Заболевания, вызванные условно-патогенными — Микробиология
Энтерогеморрагические кишечные палочки (ЭГКП)
К ним относятся эшерихии, являющиеся представителями нормальной микрофлоры крупного рогатого скота. Они вырабатывают шигеллоподобный цитотоксин, который связывается с 60S субъединицей рибосом и блокирует синтез белка. Затем цитотоксин поступает в кровь и вызывает поражение почек. В некоторых случаях это приводит к летальному исходу. К ЭГКП относятся серовары 0157 : Н5, 0126 : НИ, 0111 : Н(-).Иммунитет
При колибактериозах в случае эндогенных инфекций, о которых упоминалось выше, имеет место гуморальный иммунный ответ. Однако образующиеся антитела не обладают протективными свойствами и не способствуют выздоровлению. Вместе с тем иммунодефицит, обуславливающий эндогенные инфекции, способствует угнетению фагоцитоза и других неспецифических факторов защиты, что способствует нарушению естественных барьеров и распространению возбудителя. Аналогичная ситуация имеет место и при гнойных раневых инфекциях экзогенной природы. При эшерихиозах (диареях) также имеет место гуморальный иммунный ответ. В этом случае при колиэнтеритах, вызванных ЭПКП ведущую роль играют: трансплацентарная передача антител (IgG) и их проникновение из крови ребенка в кишечник; пассивная энтеральная иммунизация антителами материнского молока; продукция секреторных антител SIgA лимфоидными клетками кишечника.Экология и эпидемиология
E.coli является основным представителем нормальной микрофлоры кишечника людей и животных и с испражнениями выделяется в окружающую среду. Поэтому ее используют как санитарно-показательный микроорганизм, по которому оценивают загрязнение воды фекалиями (коли-титр, коли-индекс). В воде и почве эшерихии выживают несколько недель и даже месяцев. Они высокочувствительны к растворам обычных дезинфектантов так же, как и все другие энтеробактерии. Источником инфекции являются больные люди или бактерионосители. Заражение происходит с инфицированной пищей или водой. До 70% всех ОКЗ раннего детского возраста (до двух лет) связано с ЭПКП.Энтероинвазивные кишечные палочки (ЭИКП)
Вызывают заболевание типа дизентерии у детей и взрослых. Адгезия на энтероцитах происходит за счет капсулоподобной оболочки. Аналогично шигеллам они проникают (пенетрируют) и размножаются в энтероцитах, распространяясь между соседними клетками. Это приводит энтероцитов к гибели и образованию язв. ЭИКП вырабатывают шигеллоподобный токсин. Они относятся к сероварам 025, 0124, 0144 и др.Энтеротоксигенные кишечные палочки (ЭТКП)
Вызывают холероподобную инфекцию у детей и взрослых. Это связано с белковыми энтеротоксинами, напоминающими по механизму действия холероген. ЭТКП адгезируют на энтероцитах преимущественно за счет свих пилей, причем адгезия не сопровождается воспалительной реакцией. После колонизации энтероцитов возбудитель локализуется на поверхности клеток и продуцирует два типа энтеротоксина — термолабильный и термостабильный, которые нарушают водно-солевой обмен. Первый отличается от второго тем, что он активирует аденилатциклазу, что приводит к накоплению цАМФ (циклический аденозинмонофосфат), нарушению секреции и развитию острой диареи. Термолабильный токсин обладает иммуногенными свойствами. Термостабильный энтеротоксин действует через систему гуанилатциклазы и лишен иммуногенных свойств. ЭТКП принадлежат к сероварам 025, 0124, 0144 и др.Энтеропатогенные кишечные палочки (ЭПКП)
Вызывают колиэнтериты преимущественно у маленьких детей. Адгезия к энтероцитам происходит за счет белков наружной мембраны. Способность к инвазии и пенетрации в энтероциты ограничена. Они активно захватываются энтероцитами и их колонизируют. Наряду с этим они фагоцитируются в Пейеровых бляшках и освобождаются из лимфоцитов после их разрушения, которое происходит при участии гемолизина — фермента, продуцируемого данными эшерихиями. После разрушения бактерий особождается эндотоксин — ЛПС клеточной стенки, который вызывает системную воспалительную реакцию. Колиэнтерит вызывают ЭПКП преимущественно сероваров 026 : В6, 055 : В5 и 0111 : В4.Заболевания, вызванные условно-патогенными энтеробактериями
На протяжении последних лет значительно возросла роль условно-патогенных грамотрицательных бактерий в патологии человека. Наряду с гнойно-септическими и оппортунистическими инфекциями они довольно часто является причиной внутрибольничных заболеваний. Возбудителями воспалительных процессов различных тканей и органов и гастроэнтероколитов часто могут быть представители таких родов: Proteus, Citrobacter, Enterobacter, Hajhia, Serratia, Edwardsiella, Providencia. Микробиологическую диагностику этих заболеваний проводят так же, как и большинства кишечных инфекций. Основой ее является выделение чистых культур и идентификация их к виду с помощью определения биохимических свойств и реакции агглютинации с соответствующими антисыворотки. Материалом для исследования чаще всего служат испражнения, рвотные массы, кровь, гной, ликвор, моча, желчь, дуоденальное содержимое, секционный материал. Посевы производят на среду Эндо, Плоскирева, Левина, висмут-сульфитный агар с последующей микроскопией колоний, пересевом их на среду Олькеницького и пестрый ряд Гисса, постановкой реакции агглютинации с О-и Н-антисывороткой. В ряде случаев применяют тесты, позволяющие надежно установить вид выделенной культуры. Очень важно проводить и количественное исследование, позволяющее точно установить возбудителя заболевания. При патологических процессах, вызванных условно-патогенными бактериями, концентрация настоящего возбудителя, как правило, составляет 105-106 клеток в 1 мл исследуемого материала. Это особенно важно при выделении микробных ассоциаций. Ниже приведены основные свойства отдельных видов бактерий и особенности лабораторной диагностики вызываемых ими заболеваний.Протейные инфекции
