описана нашей лабораторией (Cho, et al. , 2012) и другими (Borsuk , et al. , 2009), демонстрируя, что PPD состоит из сотен различных белков. Дополнительный сравнительный протеомный, биологический и гистологический анализы использовались для измерения относительных различий в молекулярном составе и биологической активности между PPD-S2, RT23 и PPD-KIT (PPD Корейского технологического института) (Cho, et al ., 2012). Это исследование продемонстрировало, что, хотя все 3 препарата PPD были неразличимы по своей способности индуцировать ответ ГЗТ, были очевидны гистологические различия и различия в относительном количестве нескольких белков, включая членов семейства белков Esx, что позволяет предположить корреляцию между повышенной гистопатологией и повышенная концентрация белков Esx в PPD (Cho, et al ., 2012). В совокупности все эти сравнительные отчеты иллюстрируют сложность PPD и проблемы, связанные с созданием стандартизированного реагента.
Подводные камни PPD
Несмотря на то, что в прошлом столетии ТКП была стандартом для выявления лиц, подверженных риску активного ТБ, она имеет несколько фундаментальных недостатков, которые служат стимулом для разработки более стандартизированной методологии и более эффективных инструментов для выявления ЛТБИ. Основной проблемой текущего теста является высокий уровень ложноположительных результатов, вызванный неспособностью TST отличить инфекцию Mtb от воздействия нетуберкулезных микобактерий или вакцинации M.bovis Bacille Calmett-Guérin (BCG) (Huebner, и др. , 1993). Оба случая ложноположительных ответов обычно приписывают иммунному ответу, запускаемому гомологичными антигенами либо при вакцинации БЦЖ, либо от микобактерий из окружающей среды (Harboe, 1981, Huebner, и др., , 1993). Эти предположения были недавно подтверждены молекулярным анализом PPD, показывающим, что четыре белка теплового шока (GroEl, GroEs, DnaK и HspX) составляют примерно 60% протеомного содержания PPD (Cho, et al ., 2012, Борсук и др. , 2009). Эти белки-шапероны обладают высокой гомологией (более 70%) и консервативны среди большинства видов микобактерий (Cho, et al. ., 2012, Borsuk , et al. , 2009). Это усложняет использование ТКП в качестве инструмента как для эпидемиологических исследований, так и для выявления лиц, инфицированных Mtb , из-за потенциальной перекрестной реактивности от вакцинации БЦЖ или инфицирования нетуберкулезными микобактериями. Ложноотрицательные результаты также проблематичны, особенно у детей и лиц с ослабленным иммунитетом (Farhat, и др., )., 2006 г., Шингадия и Новелли, 2008 г.). Это связано с тем, что положительный PPD требует эффективного ответа DTH. Поэтому вполне вероятно, что PPD не может служить индикатором инфекции Mtb в тех популяциях, где отсутствует надежный Т-клеточный иммунитет. Наконец, хотя ТКП можно использовать для выявления ЛТБИ, он не позволяет провести различие между этим заболеванием, активным заболеванием или выздоравливающим пациентом. Несмотря на эти подводные камни, TST остается наиболее часто используемым инструментом для обнаружения инфекции Mtb .
Будущее PPD – открытие и разработка PPD следующего поколения
Разработка новых и более эффективных реагентов для выявления ЛТБИ является ключом к успеху в борьбе с туберкулезом. Улучшенное обнаружение латентных бацилл приведет к стратегиям раннего вмешательства и, вероятно, снизит заболеваемость и разорвет цикл передачи болезни.
Не следует упускать из виду усовершенствование существующих реагентов ТКП, поскольку мы движемся к цели создания новых реагентов для обнаружения ЛТБИ; однако стоит отметить, что метод количественной оценки иммунного ответа весьма субъективен.Вместо измерения диаметра уплотнений в миллиметрах тестируется несколько новых методов. К ним относятся: лазерная допплеровская визуализация у людей (Harrison, et al. , 1993), использование ручного спектрофотометра для измерения реакции ГЗТ (Chambers, et al. , 2002) и ультразвуковое исследование у пациентов ( Ciftci и др. , 2005). Эти альтернативные методы могут применяться для объективного количественного определения TST и могут преодолевать ограничения обычного способа измерения; однако следует учитывать возможность использования дорогостоящих технологий в регионах с ограниченными ресурсами.
В дополнение к улучшению метода измерения для улучшения стандартизации теста, можно улучшить фактический состав депрессора. Определение молекулярного состава PPD в течение многих лет было серьезным препятствием. Длительное нагревание сырого туберкулина для приготовления PPD способствовало денатурации, частичной деградации и агрегации многих белковых компонентов. Многочисленные исследования идентифицировали PPD как смесь очень гетерогенных белков размером от очень больших агрегатов до очень маленьких деградировавших молекул (Klausen, et al ., 1994, Rowland, et al. ., 1999, Ho, et al. , 2006). Точно так же мало было известно о том, какой из этих компонентов в PPD отвечает за реакцию DTH. С недавней идентификацией более ста белков из четырех различных PPD с помощью масс-спектрометрии (Borsuk , et al. , 2009, Cho , et al. , 2012) можно применять новые подходы для определения того, какие из этих компонентов незаконный ответ DTH.
Почти за два десятилетия до публикации молекулярного состава PPD были проведены многочисленные исследования отдельных белков для проверки их способности индуцировать реакцию ГЗТ (Klausen , et al., 1994). Такие исследования по-прежнему имеют решающее значение для оптимизации PPD и понимания того, как он модулирует иммунную систему. Антигены, тестируемые в качестве будущих реагентов PPD, приведены в .
Таблица 2
Антигены в настоящее время под оценкой как следующее поколение PPD кандидаты
, 2004)
Gene Number Antigen Animals Дозировка (мкг) Страна Ссылка
Rv1980c МПТ 64 ГП 0.1 Denmark (Oettinger , et al. , 1995)
RV3875 / RV1980C ESAT-6 / MPT 64 GP 1 Denmark (ELHAY , et al. , 1998)
RV0652 RV0652 Рибосомальный белок L7 / L12 GP 0.2 Япония (Kitaura , et al. , 1999)
RV0061 DPPD GP / Hu 2 (GP) USA (Coler , et al., 2000)
RV3874 CFP10 GP GP 2 USA (Colangeli , et al. , 2000)
RV3875 / RV3874 ESAT-6 / CFP10 GP / CA 1 (GP)
2 (CA) UK (Van Pinxteren , et al. , 2000)
RV3875 ESAT-6 CA 25-400 25-400 Дания (Pollock , et al., 2003)
RV0061
DPPD HU Hu 0.2-5 США (Campos-Neto , et al. , 2001)
RV0061 DPPD GP 5 USA (Liu , et al. , 2004)
RV3875 ESAT-6 GP GP 0.01-1 Дания (Aggerbeck & Madsen, 2006)
Rv3875 ESAT-6 Ху 0.01-1 Нидерланды / Дания (Arend , et al. , 2008)
RV3875 ESAT-6 GP / HU 0,1-1 (GP)
1 (HU) China (WU , et al. , 2008)
RV0934 TPA38 GP / HU 3-5 China (He , et al. , 2007)
Rv0350 ДНК ГП 0.4 USA (Yang, et al. , 2011)
RV0685 GREL2 GP 0.4 USA (Yang, et al. , 2011)
Помимо протеомики, геномика сыграла ключевую роль в идентификации Mtb -специфических антигенов. Геномное сравнение штамма Mtb h47Rv и нескольких вакцинных штаммов M. bovis выявило 129 ORF, уникальных для Mtb , сгруппированных в 16 областях различий (RD) на хромосоме.Оценка и включение белков, кодируемых из этих областей, может играть жизненно важную роль в создании реагентов PPD следующего поколения, более специфичных к Mtb (Mustafa, 2001). Среди этих 16 RD наиболее изученным является RD1; гены, предсказанные в этом сегменте ДНК, удалены из всех вакцинных штаммов БЦЖ, в то время как они сохраняются во всех лабораторных и клинических изолятах M. bovis и Mtb , проверенных до сих пор (Mahairas , et al. , 1996).Двумя кандидатами, специфичными для комплекса Mtb и кодируемыми областью RD1, являются низкомолекулярные секретируемые белки CFP10 и ESAT-6 (Olsen , et al. , 2000, van Pinxteren , et al. , 2000, Brusasca и др. , 2001, Mustafa, 2002, Aagaard и др. , 2004).