От больных пищевые токсикоинфекции, циститы, пиелиты, плевриты, пневмонии, абсцессы, менингит, сепсис, гнойные осложнения ран и ожогов и при дисбактериозе чаще выделяют Proteus vulgaris, P.mirabilis, Ppenneri. В мазках из исследуемого материала, окрашенных по Граму, протей имеет вид грамотрицательных полиморфных палочек без спор и капсул, часто образует нитевидные формы. На средах Эндо и Плоскирева вырастают прозрачные блестящие бесцветные колонии. На висмут-сульфитном агаре через 48 часов образуются серовато-коричневые колонии, под которым формируется черно-коричневая зона. Н-форма (джутикова) на простом агаре дает характерный ползучий рост или «феномен роения». Культура имеет неприятный гнилостный запах. При посеве уколом в столбик полужидкого агара определяют подвижность. Ползучий характер роста протея используют для выделения чистых культур посевом в конденсационную воду скошенного агара методом Шукевич. — Идентификация бактерий рода протея очень проста. их легко распознать по характерным ростом на простом агаре: 85-100% культур дают «феномен роения». Дифференциацию видов проводят по биохимическим признакам. При наличии диагностических сывороток виды протея идентифицируют в реакции агглютинации. Важнейшим признаком, отличающим протея от других энтеробактерий является их способность дезаминуваты внесен в агара фенилаланин. Расписание последнего в фенилпировиноградная кислоты в присутствии FeCl2 приводит к окраске среды в зеленый цвет.Цитробактер инфекции
К роду Citrobacter входят 11 видов бактерий, которые обнаруживают в воде, почве, пищевых продуктах и других объектах окружающей среды. Они постоянно живут в кишечнике здоровых людей как представители нормоценоза. Большинство видов цитробактера не патогенны для человека. От больных энтерит, уретрит, холецистит, остеомиелит, отит (особенно у ослабленных пациентов) чаще всего выделяют Citrobacter freundii, С. koseri, С. amalonaticus. Они могут вызвать поражение дыхательных путей, септицемии, эндокардит. С. diversus время вызывает менингиты и абсцессы мозга.Энтеробактер-инфекции
К колиподибних подвижных бактерий рода Enterobacter входит 13 видов. От больных людей чаще всего выделяют Enterobacter cloacae, E.aerogenes, значительно реже — E.gergovial, E.sakasaki. Энтеробактеры редко вызывают самостоятельные инфекции. Чаще они инфицируют пациентов, в стационарах лечат антибиотиками широкого спектра действия. Как правило, заражение происходит через руки медицинского персонала. В последнее время энтеробактеры является причиной 15% всех внутрибольничных инфекций, из них около 10% септицемий. Несколько реже они вызывают менингит, контаминують хирургические ожоговые раны, поражают органы дыхательной и мочеполовой систем и желудочно-кишечного тракта. Довольно часто Есиоасае и E.aerogenes контаминують лекарственные растворы для внутривенных инъекций. В связи с отсутствием патогномоничных симптомов при клинических проявлениях заболеваний решающее значение имеет лабораторная диагностика энтеробактера-инфекций. Она включает выделение чистых культур возбудителей и их биохимическую и серологическую идентификацию. Энтеробактеры хорошо растут на простых и дифференциально-диагностических средах Эндо, Левина, Плоскирева. Лактозопозитивные штаммы образуют слизистые или неслизисти колонии. На агаре Эндо они малиновый или розовый цвет с металлическим блеском или без него. На среде Плоскирева они, как правило, приобретают желтоватый оттенок. В мазках из колоний видно грамотрицательные палочки, отдельные штаммы имеют капсулу. Идентификацию выделенных культур проводят пока только по биохимическим свойствам. Перважно большинство штаммов ферментируют глюкозу, лактозу, мальтозу, маннит, сахарозу, трегалозу, не выделяют индол и сероводород, разжижают желатин, дают положительную реакцию Фогес-Плоскауера. В ряде высокоразвитых стран начали использовать реакции слайд-агглютинации с О-и Н-сыворотками.Гафния-инфекциии
К роду Hafiiia принадлежит типичный и единственный видна / Пиа alvei. Это грамотрицательные подвижные палочки, не образующие спор и капсул, по своим морфологическим признакам подобные других энтеробактерий. их находят в почве, воде, пищевых продуктах, випорожненннях людей и животных и некоторых видов птиц. У ослабленных больных гафния могут вызвать спорадические оппортунистические инфекции (септицемии, гастроэнтериты, энтероколиты, циститы, уретриты и др.).. Чаще всего их выделяют из крови, мочи, кала, раневого содержимого, особенно на фоне других заболеваний. Лабораторная диагностика основана на выделении чистых культур и их биохимической и серологической идентификации. На средах Эндо и Плоскирева они растут в виде полупрозрачных мутноватых бесцветных колоний или оттенком цвета среды. По своему виду и размеру напоминают колонии шигелл. На среде Олькеницького не образуют газа и сероводорода. Выделенные культуры идентифицируют по биохимическим и антигенным свойствам. Гафния выделяют каталазу и не продуцирующие оксидазу. Они постоянно ферментируют арабинозу, глицерин, ксилозу, мальтозу, маннит, рамнозу и трегалозу, дают положительную реакцию Фогес-Проскауэра. При наличии диагностических сывороток окончательную идентификацию проводят в слайд-агглютинации с О-и Н-антисывороткой.Серациозы