ESAT-6 (Rv3875) и CFP10 (Rv3874), хорошо изученные Т-клеточные антигены, отсутствующие в БЦЖ, в настоящее время используются в качестве реагентов для диагностики туберкулеза с помощью анализа высвобождения гамма-интерферона (IGRA) (Mazurek, 2005). , Чанг К.С. и Леунг К.С., 2010).Рекомбинантный ESAT-6 вызывает положительный кожный ответ у инфицированных Mtb морских свинок и людей (Wu, et al. ., 2008). По сравнению с максимальным ответом ГЗТ через 72 часа, индуцированным PPD, ответ ГЗТ на ESAT-6 достиг пика через 24 часа (Pollock , et al. , 2003). Интересно, что комбинация ESAT-6 и CFP10 оказалась высокочувствительной и специфичной по ответу DTH (van Pinxteren , et al. , 2000). CFP10 действует как шаперон и связывается с ESAT-6 в плотном комплексе 1:1, стабилизируя его складчатую структуру (Renshaw , et al., 2002). Исследование рекомбинантного димера ESAT-6 (rdESAT-6), сверхэкспрессированного в Lactococcus lactis , показало, что он может быть успешным диагностическим средством, поскольку он отличает инфекцию Mtb от вакцинации БЦЖ и профили токсичности rdESAT-6 на нескольких животных моделях. утвердили rdESAT-6 как безопасный реагент для ТКП (Aggerbeck & Madsen, 2006). Недавно было завершено двойное слепое рандомизированное исследование фазы I, сравнивающее rdESAT-6 и RT23 у людей. Хотя это исследование показало очень многообещающие результаты в отношении дозировки и безопасности, необходимы дальнейшие исследования, чтобы в достаточной мере продемонстрировать побочные эффекты и эффективность, а также устранить сенсибилизацию (Arend , et al., 2008). Эффективность ESAT-6 и CFP10 в отношении индукции ответов DTH также является предметом споров, поскольку было показано, что они вызывают некротические ответы (Elhay , et al. , 1998).
В аналогичных исследованиях ESAT-6 сочетали со вторым белком культурального фильтрата, MPT64 (Rv1980c). Было показано, что, как и ESAT-6, рекомбинантный MPT64 вызывает ответ DTH у Mtb инфицированных морских свинок. Дальнейшие эксперименты показали, что 15 остатков между аминокислотами Gly-173 и Ala-187 являются ключевыми для вызова реакции ГЗТ (Oettinger , et al., 1995). Животные, подвергшиеся воздействию смеси ESAT-6-MPT64, показали, что эта комбинация имеет потенциал в качестве высокоспецифичного реагента (Elhay , et al. , 1998). В 2007 году сообщалось, что MPT64 находится на стадии III клинических испытаний для оценки его потенциала для замены PPD (Wang , et al. , 2007).
Ген Rv0061 уникален для комплекса Mtb и кодирует белок DPPD, который способен индуцировать сильную реакцию ГЗН у морских свинок, инфицированных Mtb (Coler , et al., 2000). Последующие исследования больных туберкулезом и клинически здоровых людей убедительно свидетельствуют о том, что DPPD является многообещающей альтернативой PPD (Campos-Neto , et al. , 2001, Liu , et al. , 2004). Недавнее исследование подтвердило биологическую активность очищенного рекомбинантного DPPD с использованием мононуклеарных клеток периферической крови от PPD-положительных доноров крови, что указывает на то, что DPPD можно использовать в качестве очищенного антигена для обнаружения туберкулеза (Kashino & Campos-Neto, 2011).
Перспективы и выводы
Несмотря на идентификацию более дюжины белков-кандидатов для включения в реагенты PPD следующего поколения и обнадеживающие предварительные данные исследований на животных и людях, создание нового реагента – одного или нескольких антигенов – для замены PPD остается испытывающий. ТКП, специфичная для выявления исключительно активного или латентного туберкулеза, могла бы принести большую пользу диагностическим и эпидемиологическим программам. Таким образом, необходимо использовать новые стратегии для обнаружения более чувствительных и специфичных антигенов кожных тестов.С другой стороны, один антиген не может эффективно заменить PPD, поскольку для оптимального реагента PPD следующего поколения может потребоваться коктейль антигенов или комбинация нескольких DTH-индуцирующих эпитопов (Oettinger , et al. , 1995). , Лященко , и др. , 1998, Родос , и др. , 2000).
Для достижения этой цели идентификация молекулярного состава PPD облегчает разработку более совершенного реагента. Протеомные исследования выявили высококонсервативные шапероны GroES, GroEL2 и DnaK как три наиболее доминирующих белка, которые могут объяснить положительные свойства и сниженную специфичность PPD (Borsuk , et al., 2009, Чо и др. , 2012). Наша группа недавно идентифицировала два новых препарата, DnaK/GroEL2/Rv0685 и DnaK/GroEL2/Rv0009, которые были способны индуцировать ответы DTH, эквивалентные PPD, в модели Mtb морских свинок (Yang , et al. , 2011). . Лучшее понимание реакции DTH, вызванной этими определенными белками, может способствовать открытию быстрых и чувствительных реагентов для кожных тестов следующего поколения для обнаружения инфекции Mtb .
Благодарности
Эта работа финансировалась в рамках контракта на материалы для испытаний и исследований противотуберкулезной вакцины (HHSN266200400091C) с NIH.
Сноски
Конкурирующие интересы: Не заявлено.
Этическое одобрение: Не требуется.
Ссылки
Aagaard C, Brock I, Olsen A, Ottenhoff TH, Weldingh K, Andersen P. Картирование иммунной реактивности по отношению к Rv2653 и Rv2654: два новых низкомолекулярных антигена, обнаруженных специфически в комплексе Mycobacterium tuberculosis. J заразить Dis. 2004; 189: 812–819. [PubMed] [Google Scholar]
Addo KK, Hof SV, Mensah GI, et al.Опрос туберкулиновых кожных проб среди ганских школьников. Общественное здравоохранение BMC. 2010;10:35. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
Aggerbeck H, Madsen SM. Безопасность ЭСАТ-6. Туберкулез (Эдинб) 2006; 86: 363–373. [PubMed] [Google Scholar]
Аль-Абси А., Бассили А., Абдул Бари Х. и др. Снижение заболеваемости туберкулезом в Йемене: оценка на основе двух общенациональных туберкулиновых обследований. Int J Tuberc Lung Dis. 2009;13:1100–1105. [PubMed] [Google Scholar]
Аренд С.М., Франкен В.П., Аггербек Х. и др.Двойное слепое рандомизированное исследование фазы I, сравнивающее rdESAT-6 с туберкулином в качестве реагента для кожных тестов при диагностике туберкулезной инфекции. Туберкулез (Эдинб) 2008; 88: 249–261. [PubMed] [Google Scholar]
Bachtiar A, Miko TY, Machmud R, et al. Годовой риск заражения туберкулезом в провинции Западная Суматра, Индонезия. Int J Tuberc Lung Dis. 2008; 12: 255–261. [PubMed] [Google Scholar]
Борген К., Костер Б., Мейер Х., Куйвенховен В., ван дер Санде М., Кобеленс Ф. Оценка крупномасштабного расследования контакта с туберкулезом в Нидерландах.Eur Respir J. 2008; 32: 419–425. [PubMed] [Google Scholar]
Борсук С., Ньюкомб Дж., Мендум Т.А., Деллагостин О.А., Макфадден Дж. Идентификация белков из очищенного туберкулином белкового производного (PPD) с помощью ЖХ-МС/МС. Туберкулез (Эдинб) 2009;89:423–430. [PubMed] [Google Scholar]
Ботамли Г.Х., Кэтти Д., Клифтон-Хэдли Р., Гриффин Ф., Хьюинсон Г., Поллок Дж. Иммунодиагностика микобактериальной инфекции. Глава 10. Blackwell Science Ltd; Oxford: 1999. [Google Scholar]
Brusasca PN, Colangeli R, Lyashchenko KP, et al.Иммунологическая характеристика антигенов, кодируемых областью RD1 генома Mycobacterium tuberculosis. Сканд Дж. Иммунол. 2001; 54: 448–452. [PubMed] [Google Scholar]
Campos-Neto A, Rodrigues-Junior V, Pedral-Sampaio DB и др. Оценка DPPD, одного рекомбинантного белка Mycobacterium tuberculosis, в качестве альтернативного антигена для реакции Манту. Туберкулез (Эдинб) 2001;81:353–358. [PubMed] [Google Scholar]
Чадха В.К., Джаганнатха П.С., Вайдьянатан П.С., Джагота П.PPD RT23 для туберкулиновых обследований в Индии. Int J Tuberc Lung Dis. 2003; 7: 172–179. [PubMed] [Google Scholar]
Chambers MA, Jahans K, Whelan A, Hughes C, Sayers R, Perkins A, Glyn Hewinson R. Простое объективное измерение кожной реакции гиперчувствительности замедленного типа на туберкулин с помощью спектрофотометрии. Технология восстановления кожи. 2002; 8: 89–93. [PubMed] [Google Scholar]
Чо Ю.С., Добос К.М., Пренни Дж. и др. Расшифровка протеома реагента для прижизненной диагностики «очищенное белковое производное» микобактерий туберкулеза.Протеомика. 2012; 12: 979–991. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
Ciftci E, Ilgazli A, Gulleroglu B, Ara I, Akansel G. Ультрасонографическое измерение туберкулинового кожного теста: сравнение с ручным чтением. Infect Dis Clin Pract (Baltim Md) 2005; 13:20–23. [Google Scholar]
Colangeli R, Spencer JS, Bifani P, et al. MTSA-10, продукт гена Rv3874 Mycobacterium tuberculosis, вызывает туберкулёзную гиперчувствительность замедленного типа у морских свинок. Заразить иммун.2000;68:990–993. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
Coler RN, Skeiky YA, Ovendale PJ, et al. Клонирование гена Mycobacterium tuberculosis, кодирующего очищенный белковый производный белок, который вызывает сильную туберкулёзную специфическую гиперчувствительность замедленного типа. J заразить Dis. 2000; 182: 224–233. [PubMed] [Google Scholar]
Comstock GW, Edwards LB, Philip RN, Winn WA. Сравнение в Соединенных Штатах Америки двух туберкулинов, Ppd-S и Rt 23. Bull World Health Organ.1964; 31: 161–170. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
Dye C, Scheele S, Dolin P, Pathania V, Raviglione MC. Заявление о консенсусе. Глобальное бремя туберкулеза: оценка заболеваемости, распространенности и смертности по странам. Глобальный проект ВОЗ по эпиднадзору и мониторингу. ДЖАМА. 1999; 282: 677–686. [PubMed] [Google Scholar]
Edwards PQ, Edwads LB. История туберкулиновой пробы с эпидемиологической точки зрения. Ам преподобный Респир Дис. 1960; 81 (1 часть 2): 1–47. [PubMed] [Google Scholar]
Elhay MJ, Oettinger T, Andersen P.Реакция гиперчувствительности замедленного типа на ESAT-6 и MPT64 от Mycobacterium tuberculosis у морской свинки. Заразить иммун. 1998;66:3454–3456. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
Farhat M, Greenaway C, Pai M, Menzies D. Ложноположительные туберкулиновые кожные пробы: каков абсолютный эффект БЦЖ и нетуберкулезных микобактерий? Int J Tuberc Lung Dis. 2006; 10:1192–1204. [PubMed] [Google Scholar]
Фернандес-Вильяр А., Горис А., Отеро М., Чусино Н., Васкес Р., Муньос М.Дж., Пинейро Л.Консервация очищенного белкового производного туберкулина РТ-23. Арка Бронконемол. 2004;40:301–303. [PubMed] [Google Scholar]
Gillenwater KA, Sapp SC, Pearce K, Siberry GK. Увеличение числа конвертеров туберкулиновых кожных проб среди медицинских работников после перехода с туберсола на аплисол. Am J Infect Control. 2006; 34: 651–654. [PubMed] [Google Scholar]
Guld J, Bentzon MW, Bleiker MA, Griep WA, Magnusson M, Waaler H. Стандартизация новой партии очищенного туберкулина (PPD), предназначенного для международного использования.Всемирный орган здравоохранения Быка. 1958; 19: 845–951. [Статья бесплатно PMC] [PubMed] [Google Scholar]
Hanifa Y, Grant AD, Lewis J, Corbett EL, Fielding K, Churchyard G. Распространенность латентной туберкулезной инфекции среди золотодобытчиков в Южной Африке. Int J Tuberc Lung Dis. 2009; 13:39–46. [PubMed] [Google Scholar]
Хансен О.Г., Линдквист К., Валер Х. Оценка эффективности туберкулина у людей и морских свинок. Всемирный орган здравоохранения Быка. 1964; 31: 171–182. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
Harrison DK, Abbot NC, Beck JS, McCollum PT.Предварительная оценка лазерной допплеровской визуализации перфузии кожи человека с использованием туберкулиновой реакции в качестве модели. Физиол Изм. 1993; 14: 241–252. [PubMed] [Google Scholar]
He XY, Luo YA, Zhang XG и др. Клиническая оценка рекомбинантного белка 38 кДа Mycobacterium tuberculosis. Scand J Infect Dis. 2007: 1–6. [PubMed] [Google Scholar]
Ho MM, Kairo SK, Corbel MJ. Иммуноанализ очищенных белковых производных туберкулина (PPD) в качестве альтернативного анализа in vitro для идентификации и подтверждения активности.Гум Вакцина. 2006; 2:29–33. [PubMed] [Google Scholar]
Дженсен П.А., Ламберт Л.А., Ядемарко М.Ф., Ридзон Р. Руководство по предотвращению передачи микобактерий туберкулеза в медицинских учреждениях, 2005 г. MMWR Recomm Rep. 2005; 54:1–141. [PubMed] [Google Scholar]
Кимура М., Комсток Г.В., Мори Т. Сравнение эритемы и уплотнения по результатам туберкулиновых тестов. Int J Tuberc Lung Dis. 2005; 9: 853–857. [PubMed] [Google Scholar]
Kitaura H, Kinomoto M, Yamada T. Рибосомальный белок L7, включенный в состав очищенного белкового производного туберкулина (PPD), является основным термоустойчивым белком, вызывающим сильную гиперчувствительность замедленного типа.Сканд Дж. Иммунол. 1999; 50: 580–587. [PubMed] [Google Scholar]
Клаузен Дж., Магнуссон М., Андерсен А.Б., Кох С. Характеристика очищенного белкового производного туберкулина с использованием моноклональных антител: выделение реактивного компонента гиперчувствительности замедленного типа из культурального фильтрата M.tuberculosis. Сканд Дж. Иммунол. 1994;40:345–349. [PubMed] [Google Scholar]
Kritzinger FE, den Boon S, Verver S, et al. Отсутствие снижения годового риска заражения туберкулезом в эндемичных районах Кейптауна, Южная Африка.Троп Мед Int Health. 2009; 14:136–142. [PubMed] [Google Scholar]
Li J, Munsiff SS, Agerton TB. Распространенность положительных результатов туберкулиновых кожных проб среди клинического населения в Нью-Йорке. J Immigr Minor Health 2008 [PubMed] [Google Scholar]
Liu C, Flamoe E, Chen HJ, Carter D, Reed SG, Campos-Neto A. Экспрессия и очистка иммунологически реактивного DPPD, рекомбинантного антигена кожного теста Mycobacterium tuberculosis, с использованием клеток-хозяев Mycobacterium smegmatis и Escherichia coli.Может J Microbiol. 2004; 50:97–105. [PubMed] [Google Scholar]
Лопес Л.К., Телес С.А., Соуза А.С., Рабахи М.Ф., Типпл А.Ф. Риск туберкулеза среди медсестер из Центральной Бразилии. Am J Infect Control. 2008; 36: 148–151. [PubMed] [Google Scholar]
Лященко К., Манка С., Коланджели Р., Хейбель А., Уильямс А., Дженнаро М.Л. Использование коктейлей специфических антигенов комплекса микобактерий туберкулеза для кожных тестов, специфичных для туберкулеза. Заразить иммун. 1998;66:3606–3610. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
Mackin LA.Скрининг на туберкулез в учреждениях первичной медико-санитарной помощи. Lippincotts Prim Care Pract. 1998; 2: 599–610. викторина 611–593. [PubMed] [Google Scholar]
Maes M, Gimenez JF, D’Alessandro A, De Waard JH. Стабильность человеческого, бычьего и птичьего очищенного белкового производного туберкулина (PPD) J Infect Dev Ctries. 2011;5:781–785. [PubMed] [Google Scholar]