Род Serratia является одним из старейших представителей семейства энтеробактерий. Теперь выделено 10 видов сераций, но в рутинных баклаборатория выделяют только три: Serratia marcescens, S.rubidaea,, S.liquefaciens. Раньше их считали сапрофитами и лишь в последнее время стали выделять при госпитальных бактериемия, пневмониях, энтеритах, инфекциях мочевыводящих путей, нагноениях хирургических ран и поражениях кожи. Серации часто передаются через руки медперсонала. Наиболее часто они проникают в организм через постоянные катетеры, интубационные устройства а также с растворами для различных инъекций. У наркоманов часто возникают артриты, эндокардит, остеомиелит. Исследуемый материал у больных принимают в зависимости от локализации патологических процессов. Чаще всего это кровь, гной, моча, испражнения, желчь, мокрота. В мазках серации выглядят как прямые грамотрицательные палочки, отдельные штаммы имеют капсулу. Микробиологическая диагностика основана на выделении чистых культур сераций и определения их видовой принадлежности с помощью культуральных свойств и биохимических тестов. Посевы проводят на кровяной агар, дифференциальные среды Эндо, Плоскирева и особенно МПА с ДНК-Азой, толуидиновым синим и цефалотином. На кровяном агаре S.marcescens и S.rubidaea образуют прозрачные серовато-белые колонии, гладкие или мелкозернистые. Через 24-48 ч при комнатной температуре они производят красный пигмент. На дифференциальных средах колонии бесцветные, гладкие, слегка выпуклые. На агаре с ДНК Азой и толуидиновым синим серации образуют колонии с характерным синим ободком, в то время как колонии других энтеробактерий его не имеют. Идентификацию выделенных культур проводят исключительно с помощью биохимических тестов. Серации постоянно ферментируют глицерин, мальтозу, маннит, салицин, сахарозу и сорбит. Такие спирты и углеводы, как адонит, инозит, ксилозу и целобиоза они раскладывают вариабельно, растут на цитратных средах и дают положительную реакцию Фогес-Проскауэра. К сожалению, до последнего времени не налажено промышленное изготовление диагностических сывороток, отсутствует антигенно-диагностическая схема, что не позволяет проводить серологическую идентификацию сераций.Эдвардсиелез
Среди трех видов бактерий, отнесенных к роду Edwardsiella, патогенность для человека имеет лишь E.tarda. Большая часть заболеваний эдвардсиельоз обусловлена контактом с пресной и соленой водой, а также с животными, проживающих в них или пьют их. В частности природным резервуаром E.tarda служат рыбы, рептилии моллюски, морские ежи, птицы, коровы, свиньи, собаки и т.д.. Эдвардсиелы вызывают поражения мочевыводящих путей, септицемию, менингит. Находили их и в инфицированных ранах, а также у больных острый энтероколит. Единственным надежным способом лабораторной диагностики едварсиельозу является выделение чистой культуры возбудителя и его идентификация. Материалом для исследования являются испражнения, кровь, рвотные массы, моча, желчь, спинномозговая жидкость, вода, их высевают на среды Эндо, Левина, Плоскирева и висмут-сульфитный агар. Эдвардсиелы растут в виде бесцветных полупрозрачных колоний, подобных патогенных энтеробактерий. Колонии на висмут-сульфитном агаре не имеют характерного металлического блеска, нет и почернение агара под ними. При микроскопическом исследовании культур проявляют подвижные грамотрицательные палочки, не образующие спор и капсул. При проведении биохимической идентификации выделенных культур необходимо иметь в виду, что они каталазы-положительные, но оксидазы-отрицательные, ферментируют до кислоты и газа арабинозу, глюкозу, мальтозу, маннит, маннозу и трегалозу. E.tarda выделяет индол и h3S, восстанавливает нитраты, не растет на цитратном агаре, не дает положительной реакции Фогес-Проскауэра, не гидролизует мочевину и не разжижает желатин. Серологическую идентификацию эдвардсиел используют только в крупных лабораторных центрах, но полная схема определения сероваров еще отсутствует, поскольку не изготовлены сыворотки против всех антигенных вариантов.Провиденция-инфекции
К роду Providencia принадлежат 5 видов бактерий. Долгое время их относили к роду Proteus, поскольку патогенез поражений, клинические проявления и методы диагностики были очень похожи. Типичный виjxProvidencia alcalifaciens. Все виды провиденций проявляют патогенность и могут вызвать диареи, инфекции мочевыводящих путей, септицемии, нагноения ран и ожогов. Для проведения лабораторной диагностики заболевания в лаборатории направляют кровь, мочу, стул, навоз и т.д.. Посевы проводят на дифференциально-диагностические среды Эндо, Левина,Плоскирева
Колонии, произрастающих на них, бесцветные, почти полностью прозрачны, очень похожи колоний сальмонелл и шигелл. До 40% штаммов на простом агаре могут давать феномен роения в виде деревьев, протуберанцев, но не концентрических тел, как в Proteus vulgaris. Рекомендуют использовать среду с колистином (100 мкг / мл) инозитом (1%), на котором провиденции образуют большие желтые колонии. В последнее время предложено РАМ-агар Сениора, в состав которого входят галактоза, ксилоза и манит. Колонии провиденции на этой среде имеют красный цвет, в то время как во всех других оксидазы-отрицательных бактерий они лимонно-желтые. Для определения видов пользуются также биохимическими тестами. Серологическую идентификацию выделенных культур и определение титра антител методом парных сывороток не проводят.Штамм бактерий hafnia alvei, обладающий способностью продуцировать термолабильный лт-энтеротоксин
Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано для получения термолабильного энтеротоксина (ЛТ-энтеротоксина) и анатоксина Hafnia alvei при производстве вакцин. Штамм депонирован в Государственной коллекции патогенных микроорганизмов ФГБУ «Научный центр экспертизы средств медицинского применения» Минздравсоцразвития России под номером 294. Штамм обладает высокой способностью продуцировать термолабильный ЛТ-энтеротоксин. 1 табл., 2 пр.