Mahairas GG, Sabo PJ, Hickey MJ, Singh DC, Stover CK. Молекулярный анализ генетических различий между Mycobacterium bovis BCG и вирулентными M.крупный рогатый скот J Бактериол. 1996; 178:1274–1282. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
Masucci P, McAlpine KL. Биохимические исследования бактериальных производных. X. Получение белка туберкулезной палочки человека МА-100. Proc Soc Exp Biol Med. 1930; 27: 661–663. [Google Scholar]
Мехта С.Р., МакГрудер С., Луни Д., Джонс С., Смит Д.М. Различия в туберкулиновой реактивности, установленной в программе обследования здоровья сотрудников администрации ветеранов. Клин Вакцина Иммунол. 2009; 16: 541–543.[Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
Мустафа А.С. Биотехнология в разработке новых вакцин и диагностических реагентов против туберкулеза. Карр Фарм Биотехнолог. 2001; 2: 157–173. [PubMed] [Google Scholar]
Мустафа А.С. Разработка новых вакцин и диагностических реагентов против туберкулеза. Мол Иммунол. 2002; 39: 113–119. [PubMed] [Google Scholar]
Эттингер Т., Холм А., Мтони И.М., Андерсен А.Б., Хаслоов К. Картирование эпитопа секретируемого белка MPT64 Mycobacterium tuberculosis, вызывающего гиперчувствительность замедленного типа.Заразить иммун. 1995;63:4613–4618. [Статья бесплатно PMC] [PubMed] [Google Scholar]
Olsen AW, Hansen PR, Holm A, Andersen P. Эффективная защита от Mycobacterium tuberculosis путем вакцинации одним субдоминантным эпитопом антигена ESAT-6. Евр Дж Иммунол. 2000;30:1724–1732. [PubMed] [Google Scholar]
Pollock JM, McNair J, Bassett H, et al. Специфические реакции гиперчувствительности замедленного типа на ESAT-6 идентифицируют крупный рогатый скот, инфицированный туберкулезом. Дж. Клин Микробиол. 2003; 41: 1856–1860.[Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
Rangel-Frausto MS, Ponce-De-Leon-Rosales S, Martinez-Abaroa C, Haslov K. Туберкулез и качество туберкулина: лучшие намерения, вводящие в заблуждение результаты. Infect Control Hosp Epidemiol. 2001; 22: 481–484. [PubMed] [Google Scholar]
Рао В.Г., Гопи П.Г., Ядав Р. и др. Ежегодный риск заражения туберкулезом среди племенного населения центральной Индии. Троп Мед Int Health. 2008; 13:1372–1377. [PubMed] [Google Scholar]
Renshaw PS, Panagiotidou P, Whelan A, Gordon SV, Hewinson RG, Williamson RA, Carr MD.Убедительные доказательства того, что основные Т-клеточные антигены комплекса Mycobacterium tuberculosis ESAT-6 и CFP-10 образуют плотный комплекс 1:1, и характеристика структурных свойств ESAT-6, CFP-10 и ESAT-6* Комплекс КФП-10. Значение для патогенеза и вирулентности. Дж. Биол. Хим. 2002; 277:21598–21603. [PubMed] [Google Scholar]
Rhodes SG, Gavier-Widen D, Buddle BM, Whelan AO, Singh M, Hewinson RG, Vordermeier HM. Антигенная специфичность при экспериментальном туберкулезе крупного рогатого скота. Заразить иммун.2000;68:2573–2578. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
Rowland SS, Ruckert JL, Cummings PJ. Белковые структуры с низкой молекулярной массой в фильтратах культур микобактерий и очищенных белковых производных. FEMS Immunol Med Microbiol. 1999; 23:21–25. [PubMed] [Google Scholar]
Sbarbaro JA. Антигены кожных тестов: оценка, время которой пришло. Ам преподобный Респир Дис. 1978; 118:1–5. [PubMed] [Google Scholar]
Schiller I, Vordermeier HM, Waters WR, et al. Сравнение активности туберкулина с использованием гамма-интерферона для диагностики туберкулеза крупного рогатого скота.Ветеринар Рек. 2010; 167:322–326. [PubMed] [Google Scholar]
Seibert FB. Выделение и свойства очищенного белкового производного туберкулина. Ам преподобный Туберк. 1934; 30: 713–720. [Google Scholar]
Seibert FB, Glen JT. PPD-S состоял примерно из 92,1% белка, 5,9% полисахаридов и 1,2% нуклеиновой кислоты. Ам преподобный Туберк. 1941; 44: 9–24. [Google Scholar]
Sgountzos V, Simopoulou S, Kretsou S, Sakayianni K, Pavlerou S, Gourgoulianis K, Grigorakos L. Сравнительное исследование RT23 и туберкулина Мерье, протестированных на здоровых добровольцах.Int J Tuberc Lung Dis. 2009; 13:312–316. [PubMed] [Google Scholar]
Shigeto E. [Очищенные белковые производные, полученные из Mycobacterium tuberculosis (PPD) и M. intracellulare (PPD-B) в дифференциальной диагностике микобактериозов] Kekkaku. 1990; 65: 701–709. [PubMed] [Google Scholar]
Шингадия Д., Новелли В. Туберкулиновая кожная проба: сто, а не выход? Арч Дис Чайлд. 2008; 93: 189–190. [PubMed] [Google Scholar]
Shrestha KB, Malla P, Jha KK, Shakya TM, Akhtar M, Gunneberg C, van der Werf MJ.Первое национальное туберкулиновое обследование в Непале. Int J Tuberc Lung Dis. 2008; 12: 909–915. [PubMed] [Google Scholar]
Teixeira L, Maciel E, Dutra ME, Perkins MD, Johnson JL, do Valle Dettoni V. Одновременное сравнение реактивности очищенного белкового производного RT-23 и туберсола у медицинских работников в Витории, Бразилия . Int J Tuberc Lung Dis. 2000;4:1074–1077. [PubMed] [Google Scholar]
Turk JL. Фон Пирке, аллергия и инфекционные заболевания: обзор. JR Soc Med. 1987; 80: 31–33.[Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
Ulea I, Murgoci G, Popa ML, Popa L, Stavri H. Сравнительное исследование туберкулинов RT23 и IC-65, испытанных на детях с туберкулезом. Роум Арч Микробиол Иммунол. 2010;69:75–78. [PubMed] [Google Scholar]
Ван Пинкстерен Л.А., Равн П., Аггер Э.М., Поллок Дж., Андерсен П. Диагностика туберкулеза на основе двух специфических антигенов ESAT-6 и CFP10. Клин Диагн Лаб Иммунол. 2000;7:155–160. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
Vashishtha VM, John TJ.Распространенность инфекции Mycobacterium tuberculosis у детей в Западном Уттар-Прадеше. Индийский педиатр. 2010;47:97–100. [PubMed] [Google Scholar]
Villarino ME, Burman W, Wang YC, et al. Сопоставимая специфичность двух коммерческих туберкулиновых реагентов у лиц с низким риском туберкулезной инфекции. ДЖАМА. 1999; 281:169–171. [PubMed] [Google Scholar]
Villarino ME, Brennan MJ, Nolan CM, et al. Сравнительное тестирование действующих (PPD-S1) и предложенных (PPD-S2) эталонных стандартов туберкулина.Am J Respir Crit Care Med. 2000; 161:1167–1171. [PubMed] [Google Scholar]
Wang Z, Potter BM, Gray AM, Sacksteder KA, Geisbrecht BV, Laity JH. Структура раствора антигена MPT64 Mycobacterium tuberculosis определяет новое семейство белков бета-захвата. Дж Мол Биол. 2007; 366: 375–381. [PubMed] [Google Scholar]
ВОЗ. Доклад Всемирной организации здравоохранения за 2011 г. 2011 г. Глобальная борьба с туберкулезом. [Google Scholar]
Wu X, Zhang L, Zhang J, Zhang C, Zhu L, Shi Y. Рекомбинантный белок-мишень 6 раннего секретируемого антигена в качестве антигена кожного теста для специфического выявления инфекции Mycobacterium tuberculosis.Клин Эксп Иммунол. 2008; 152:81–87. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
Yang HL, Troudt J, Grover A, et al. Три белковых коктейля опосредуют ответы ГЗТ, неотличимые от PPD в модели Mycobacterium tuberculosis на морских свинках. Infect Immun 2011 [бесплатная статья о PMC] [PubMed] [Google Scholar]
Вакцина БЦЖ AJV — сводка характеристик продукта (SmPC)
Эта информация предназначена для медицинских работников
Вакцина БЦЖ AJV, порошок и растворитель для приготовления суспензии для инъекций.
После разведения 1 доза (0,1 мл) для взрослых и детей в возрасте 12 месяцев и старше содержит:
Mycobacterium bovis BCG (Bacillus Calmette-Guerin), датский штамм 1331, живая аттенуированная, 2-8 x 10 ⁵ КОЕ.
После восстановления 1 доза (0,05 мл) для детей в возрасте до 12 месяцев содержит:
Mycobacterium bovis BCG (Bacillus Calmette-Guerin), датский штамм 1331, живая аттенуированная, 1-4 x 10 ⁵ КОЕ.
Это многодозовый контейнер. См. раздел 6.5 для получения информации о количестве доз во флаконе.
Полный список вспомогательных веществ см. в разделе 6.1.
Порошок и растворитель для приготовления суспензии для инъекций.
Белый кристаллический порошок (может быть трудно увидеть из-за небольшого количества порошка во флаконе).
Растворитель представляет собой бесцветный раствор без видимых частиц.
Активная иммунизация против туберкулеза.
Вакцина БЦЖ
AJV должна использоваться на основе национальных официальных рекомендаций.
Дозировка:
Взрослые и дети в возрасте 12 месяцев и старше:
Дозу 0,1 мл восстановленной вакцины вводят строго внутрикожно путем.
Младенцы в возрасте до 12 месяцев:
Дозу 0,05 мл восстановленной вакцины вводят строго внутрикожно путем.
Следует ознакомиться с национальными рекомендациями относительно необходимости туберкулинового тестирования перед введением вакцины БЦЖ AJV.
Способ введения:
Место инъекции должно быть чистым и сухим. Если антисептики (такие как спирт) наносятся на кожу тампоном, им нужно дать полностью испариться перед тем, как сделать инъекцию.
Вакцину БЦЖ
AJV должен вводить персонал, обученный технике внутрикожного введения.
Вакцину следует вводить строго внутрикожно в руку над дистальным прикреплением дельтовидной мышцы к плечевой кости (ок.одну треть вниз по плечу), следующим образом:
Кожа натянута между большим и указательным пальцами.
Иглу следует вводить почти параллельно поверхности кожи и медленно (наклоном вверх) вводить примерно на 2 мм в поверхностные слои дермы.
Во время введения игла должна быть видна сквозь эпидермис.
Инъекция вводится медленно.
Приподнятый побелевший пузырь — признак правильной инъекции.
Место инъекции лучше не прикрывать, чтобы ускорить заживление.
Информацию об ожидаемой реакции после успешной вакцинации вакциной БЦЖ AJV см. в разделе 4.8.
Вакцину БЦЖ
AJV следует вводить с помощью шприца объемом 1 мл, разделенного на сотые доли мл (1/100 мл), оснащенного короткой иглой со скошенной кромкой (25G/0,50 мм или 26G/0,45 мм). Для введения вакцины не следует использовать струйные инъекторы или устройства для многократного прокола.
Инструкции по восстановлению вакцины перед введением см. в разделе 6.6.
Вакцину БЦЖ
AJV не следует вводить лицам, о которых известно, что они гиперчувствительны к активному веществу или любым вспомогательным веществам, перечисленным в разделе 6.1.
Вакцинация должна быть отложена у лиц, страдающих острой тяжелой лихорадкой или с генерализованными инфицированными кожными заболеваниями. Экзема не является противопоказанием, но в месте прививки не должно быть поражений.
Вакцину БЦЖ
AJV не следует вводить лицам, проходящим лечение системными кортикостероидами или другим иммуносупрессивным лечением, включая лучевую терапию.Сюда также входят младенцы, подвергшиеся иммуносупрессивной терапии внутриутробно или при грудном вскармливании, пока остается возможным постнатальное влияние иммунного статуса младенца (например, лечение матери антагонистами ФНО-α).
Кроме того, вакцину БЦЖ AJV нельзя вводить лицам, страдающим злокачественными заболеваниями (например, лимфома, лейкемия, болезнь Ходжкина или другие опухоли ретикуло-эндотелиальной системы), лицам с первичным или вторичным иммунодефицитом, лицам с ВИЧ-инфекцией, в том числе детей, рожденных от ВИЧ-позитивных матерей.
У лиц с сомнительным иммунным статусом вакцинацию БЦЖ следует отложить до оценки иммунного статуса.
Эффект вакцинации БЦЖ может быть преувеличен у пациентов с ослабленным иммунитетом, и возможна генерализованная БЦЖ-инфекция.
Вакцину БЦЖ
AJV не следует вводить пациентам, получающим противотуберкулезные препараты.
Хотя анафилаксия встречается редко, во время вакцинации всегда должны быть доступны средства для ее лечения.По возможности за пациентами следует наблюдать на предмет аллергической реакции в течение 15–20 минут после проведения иммунизации.
Людям с положительной туберкулиновой реакцией (см. национальные рекомендации по определению положительной туберкулиновой реакции) вакцинация не требуется. Введение вакцины таким людям может привести к тяжелой местной реакции.
Слишком глубокое введение вакцины увеличивает риск выделения язвы, лимфаденита и образования абсцесса. См. раздел 4.2 для способа введения.
Вакцину БЦЖ
AJV ни при каких обстоятельствах нельзя вводить внутрисосудисто.
В отношении побочных эффектов, вызванных БЦЖ-инфекцией, и чувствительности штамма к противотуберкулезным препаратам см. раздел 4.8.
Потенциальный риск апноэ и необходимость респираторного мониторинга в течение 48–72 часов следует учитывать при проведении серии первичной иммунизации глубоко недоношенных детей (родившихся ≤ 28 недель гестации) и особенно у детей с предшествующей историей респираторной незрелости.
Поскольку польза вакцинации для этой группы младенцев высока, вакцинацию не следует откладывать или откладывать.
Сообщалось о случаях воспалительного синдрома восстановления иммунитета (ВСВИ) после начала антиретровирусной терапии у ВИЧ-инфицированных детей или после начала лечения других тяжелых иммунодефицитов у детей, ранее вакцинированных БЦЖ. Сообщалось о случаях аденита, гнойного аденита, гнойных выделений, изъязвлений кожи, абсцессов кожи, лихорадки в связи с ВСВИ, которые появлялись в течение недель или месяцев после начала иммунотерапии.Клиницистам следует помнить об этом синдроме при лечении пациентов с первичным или вторичным иммунодефицитом, ранее вакцинированных БЦЖ.
Вакцина БЦЖ
AJV содержит менее 1 ммоль калия (39 мг) и натрия (23 мг) на дозу и практически не содержит калия и натрия.
Прослеживаемость
Для улучшения прослеживаемости биологических лекарственных препаратов необходимо четко записывать название и номер партии вводимого препарата.
Внутрикожная вакцинация БЦЖ может проводиться одновременно с инактивированными или живыми вакцинами, включая комбинированные вакцины против кори, эпидемического паротита и краснухи.
Другие вакцины, которые следует вводить одновременно с вакциной БЦЖ AJV, не следует вводить в одну и ту же руку. Если вакцина не вводится одновременно, между введениями любых двух живых вакцин обычно должен пройти интервал не менее четырех недель.
Рекомендуется не проводить дальнейшую вакцинацию в той группе, в которой проводилась вакцинация БЦЖ, в течение 3 месяцев из-за риска регионарного лимфаденита.
Беременность
Хотя вакцина БЦЖ AJV не оказывает вредного воздействия на плод, вакцинация во время беременности не рекомендуется.
Грудное вскармливание
Хотя вакцина БЦЖ AJV не оказывает вредного воздействия на ребенка, находящегося на грудном вскармливании, вакцинация матери не рекомендуется во время лактации.
Однако в районах с высоким риском заражения туберкулезом вакцину БЦЖ AJV можно вводить во время беременности или кормления грудью, если польза от вакцинации превышает риск.