Предлагаемое изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано для получения термолабильного энтеротоксина (ЛТ-энтеротоксина) и анатоксина Hafnia alvei при производстве вакцин.
Техническим результатом изобретения является штамм Hafnia alvei №294, который выделен от больного с кишечной инфекцией в 2011 году в Муниципальном учреждении здравоохранения города Ишимбай республики Башкортостан, депонирован в Государственной коллекции патогенных микроорганизмов ФГБУ «Научный центр экспертизы средств медицинского применения» Минздравсоцразвития России под номером 294, обладает высокой способностью продуцировать термолабильный ЛТ-энтеротоксин.
Штамм Hafnia alvei ГКПМ №294 характеризуется следующими признаками.
По биохимическим свойствам штамм относится к семейству Enterobacteriaceae рода Hafnia alvei, поскольку при тестировании на микробиологическомй тест-системе версии «Vitek 2 Sistems: 04/01» соответствовал биохимическим свойствам этого вида.
Культуральные признаки.
Растет на обычных универсальных плотных питательных средах с образованием характерных изолированных колоний желтоватого оттенка. В мясопептонном бульоне вызывает равномерное помутнение с выпадением осадка.
Изучение факторов вирулентности показало, что штамм является редким, обладающим комплексом факторов патогенности, способным вызывать острую токсическую пневмонию мышей (гибель животных в течение 3 часов), некроз кожи кролика (3,5 см в диаметре), отек лап мышей (с разницей 95 мг), петля тонкого кишечника кролика 1,2(V/L), обладает (альфатиолзависимый, энтерогемолизин), адгезивной (положительная Д-маннозочувствительная и Д-маннозорезистентная реакция с эритроцитами цыпленка), антиинтерфероновой, антилизоцимной активностями, способный в протистоцидном тесте вызывать гибель инфузорий-туфелек в течение 45 секунд.
Данный штамм рекомендуется в качестве суперпродуцента термолабильного ЛТ-энтеротоксина и как штамм, обладающий комплексом факторов патогенности. Штамм можно использовать в производстве анатоксинов и для получения антитоксической сыворотки.
Способы определения активности ЛТ-энтеротоксина.
Субплантарное введение мышам весом 15-16 г 0,05 мл центрифугата 20-часовой бульонной культуры вызывает отек лапки более 100 мг. Аксенова Е.В., 1980 г.
Интраназальное введение 0,05 мл 20-часовой бульонной культуры вызывает острую токсическую пневмонию у белых мышей-самцов весом 15-16 г (гибель в течение 4 часов). Войно-Ясенецкая Н.К., 1957 г.
Внутримышечное введение 300 млн микробных клеток 20-часовой бульонной культуры вызывает некроз кожи кролика диаметром 3 см.
В опыте петля тонкой кишки кролика при введении 80 млн м.т. 20-часовой бульонной культуры дает положительный результат (V/L=l,2).
Гретый при 56°С в течение 45 мин центрифугат 20-часовой бульонной культуры вызывает отек лапки мышей до 30 мг, не вызывая некроза кожи кролика. Гретая при 100°С 20-часовая культура не вызывает накопления жидкости в изолированной петле тонкого кишечника кролика (V/L=0,3).
Условия хранения культуры после лиофильной сушки в ампуле или выращенной при 37°С на 0,3%-ном МПА (рН 7,2-7,4), залитым стерильным вазелиновым маслом, при температуре 4°С.
Среды для размножения — бульон Хоттингера (рН 7,2), мясопептонной агар, содержащий 5% эритроцитов кролика при температуре 37°С в течение 24 часов.
Генетические особенности: HLy+, Ent+, MS+, MR+, LT+, ALA+, AKA+. Устойчив к ампициллину, ампициллину/сульбактам, цефуроксимаксетину, чувствителен к фторхинолону.
Пример 1.
0,1 мл 1 млрд суспензии суточной агаровой культуры в физиологическом растворе сеют в стерильный бульон Хотингера (5 мл рН 7,2), инкубируют в термостате при 37°С в течение 20 часов, центрифугируют при 6000 об/мин в течение 7 минут. Полученную надосадочную жидкость (центрифугат) в объеме 0,05 мл вводят субплантарно в заднюю левую лапку мышей-самцов весом 15-18 г. Через 24 часа животных умерщвляют эфиром и ампутированные по голеностопному суставу лапки взвешивают на торсионных весах, при этом центрифугат штамма Hafnia alvei №294 давал разницу между левой и правой лапками не менее 100 мг, остальные 20 штаммов, способные продуцировать ЛТ-энтеротоксин от 65 до 90 мг. Контроли — нативный стерильный бульон Хоттингера (рН 7,2) и гретый при 56°С центрифугат 20-часовой бульонной культуры 30-35 мг, соответственно.
Результаты приведены в таблице.
Пример 2.
0,1 мл 1 млрд суспензии суточной агаровой культуры сеют в бульон Хоттингера (рН 7,2), инкубируют в термостате при 37°С в течение 20 ч и 80 млн м.т. суспензию в объеме 1 мл вводят в сегмент изолированной петли тонкого кишечника кролика. Через 16 часов животных умерщвляют воздушной эмболией и рассчитывают соотношение объема экссудата к длине сегмента (V/L). При этом 20-часовая бульонная культура штамма Hafnia alvei №294 оказалась способной давать накопление жидкости в большом количестве и показатель V/L составил 1,2. У остальных 20 штаммов, способных продуцировать ЛТ-энтеротоксин, показатель V/L колебался в пределах 0,9-1,0. При введении стерильного бульона Хоттингера и гретой при 100°С 20-часовой бульонной культуры отношение объема накопленной жидкости к длине сегмента составило 0,25 и 0,3 соответственно.