Фертильность
Нет доступных клинических или неклинических данных о возможном влиянии вакцины БЦЖ AJV на мужскую или женскую фертильность.
Вакцина БЦЖ AJV не влияет или оказывает незначительное влияние на способность управлять автомобилем и работать с механизмами.
Ожидаемая реакция на успешную вакцинацию вакциной БЦЖ AJV включает уплотнение в месте инъекции с последующим местным поражением, которое может изъязвляться через несколько недель и заживать в течение нескольких месяцев, оставляя небольшой плоский рубец.
Местная реакция может включать покраснение и болезненность.
Это также может включать увеличение регионарного лимфатического узла до < 1 см.
Нежелательные эффекты вакцины включают следующее:
Необычный
(≥1/1000 до <1/100)
Редкий
(≥1/10000 до <1/1000)
Болезни крови и лимфатической системы
• Увеличение регионарного лимфатического узла > 1 см
—
Расстройство нервной системы
• Головная боль
—
Заболевания опорно-двигательного аппарата и соединительной ткани
—
• Остеит
Инфекции и инвазии
• Гнойный лимфаденит
• Остеомиелит
• Абсцесс в месте инъекции
Общие расстройства и состояния в месте введения
• Лихорадка
• Изъязвление в месте инъекции
• Выделения из места инъекции
—
Нарушения иммунной системы
—
• Анафилактическая реакция
• Аллергическая реакция
Апноэ у глубоко недоношенных детей (рожденных ≤ 28 недель гестации) (см. раздел 4.4).
Во время пострегистрационного наблюдения за безопасностью сообщалось об обмороках среди пациентов, получающих инъекции. Сообщалось также о судорогах и судорогах.
Чрезмерный ответ на вакцину БЦЖ AJV может привести к язве с выделениями. Это может быть связано с непреднамеренной подкожной инъекцией или чрезмерной дозировкой. Язву следует подсушивать и избегать трения (например, тесной одеждой).
Следует обратиться за консультацией к эксперту в отношении соответствующего режима лечения системных инфекций или персистирующих местных инфекций после вакцинации вакциной БЦЖ AJV.
Чувствительность штамма БЦЖ к антибиотикам:
Раздел 5.1 включает таблицу с минимальными ингибирующими концентрациями (МИК) для некоторых противотуберкулезных препаратов по отношению к датскому штамму БЦЖ 1331 [согласно определению Bactec 460].
МИК для изониазида составляет 0,4 мг/л. Нет единого мнения относительно того, следует ли классифицировать Mycobacterium bovis как чувствительные, среднечувствительные или устойчивые к изониазиду, если МПК составляет 0,4 мг/л. Однако на основании критериев, установленных для Mycobacterium tuberculosis , этот штамм можно считать обладающим промежуточной чувствительностью.
Сообщение о предполагаемых побочных реакциях
Важно сообщать о предполагаемых нежелательных реакциях после регистрации лекарственного средства. Это позволяет осуществлять постоянный мониторинг соотношения польза/риск лекарственного средства. Медицинских работников просят сообщать о любых предполагаемых нежелательных реакциях через схему желтой карточки по адресу: www.mhra.gov.uk/yellowcard.
Передозировка увеличивает риск гнойного лимфаденита и может привести к чрезмерному образованию рубцов.
Сильная передозировка увеличивает риск нежелательных осложнений БЦЖ.
Для лечения диссеминированных инфекций с помощью БЦЖ см. раздел 4.8.
Фармакотерапевтическая группа (код АТХ): J 07 AN 01.
Значения МИК для выбранных противотуберкулезных препаратов против датского штамма БЦЖ 1331 с использованием метода Bactec 460 следующие:
Препарат
Минимальная ингибирующая концентрация (MIC)
Изониазид
0.4 мг/л
Стрептомицин
2,0 мг/л
Рифампицин
2,0 мг/л
Этамбутол
2,5 мг/л
Датский штамм БЦЖ 1331 устойчив к пиразинамиду.
Вакцинация вакциной БЦЖ AJV вызывает клеточно-опосредованный иммунный ответ, который обеспечивает различную степень защиты от инфекции M.туберкулез . Продолжительность иммунитета после вакцинации БЦЖ неизвестна, но есть некоторые признаки ослабления иммунитета через 10 лет.
Вакцинированные люди обычно становятся туберкулинпозитивными через 6 недель. Положительный кожный туберкулиновый тест свидетельствует о реакции иммунной системы на предшествующую вакцинацию БЦЖ или на микобактериальную инфекцию. Однако связь между поствакцинальной туберкулиновой кожной пробой и степенью защиты, обеспечиваемой БЦЖ, остается неясной.
Не относится к вакцинам.
Нет соответствующих данных.
Порошок:
Глутамат натрия
Растворитель:
Гептагидрат сульфата магнияДикалийфосфатМоногидрат лимонной кислотыМоногидрат L-аспарагинаЖелезно-аммонийцитратГлицерин 85%Вода для инъекций Вакцину БЦЖ
AJV нельзя смешивать с другими лекарственными средствами, за исключением указанных в разделе 6.6.
2 года.
С микробиологической точки зрения продукт следует использовать сразу после восстановления. Стабильность при использовании в отношении жизнеспособности была продемонстрирована в течение 4 часов после разведения.
Хранить в холодильнике (2–8 °C).
Не замораживать. Хранить в оригинальной упаковке для защиты от света.
Условия хранения после восстановления вакцины см. в разделе 6.3.
Порошок во флаконе из янтарного стекла, тип I, с бромбутиловой пробкой и алюминиевым колпачком; 1 мл растворителя во флаконе из стекла типа I с хлорбутиловой пробкой и алюминиевым колпачком.
Упаковки по 1, 5, 10 флаконов и 1 флакон, включая 1 набор для однократной инъекции (один полипропиленовый шприц и две инъекционные иглы (одна длинная для добавления растворителя и одна короткая для внутрикожной инъекции)).
Один флакон разведенной вакцины содержит 1 мл, что соответствует 10 дозам для взрослых и детей в возрасте 12 месяцев и старше (0,1 мл) или 20 дозам для детей в возрасте до 12 месяцев (0,05 мл).
Не все размеры упаковки могут продаваться.
Восстановление:
Для восстановления следует использовать только растворитель, поставляемый с вакциной БЦЖ AJV.
Резиновую пробку нельзя протирать никакими антисептиками или моющими средствами. Если спирт используется для протирки резиновой пробки флакона, ему необходимо дать испариться до того, как пробка будет проткнута иглой шприца.
Перед введением вакцину следует визуально осмотреть как до, так и после разведения на наличие посторонних частиц.
С помощью шприца с длинной иглой перенесите во флакон объем растворителя, указанный на этикетке.Осторожно переверните флакон несколько раз, чтобы полностью ресуспендировать лиофилизированную БЦЖ. НЕ ТРЯСАТЬ. Аккуратно встряхивайте флакон с ресуспендированной вакциной перед набором каждой последующей дозы. При наборе в шприц суспензия вакцины должна быть однородной, слегка непрозрачной и бесцветной.
С микробиологической точки зрения продукт следует использовать сразу после восстановления. Стабильность при использовании в отношении жизнеспособности была продемонстрирована в течение 4 часов после разведения.
Любая неиспользованная вакцина или отходы должны быть утилизированы в соответствии с местными требованиями.
AJ Vaccines A/S
5, Artillerivej DK-2300 Копенгаген, Южная Дания
Дата первого разрешения: 9 сентября 2002 г.
Дата последнего обновления: 26 октября 2007 г.
Сравнительное исследование японских и британских штаммов вакцины БЦЖ у новорожденных на JSTOR
Абстрактный
Было проведено проспективное исследование британской и японской вакцин БЦЖ у новорожденных, в ходе которого 317 и 285 младенцев были случайным образом распределены и вакцинированы соответственно британской и японской вакцинами БЦЖ.Было проведено четыре контрольных осмотра, в среднем 98% исследуемой когорты посетили все сеансы. Около половины младенцев не давали видимой реакции в конце первой недели. У всех к концу третьего месяца были характерные БЦЖ-рубцы со средним диаметром 4,6 мм. Реакция Манту проводилась в 6 месяцев. Было зарегистрировано среднее уплотнение кожи 7,2 мм (стандартное отклонение 5,3 мм). Было обнаружено, что значительно более высокая доля младенцев, получавших японскую БЦЖ, конвертировала туберкулин (74.7%) по сравнению с теми, кто получал британскую БЦЖ (51,4%). Практика грудного вскармливания и туберкулиновый статус матерей не оказывали заметного влияния на реакцию младенцев на туберкулин.
Информация о журнале
Издается совместно с Азиатско-Тихоокеанским академическим консорциумом общественного здравоохранения (APACPH). Asia Pacific Journal of Public Health (APJPH) — это рецензируемый журнал, который публикует 8 выпусков в год и посвящен вопросам здравоохранения в Азиатско-Тихоокеанском регионе.APJPH публикует оригинальные статьи по вопросам, связанным с общественным здравоохранением, в том числе о последствиях для практического применения в профессиональном образовании и службах общественного здравоохранения и первичной медико-санитарной помощи, которые вызывают озабоченность и актуальность для Азиатско-Тихоокеанского региона.
Информация об издателе
Сара Миллер МакКьюн основала издательство SAGE Publishing в 1965 году для поддержки распространения полезных знаний и просвещения мирового сообщества. SAGE является ведущим международным поставщиком инновационного высококачественного контента, который ежегодно публикует более 900 журналов и более 800 новых книг, охватывающих широкий спектр предметных областей.Растущий выбор библиотечных продуктов включает архивы, данные, тематические исследования и видео. Контрольный пакет SAGE по-прежнему принадлежит нашему основателю, а после ее жизни перейдет в собственность благотворительного фонда, который обеспечивает постоянную независимость компании. Основные офисы расположены в Лос-Анджелесе, Лондоне, Нью-Дели, Сингапуре, Вашингтоне и Мельбурне. www.sagepublishing.com
Реагент для кожных тестов молекулярного состава для диагностики туберкулеза крупного рогатого скота, совместимый с вакцинацией против болезни Джона
Выбор антигенов для включения в MDT
Для выбора дополнительных антигенов, которые можно добавить к трем антигенам ТЛЧ ESAT-6, CFP -10 и Rv3615c мы подготовили список антигенов-кандидатов (таблица 1).Эти белки были выбраны, потому что в ранее опубликованных и неопубликованных исследованиях в нашей лаборатории они продемонстрировали многообещающее специфическое распознавание у инфицированного крупного рогатого скота, но не у необработанного крупного рогатого скота или животных, сенсибилизированных микобактериями окружающей среды. Однако они не продемонстрировали никакой полезности для DIVA, поскольку животные, вакцинированные БЦЖ, распознавали эти белки. Восемнадцать белков были перечислены и получены либо в виде рекомбинантных белков, либо в виде набора перекрывающихся 20-мерных пептидов. Чтобы уменьшить пул кандидатов, антигены применяли в IGRA с использованием криоконсервированных мононуклеарных клеток периферической крови (PBMC) крупного рогатого скота, инфицированного естественным путем M.bovis или от животных, свободных от bTB (по 14 особей). Рекомбинантные ESAT-6, CFP-10 и Rv3615c также были включены в этот скрининг. Как и ожидалось при тестировании образцов из беспородных популяций, на антигены наблюдался широкий диапазон ответов (таблица 1). Критерии отбора для включения антигена в реагент MDT заключались в том, что они не вызывали ответов у неинфицированных животных, но стимулировали статистически значимо более сильные ответы в РВМС инфицированных животных по сравнению с неинфицированным контролем.Четыре из 18 протестированных антигенов соответствовали этим критериям (Rv1789, Rv3478, Rv3616c и Rv3810, выделенные жирным шрифтом в таблице 1). Кроме того, ответы на ESAT-6, CFP-10 и Rv3615c также были сильнее у РВМС инфицированных животных по сравнению с неинфицированным контролем. В дополнение к четырем новым антигенам мы также включили в MDT ранее описанный антиген Rv3020c ^13,14 . Таким образом, состав MDT, который должен быть использован в кожном тесте in vivo и IGRA in vitro, описанных в следующих параграфах, был следующим: Rv1789, Rv3020c, Rv3478, Rv3615c, Rv3616c, Rv3810, Rv3874 (CFP-10) и Rv3875. (ЭСАТ-6).Этот прототип MDT был составлен как коктейль из 7 рекомбинантных белков (Rv1789, Rv3020c, Rv3478, Rv3615c, Rv3810, Rv3874 и Rv3875) и одного набора перекрывающихся синтетических пептидов, представляющих Rv3616c (дополнительная таблица 2). Ответы, вызванные MDT, сравнивали с коктейлем DST рекомбинантных белков ESAT-6, CFP-10 и Rv3615c.
Таблица 1. Сводная информация об антигенах и реакциях PBMC на IFN-γ.
Ответы кожных тестов на МДТ
На следующем этапе этого проекта мы провели кожные тесты с реагентом МДТ на четырех группах животных: экспериментально M.bovis инфицированных животных (n = 22), естественно M. bovis инфицированных животных (n = 21), наивные контроли (n = 30) и группа телят, вакцинированных против ЯД с помощью вакцины Gudair (n = 29). MDT, DST, PPD-B и PPD-A вводили по схеме латинского квадрата. Результаты показаны на рис. 1. Как и ожидалось, сильные ответы PPD-B наблюдались в обеих группах из инфицированных M. bovis животных, что приводило к ответу CCT с сильным смещением PPD-B (PPD-B минус PPD-A) ( Рисунок 1). У экспериментально инфицированных телят реакция кожи на МДТ была значительно сильнее, чем на ТЛЧ ( p < 0.0001), и ответы на ТЛЧ также были значительно ниже по сравнению с CCT ( p = 0,0060). Значительно повышенная реактивность МДТ по сравнению с ТЛЧ была подтверждена при тестировании естественно инфицированного крупного рогатого скота (рис. 1, p = 0,0012). Интересно, что MDT также индуцировал значительно более сильные реакции, чем определено с помощью CCT (рис. 1, p < 0,0001). Специфичность как ТЛЧ, так и МДТ была подтверждена их невосприимчивостью у ранее не подвергавшегося лечению крупного рогатого скота (рис. 1). Эффективная сенсибилизация к антигенам MAP после вакцинации Гудаиром была продемонстрирована сильными кожными тестами, наблюдаемыми после PPD-A, которые также приводили к сильно смещенным PPD-A ответам CCT (рис.1). С другой стороны, ТЛЧ и МДТ не индуцировали кожных тестов или вызывали очень слабые реакции у животных, вакцинированных Гудаиром, что еще больше подчеркивает их специфичность (рис. 1). Таким образом, мы смогли продемонстрировать в этой серии экспериментов, что МДТ индуцирует кожные тесты с повышенной силой сигнала по сравнению с ТЛЧ при сравнительно высокой специфичности.
Рисунок 1
Сравнение кожных тестов, вызванных МДТ и ТЛЧ, у крупного рогатого скота. Реакции кожных проб на реагенты PPD, DST и MDT измеряли через 72 часа после инъекции у крупного рогатого скота, экспериментально инфицированного M.bovis ( n = 22), крупный рогатый скот, естественно инфицированный M. bovis (n = 21), наивный контроль ( n = 30) и вакцины Гудаир (n = 29). Результаты выражены как разница в толщине кожи между показаниями до и после кожного теста. Каждый символ представляет отдельное животное, а горизонтальные линии представляют медианы группы. ** p < 0,01, **** p < 0,0001, критерий Фридмана с критерием множественных сравнений Данна.