| Таблица | |||
| Сравнительные показатели ЛТ-энтеропродуцирующей активности Hafnia alvei | |||
| Номер штамма | Вид | Отек лапок (мг) | Изолированная петля тонкого кишечника (V/L) |
| 6 | Hafnia alvei №294 | 100 | 1,3 |
| 8 | -\- | 74 | 0,9 |
| 7 | -\- | 76 | 0,9 |
| 3 | -\- | 80 | 1,0 |
| 9 | -\- | 85 | 1,0 |
| 1 | -\- | 75 | 0,8 |
| 3 | -\- | 70 | 0,7 |
| 4 | -\- | 78 | 0,9 |
| Контроль | 30 | 0,25-0,3 | |
| Примечание: в таблице приведены средние данные из пяти отеков. |
Штамм бактерий Hafnia alvei, обладающий способностью продуцировать термолабильный ЛТ-энтеротоксин, депонированный в Государственной коллекции патогенных микроорганизмов III-IV групп патогенности ФГБУ «Научный центр экспертизы средств медицинского применения» Минздравсоцразвития России под номером 294.
www.findpatent.ru
штамм бактерий hafnia alvei, обладающий способностью продуцировать термолабильный лт-энтеротоксин — патент РФ 2514656
Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано для получения термолабильного энтеротоксина (ЛТ-энтеротоксина) и анатоксина Hafnia alvei при производстве вакцин. Штамм депонирован в Государственной коллекции патогенных микроорганизмов ФГБУ «Научный центр экспертизы средств медицинского применения» Минздравсоцразвития России под номером 294. Штамм обладает высокой способностью продуцировать термолабильный ЛТ-энтеротоксин. 1 табл., 2 пр.
Предлагаемое изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано для получения термолабильного энтеротоксина (ЛТ-энтеротоксина) и анатоксина Hafnia alvei при производстве вакцин.
Техническим результатом изобретения является штамм Hafnia alvei № 294, который выделен от больного с кишечной инфекцией в 2011 году в Муниципальном учреждении здравоохранения города Ишимбай республики Башкортостан, депонирован в Государственной коллекции патогенных микроорганизмов ФГБУ «Научный центр экспертизы средств медицинского применения» Минздравсоцразвития России под номером 294, обладает высокой способностью продуцировать термолабильный ЛТ-энтеротоксин.
Штамм Hafnia alvei ГКПМ № 294 характеризуется следующими признаками.
По биохимическим свойствам штамм относится к семейству Enterobacteriaceae рода Hafnia alvei, поскольку при тестировании на микробиологическомй тест-системе версии «Vitek 2 Sistems: 04/01» соответствовал биохимическим свойствам этого вида.
Культуральные признаки.
Растет на обычных универсальных плотных питательных средах с образованием характерных изолированных колоний желтоватого оттенка. В мясопептонном бульоне вызывает равномерное помутнение с выпадением осадка.
Изучение факторов вирулентности показало, что штамм является редким, обладающим комплексом факторов патогенности, способным вызывать острую токсическую пневмонию мышей (гибель животных в течение 3 часов), некроз кожи кролика (3,5 см в диаметре), отек лап мышей (с разницей 95 мг), петля тонкого кишечника кролика 1,2(V/L), обладает (альфатиолзависимый, энтерогемолизин), адгезивной (положительная Д-маннозочувствительная и Д-маннозорезистентная реакция с эритроцитами цыпленка), антиинтерфероновой, антилизоцимной активностями, способный в протистоцидном тесте вызывать гибель инфузорий-туфелек в течение 45 секунд.
Данный штамм рекомендуется в качестве суперпродуцента термолабильного ЛТ-энтеротоксина и как штамм, обладающий комплексом факторов патогенности. Штамм можно использовать в производстве анатоксинов и для получения антитоксической сыворотки.
Способы определения активности ЛТ-энтеротоксина.
Субплантарное введение мышам весом 15-16 г 0,05 мл центрифугата 20-часовой бульонной культуры вызывает отек лапки более 100 мг. Аксенова Е.В., 1980 г.
Интраназальное введение 0,05 мл 20-часовой бульонной культуры вызывает острую токсическую пневмонию у белых мышей-самцов весом 15-16 г (гибель в течение 4 часов). Войно-Ясенецкая Н.К., 1957 г.
Внутримышечное введение 300 млн микробных клеток 20-часовой бульонной культуры вызывает некроз кожи кролика диаметром 3 см.
В опыте петля тонкой кишки кролика при введении 80 млн м.т. 20-часовой бульонной культуры дает положительный результат (V/L=l,2).
Гретый при 56°С в течение 45 мин центрифугат 20-часовой бульонной культуры вызывает отек лапки мышей до 30 мг, не вызывая некроза кожи кролика. Гретая при 100°С 20-часовая культура не вызывает накопления жидкости в изолированной петле тонкого кишечника кролика (V/L=0,3).
Условия хранения культуры после лиофильной сушки в ампуле или выращенной при 37°С на 0,3%-ном МПА (рН 7,2-7,4), залитым стерильным вазелиновым маслом, при температуре 4°С.
Среды для размножения — бульон Хоттингера (рН 7,2), мясопептонной агар, содержащий 5% эритроцитов кролика при температуре 37°С в течение 24 часов.
Генетические особенности: HLy+, Ent+, MS+, MR+, LT+, ALA+, AKA+. Устойчив к ампициллину, ампициллину/сульбактам, цефуроксимаксетину, чувствителен к фторхинолону.
Пример 1.
0,1 мл 1 млрд суспензии суточной агаровой культуры в физиологическом растворе сеют в стерильный бульон Хотингера (5 мл рН 7,2), инкубируют в термостате при 37°С в течение 20 часов, центрифугируют при 6000 об/мин в течение 7 минут. Полученную надосадочную жидкость (центрифугат) в объеме 0,05 мл вводят субплантарно в заднюю левую лапку мышей-самцов весом 15-18 г. Через 24 часа животных умерщвляют эфиром и ампутированные по голеностопному суставу лапки взвешивают на торсионных весах, при этом центрифугат штамма Hafnia alvei № 294 давал разницу между левой и правой лапками не менее 100 мг, остальные 20 штаммов, способные продуцировать ЛТ-энтеротоксин от 65 до 90 мг. Контроли — нативный стерильный бульон Хоттингера (рН 7,2) и гретый при 56°С центрифугат 20-часовой бульонной культуры 30-35 мг, соответственно.
Результаты приведены в таблице.
Пример 2.
0,1 мл 1 млрд суспензии суточной агаровой культуры сеют в бульон Хоттингера (рН 7,2), инкубируют в термостате при 37°С в течение 20 ч и 80 млн м.т. суспензию в объеме 1 мл вводят в сегмент изолированной петли тонкого кишечника кролика. Через 16 часов животных умерщвляют воздушной эмболией и рассчитывают соотношение объема экссудата к длине сегмента (V/L). При этом 20-часовая бульонная культура штамма Hafnia alvei № 294 оказалась способной давать накопление жидкости в большом количестве и показатель V/L составил 1,2. У остальных 20 штаммов, способных продуцировать ЛТ-энтеротоксин, показатель V/L колебался в пределах 0,9-1,0. При введении стерильного бульона Хоттингера и гретой при 100°С 20-часовой бульонной культуры отношение объема накопленной жидкости к длине сегмента составило 0,25 и 0,3 соответственно.
| Таблица | |||
| Сравнительные показатели ЛТ-энтеропродуцирующей активности Hafnia alvei | |||
| Номер штамма | Вид | Отек лапок (мг) | Изолированная петля тонкого кишечника (V/L) |
| 6 | Hafnia alvei № 294 | 100 | 1,3 |
| 8 | — | 74 | 0,9 |
| 7 | — | 76 | 0,9 |
| 3 | — | 80 | 1,0 |
| 9 | — | 85 | 1,0 |
| 1 | — | 75 | 0,8 |
| 3 | — | 70 | 0,7 |
| 4 | — | 78 | 0,9 |
| Контроль | 30 | 0,25-0,3 | |
| Примечание: в таблице приведены средние данные из пяти отеков. | |||
ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
Штамм бактерий Hafnia alvei, обладающий способностью продуцировать термолабильный ЛТ-энтеротоксин, депонированный в Государственной коллекции патогенных микроорганизмов III-IV групп патогенности ФГБУ «Научный центр экспертизы средств медицинского применения» Минздравсоцразвития России под номером 294.
www.freepatent.ru
Гафниоз
Гафниоз (инфекционный понос, паратиф) — инфекционная болезнь, возбудитель которой размножается в кишечнике и гемолимфе пчел. Кроме медоносных пчел болеют осы. Возбудитель — Hafnia alvei — подвижная палочка длиной 1—2 мкм и шириной 0,3—0,5 мкм. Относится к семейству энтеро-бактеров. Спор не образует, грамнегативная, хорошо окрашивается всеми анилиновыми красителями. Гафния растет на обычных питательных средах. При росте на агаре в первые сутки обнаруживаются мелкие голубоватые полупрозрачные колонии, сливающиеся на вторые сутки в общее наложение с мутноватым оттенком, в последующем отмечается побурение центра колонии. При росте на МПБ среда мутнеет, иногда появляются пленки на поверхности. Микроорганизм желатин не разжижает, молоко не свертывает, на картофеле образует буровато-желтое или серое наложение с неприятным запахом. Гафния разлагает мальтозу, фруктозу, глюкозу, арабинозу, ксилозу, рамнозу, глицерин, маннит, галактозу; не разлагает лактозу, сахарозу, декстрин. Возбудитель гафниоза в пустых инфицированных ульях сохраняет жизнеспособность до 270 дней, в перге — до 300 дней, в меде при комнатной температуре — до 90 дней. Кипячение в воде вызывает его гибель в течение 1—2 мин, 0,5%-ный раствор гидроксида натрия при температуре 18—20 °С убивает микроорганизмы в течение 35—85 мин, 3—5%-ный раствор фенола или формалина — в течение 1—5 мин.
Эпизоотологические данные.
Болезнь встречается на пасеках многих стран мира. Заболевание регистрируется чаще всего в конце зимы и весной. Его появлению способствуют неблагоприятные условия содержания пчелиных семей: высокая влажность в улье, недостаточное утепление гнезд, дождливая и холодная погода и т. д. Тяжело протекает заболевание при наличии в меде пади, большого количества незапечатанного меда, недостатке перги. Возбудитель передается от больных пчелиных семей к здоровым при подкормке инфицированными медом и пергой, пользовании общей поилкой, использовании инфицированных ульев и другого пчеловодного инвентаря. В годы, благоприятные для развития болезни, заболевание протекает очень тяжело, вызывая резкое ослабление и гибель большого количества пчелиных семей.
Патогенез.
Возбудитель с кормом и водой попадает в пищеварительную систему пчел и при пониженной резистентное™ организма быстро размножается, вызывая интоксикацию. В результате нарушаются процессы расщепления и всасывания питательных веществ, усиливается перистальтика кишечника. При проникновении возбудителя в гемолимфу и его интенсивном размножении отмечают септицемию, которая приводит к гибели пчел.
Клинические признаки.