Чтобы оценить, транслируется ли повышенная мощность сигнала, наблюдаемая при МДТ, в повышенную чувствительность при более устойчивых пороговых значениях по сравнению с ТЛЧ, мы применили диапазон пороговых значений для таблицы относительной чувствительности и специфичности ТЛЧ и МДТ и сравнили эти значения к соответствующим значениям, полученным с CCT и SCT.Как показано в Таблице 2, мы оценили влияние различных пороговых значений ТЛЧ и МДТ на чувствительность и специфичность в диапазоне от ≥ 2 мм (пороговое значение, обычно применяемое к ТЛЧ) до ≥ 5 мм. При всех применяемых пороговых значениях МДТ продемонстрировал большую чувствительность у экспериментально инфицированных и инфицированных естественным путем животных по сравнению с ТЛЧ, причем эта улучшенная чувствительность стала статистически значимой при пороговом значении ≥ 5 мм (с относительной чувствительностью 100% и 73% для MDT и DST соответственно у экспериментально инфицированного крупного рогатого скота и 71% и 29% соответственно у естественно инфицированного крупного рогатого скота, p < 0.05 и p < 0,01, табл. 2). В обеих группах инфицированного крупного рогатого скота чувствительность МДТ при всех применяемых пороговых значениях соответствовала чувствительности ТЗК с перекрывающимся 95% ДИ (таблица 2). Напротив, чувствительность MDT при всех применяемых пороговых значениях была выше по сравнению с CCT при интерпретации при пороговых значениях > 4 мм и > 2 мм в обеих группах инфицированных животных (таблица 2). Кроме того, при сравнении с CCT, интерпретируемым при пороговом значении B > A, у экспериментально инфицированного крупного рогатого скота наблюдалась эквивалентная чувствительность MDT при всех применяемых пороговых значениях.Аналогичные результаты наблюдались у естественно инфицированного крупного рогатого скота, за исключением того, что несколько более низкая чувствительность к MDT наблюдалась при более высоких пороговых значениях (≥ 4 и ≥≥ 5 мм) по сравнению с интерпретацией B > A CCT, хотя они не достичь статистической значимости. Относительная чувствительность ТЛЧ при пороговых значениях ≥ 2 и ≥ 3 мм также соответствовала CCT при пороговом значении > 4 мм у экспериментально инфицированных животных, при этом пороговое значение ТЛЧ ≥ 2 мм соответствовало относительной чувствительности для CCT при интерпретация > 2 мм и лишь немного ниже, чем CCT при интерпретации B > A в этой группе животных.В группе естественно инфицированного крупного рогатого скота ТЛЧ при пороговых значениях до ≥ 4 мм выполнялась так же, если не лучше, чем CCT, интерпретируемая при пороговых значениях > 4 и > 2 мм, с ТЛЧ ≥ 2 мм. отсечка почти соответствует относительной чувствительности для CCT с использованием интерпретации B > A.
Таблица 2 Сравнение результатов кожных тестов при определенных пороговых значениях.
Значения относительной специфичности при одних и тех же пороговых значениях, описанных выше, сравнивали после рассмотрения результатов, полученных на наивном и вакцинированном Гудаиром крупном рогатом скоте (таблица 2).У наивных контрольных животных не наблюдалось ложноположительных ответов на ТЛЧ и МДТ при любых применяемых пороговых значениях, а также при применении ТСК и ССТ при любых критериях интерпретации (специфичность 100%, таблица 2). В то время как низкие положительные ответы (2 мм) наблюдались у 3/29 вакцинированных Гудаиром животных после инъекции ТЛЧ, повышение точки отсечения ТЛЧ до ≥ 3 мм восстанавливало специфичность в этой группе до 100% (таблица 2). Аналогичным образом, инъекция МДТ индуцировала слабые кожные реакции у 4/29 и 1/29 животных в точках отсечения ≥ 2 и ≥ 3 мм соответственно, в то время как 100% специфичность восстанавливалась при применении точки отсечения ≥ 4 мм МДТ (таблица). 2).Как и ожидалось, исходя из ответов CCT с высоким смещением PPD-A, все животные, вакцинированные Gudair, дали отрицательный результат CCT при всех интерпретациях. Однако специфичность SCT была серьезно нарушена в вакцинах Gudair, из которых 79% дали положительный результат (специфичность 21%, таблица 2). В заключение мы продемонстрировали, что MDT позволяет более надежно устанавливать точки отсечки, чем это возможно для DST. Это позволило нам сопоставить показатели SCT во всех группах животных (при использовании порогового значения ≥ 4 мм для MDT) и, по крайней мере, соответствовать и, возможно, превзойти показатели CCT при применении этого порогового значения MDT.Кроме того, МДТ не снижает специфичность у животных, вакцинированных Гудаиром, как это наблюдалось для ТХТ, и, по-видимому, также преодолевает маскирующий эффект вакцинированных Гудаиром или инфицированных МАР животных, которые также инфицированы M. bovis , который возникает при использовании КСТ. у таких животных с двойной инфекцией из-за высокой реакции PPD-A.
Применение MDT в IGRA
IGRA является ценным дополнительным тестом для наблюдения, применяемым наряду с кожными тестами для максимального обнаружения инфицированных животных.Поэтому было уместно исследовать производительность MDT в этом формате теста. Образцы были получены от тех же животных, что описаны выше (22 экспериментально инфицированных, 21 естественно инфицированный крупный рогатый скот, 29 телят, вакцинированных Гудаиром, и увеличенная группа из 59 интактных животных). Образцы крови брали перед инъекцией антигена кожного теста и стимулировали in vitro с помощью MDT, DST, PPD-A и PPD-B. В пилотном эксперименте мы определили, что ТЛЧ и МДТ работают оптимально с точки зрения чувствительности и специфичности при концентрации анализа, равной 0.1 мкг/мл. PPD-A и PPD-B использовались в концентрациях, которые они применяют в программе рутинного наблюдения в ГБ (250 и 300 МЕ/мл соответственно). Результаты этого анализа показаны на рис. 2. Как и в случае ответов кожных тестов, представленных в предыдущем абзаце, МДТ индуцировала значительно более высокие уровни IFN-γ у экспериментально и естественно инфицированного крупного рогатого скота по сравнению со стимуляцией ТЛЧ (рис. 2). , p = 0,0020 и p < 0,0001 соответственно). Традиционная интерпретация IGRA основана на пороговом значении, рассчитанном путем вычитания индуцированного PPD-A IFN-γ из IFN-γ, индуцированного стимуляцией PPD-B (B-A).Обнадеживает тот факт, что, хотя ответы, вызванные ТЛЧ, у обеих категорий инфицированного крупного рогатого скота были значительно ниже, чем значения B-A (рис. 2, p < 0,0001 для экспериментально и естественно инфицированных животных), индуцированный МДТ IFN- γ-ответы существенно не различались, что еще раз подтверждает, что MDT является более мощным индуктором IFN-γ у инфицированных животных, чем DST (рис. 2). Как неинфицированные контрольные животные, так и вакцинированные Гудаиром демонстрировали сильный ответ PPD-A, который приводил к ответу B-A, смещенному на PPD-A (рис.2). Напротив, ни ТЛЧ, ни МДТ-стимулированные образцы от вакцинированных Гудаиром или неинфицированных контрольных животных не приводили к ответам IFN-γ выше фона культур без антигена (рис. 2).
Рисунок 2
Количественная оценка продукции IFN-γ in vitro, индуцированной MDT и DST. Образцы крови от крупного рогатого скота, экспериментально инфицированного M. bovis ( n = 22), крупного рогатого скота, инфицированного естественным путем M. bovis (n = 21), интактного контроля ( n = 59) и вакцины Гудаир (n 29) стимулировали in vitro с помощью PPD, реагентов DST и MDT, а продукцию IFN-γ измеряли с помощью ELISA.Каждый символ представляет отдельное животное, а горизонтальные линии представляют медианы группы. ** p < 0,01, *** p < 0,001, **** p < 0,0001, критерий Фридмана с критерием множественных сравнений Данна.
Затем мы интерпретировали эти данные, используя в качестве порога для положительного результата значение оптической плотности антигена минус ноль антигена IFN-γ при 450 нм > 0,1. Это пороговое значение, используемое в обычном тестировании системы наблюдения GB IGRA для ответов B–A и ESAT-6/CFP-10.Результаты этого анализа по четырем группам животных в отношении относительной чувствительности и специфичности показаны в таблице 3. Параллельно с результатами кожных тестов, MDT смог обнаружить как естественным, так и экспериментальным путем инфицированных M. bovis голов крупного рогатого скота с высокой относительной чувствительностью. (100% животных в обеих группах, таблица 3), что соответствует показателям считывания B-A в этих когортах. Напротив, ТЛЧ выявила значительно меньшую долю инфицированных животных (63% и 68% экспериментально или естественно инфицированных животных соответственно, различия в обеих группах были достоверными с p < 0.05, критерий Макнемара, табл. 3). Как ТЛЧ, так и МДТ продемонстрировали высокую специфичность (97–100%), сравнимую с таковой, наблюдаемой при PPD птиц и крупного рогатого скота (B–A) в двух неинфицированных группах (неинфицированные контроли и вакцины Гудаир, таблица 3).