Инкубационный период длится от 3 до 14 дней. При заболевании в конце зимы отмечают возбуждение (шум) пчелиных семей, распад зимнего клуба, много пчел выходят через летковый заградитель. Ползающие пчелы выглядят слабыми, скованными в движениях, брюшко у них сильно увеличено. Часто наблюдается диарея, фекалии жидкие, клейкие, коричневого цвета, с неприятным запахом. Пчелы теряют способность к полету и погибают. Некоторые семьи ко времени выставки из зимовника вследствие гибели большого количества пчел резко ослаблены. Весной больные семьи вяло совершают очистительный облет. Передняя стенка улья и соты испачканы экскрементами желто-бурого цвета, неприятного запаха, на дне улья множество мертвых пчел. Большинство семей ослабевают и погибают. При исследовании кишечника больных пчел обнаруживают содержимое грязно-белого или светло-серого цвета. В начале лета больные семьи отстают в развитии, плохо отстраивают соты и не используют медосбор.
Диагноз.
Ставят его на основании эпизоотологических данных, результатов лабораторных исследований. Для этого выделяют чистую культуру возбудителя из мышц или гемолимфы пчел. При бактериологических исследованиях следует иметь в виду, что Hafnia alvei при 20 °С приобретает подвижность, расщепляет нитрат аммония, а при 37 °С она теряет эти свойства. Наряду с этим при диагностике гафниоза ставят биопробу на пчелах. Дифференциальный диагноз. Гафниоз необходимо отличать от колибактериоза, сальмонеллеза, септицемии, Нозематоза и падевого токсикоза.
Профилактика.
На пасеках следует строго соблюдать ветеринарно-санитарные правила содержания и кормления пчелиных семей.
Меры борьбы. При установлении заболевания пасеку объявляют неблагополучной и проводят мероприятия в соответствии с Инструкцией по предупреждению и ликвидации заразных болезней пчел. Ульи, вставные доски, потолочины, рамки тщательно очищают и орошают (из расчета 1 л на 1 м2 поверхности) одним из следующих растворов: 3%-ным горячим (70 °С) раствором гидроксида натрия при экспозиции 2 ч; теплым (30 °С) щелочным раствором формальдегида, содержащим 3 % формальдегида и 3 % гидроксида натрия, при экспозиции Зч. После дезинфекции их промывают водой и высушивают. Загрязненные экскрементами соты перетапливают на воск. Пустые соты, пригодные для дальнейшего использования, опрыскивают с обеих сторон до заполнения ячеек 1%-ным раствором од-нохлористого Йода при экспозиции 3 ч или 2%-ным раствором формальдегида при экспозиции 4 ч. Дезинфицирующий раствор удаляют встряхиванием рамки, после чего ее промывают водой и просушивают. Халаты, полотенца, лицевые сетки кипятят в воде в течение 10 мин. Воск от пчелиных семей неблагополучной пасеки направляют на технические цели или обеззараживают в автоклаве при температуре 127 °С в течение 2 ч.
Мед, полученный от больных семей, хранят в закрытой таре и используют только для пищевых целей. Использовать такой мед для подкормки пчелиных семей запрещено.
Лечение.
Больным семьям дают лечебный сироп с левомицетином и неомицином трехкратно с интервалом в 3 дня. В 1 л свежеприготовленного сахарного сиропа (1 часть сахара и 1 часть воды) добавляют 200 тыс. ME неомицина и 0,2 г левомицетина. Каждую дозу антибиотиков растворяют в 100 мл кипяченой, охлажденной до 35 °С воде, тщательно смешивают с сиропом и дают по 0,5 л на одну пчелиную семью.
pudmeda.com
📌 популярные вопросы беременных мам и ответы на них
На данной странице собраны наиболее популярные посты и комментарии наших пользователей по теме «Обнаружили Hafnia alvei». Это поможет вам быстро получить ответ на вопрос, также вы можете принять участие в обсуждении.
Девочки привет!!! У меня очень сильно начала болеть поясница, тянет низ живота и промежность болит, боже мой как она болит… особенно при ходьбе, мне даже ногу поднять тяжело, потому что от боли в промежности хочется кричать!!! Это продолжается 2 день, а накануне до этого, у меня живот болел как при месячных схваткообразно с перерывом 10 минут и опять, потом резко потянуло поясницу и низ живота,…
… девочки в последнее время начинает болеть живот(ныть)и чуть поясница болит, становится в тонус, но боли не схваткообразные… как думаете это нормально? к врачу в понедельник только..может у кого так было?
Приветик девочки… у меня вот такой вопрос… Начало болеть низ живота не постоянно… но в день пару раз ,, начинает болеть и отдает иногда в поясницу.У меня 8 акушерских недель беременности… вот хотелось бы узнать, у кого тоже болел животик, но все было хорошо)
Уже 3 дня сильно тянет низ живота.Так,будто вот вот начнутся месячные.Отдает в поясницу.Сегодня долго не могла уснуть от этой боли.Испугалась,что беременность под угрозой…С утра побежала на УЗИ.Не увидели никаких отклонений и угроз.Беременность соответствует сроку…У кого то так было?Меня напрягают очень эти боли.Срок 6-7 недель
Девочки, при беременности на ранних сроках, тянущие боли как при ПМС носят какой характер, переходный «день два тянет потом все нормально» или постоянный?
Вчера утром показал бедную полоску вечером начались боли как в первую б при угрозе схваткообразные и стало мазать бежево-коричневым. Когда лежала стихало. Тест и сегодня показал прихрак полоску. Сегодня слабые боли и продолжает мазать. Что это? Сорвалась беременность?
Беременность вносит свои коррективы не только в эмоциональный мир женщины, но и в её физиологию, заставляя организм работать по-другому. Часто эти изменения приносят с собой неприятные или даже болезненные ощущения. Они вызывают страх за себя и за будущего ребёнка, ведь трудно правильно определить причины возникающих болей. Нельзя ставить себе диагнозы, а необходимо сразу обратиться к лечащему…
Боли в животе при беременности – достаточно распространенное явление. Наверное, хоть раз каждая беременная замечала, что ноет низ живота, или немного потягивает, или что-то колет. Конечно, самолечение – это не есть хорошо, особенно во время беременности, когда можно просто упустить время. Поэтому при явных беспокойствах – сразу же к врачу. Однако бывает, что беременная будущая мама ощущает…
\ Боли в животе при беременности – достаточно распространенное явление. Наверное, хоть раз каждая беременная замечала, что ноет низ живота, или немного потягивает, или что-то колет. Конечно, самолечение – это не есть хорошо, особенно во время беременности, когда можно просто упустить время. Поэтому при явных беспокойствах – сразу же к врачу. Однако бывает, что беременная будущая мама ощущает…
Температура при беременностиСодержание:Показать содержание статьиhttp://baby-calendar.ru/zabolevaniya/temperatura/#n2http://baby-calendar.ru/zabolevaniya/temperatura/#n3Температура тела – это комплексный показатель теплового состояния организма человека. Принято считать, что нормальной является температура 36.6 градусов по Цельсию и любые отклонения в ту или иную сторону являются патологией….
Девочки !!! Девочки!!! Всем доброго времени суток! 🌞🌞 Дамы, пост будет не коротким, хочу у вас спросить может у кого что то подобное было? 🤧 дело в том что дочке уже 2 годика, а я все болею после родов ,,, сначала был изменяюсь геморрой год — вылечилась слава богу! А сейчас у меня постоянная хроническая боль ( ноющая ) в низу живота ,,, уже как год! 😰 до родов были проблемы но так редко и…
Девочки !!! Девочки!!! Всем доброго времени суток! 🌞🌞 Дамы, пост будет не коротким, хочу у вас спросить может у кого что то подобное было? 🤧 дело в том что дочке уже 2 годика, а я все болею после родов ,,, сначала был изменяюсь геморрой год — вылечилась слава богу! А сейчас у меня постоянная хроническая боль ( ноющая ) в низу живота ,,, уже как год! 😰 до родов были проблемы но так редко и…
Не могла забеременеть 3 года, в январе 2013 узнала, что у меня множественная миома — 5 узлов, 2 из них большие, 5.5 см и 4.5см. врач в ж\к сказала удалять узлы, но я на операциию не решилась, поехала в центр в екатеринбург, где уже наблюдалась 2 года. Там врач сказала, что не надо оперировать матку нерожавшим… Нужно скорее забеременеть, маленькие узлы рассосутся, а большие уменьшатся и…
При каких заболеваниях возникает боль во втором триместре у беременных: Причины боли во втором триместре у беременных: 1. Боль при ходьбе В течение беременности, суставы между тазовыми костями начинают смягчаться для подготовки к прохождению ребёночка. Во втором триместре матка увеличивается, в следствии чего изменяется центр равновесия и у вас изменяется походка. Попытка компенсировать это и…
Причины боли во втором триместре у беременных: 1. Боль при ходьбе В течение беременности, суставы между тазовыми костями начинают смягчаться для подготовки к прохождению ребёночка. Во втором триместре матка увеличивается, в следствии чего изменяется центр равновесия и у вас изменяется походка. Попытка компенсировать это и ходить так же, как вы ходили раньше, может привести к ощущению боли….
Беременность – это процесс физиологический. И в норме никаких болевых ощущений у беременной быть не должно. Если же в процесс беременности вмешивается какая-либо патология, то возможно развитие самых разнообразных патологических реакций,включая боли внизу живота или патологические выделения.Все ли будущие мамы испытывают ощущение боли в низу живота? Однако, несмотря на то, что беременность –…
Вроде появилось вдохновение на написание про роды. Про беременность здесь https://www.baby.ru/blogs/post/640434297-31177139/ и здесь https://www.baby.ru/blogs/post/644412064-31177139/Наступает 21 мая понедельник (40 недель и 1 день). Еду в роддом с направлением. Вещи взяла по минимум так как не думала рожать😂 Они мне говорят сделаем КТГ и если все хорошо пойдешь домой. Сижу счастливая что не…
Беременность где то 2-3 недели, сегодня весь день болит поясница и низ живота, а вчера при мочеиспускании было легкое жжение, но сегодня уже ничего такого нет, только низ живота болит и поясница! Блин, что это значит, у меня до этого уже было 3 ЗБ и я очень волнуюсь, пью дюфастан и фольку мультитабс В комплекс. Посоветуйте что -нибудь!
болит поясница и низ живота как при схватках… что это
Внематочная беременность срок 5-12 недель Симптомы:режущие боли в низу живота, сопровождающие кровяными выделениями темного цвета. В зависимости от того где именно прикрепилось плодное яйцо- в правой или левой маточной трубе, яичнике, печени и т.д.- боли могут возникать в разных частях живота. Это состояние всегдапредставляет угрозу для жизни мамы из-за неизбежного кровоизлияния в брюшную…
Подскажите, у меня такая ситуация. Я на 20 неделе беременности. Пролежала на дневном станционаре 10 дней. Ставили магнезию, папаверин, витаминки, физио, вообщем стандартный набор для сохранения беременности. Небольшой тонус видимо был. Последний курс лечения прошла вчера. И выписали вчера. Сегодня утром заболела поясница и не много низ живота тянет и покалывает, особенно справа. Один раз…
Девочки, я вчера жутко перепугалась.Сразу скажу, что сейчас нахожусь в другом городе, к своему врачу смогу попасть не раньше пятницы, а в этом городке такая скорая, что лучше ее не вызывать. Завтра у меня ровно 17 недель. Суть в следующем — я вчера устроила себе праздник живота — поела по кусочку копченой и соленой скумбрии, сосиски барбекю с кетчупом чили, вишню, малину, яблоки, крыжовник —…
www.baby.ru
Лактозонегативные энтеробактерии как показатель нарушения микрофлоры ЖКТ
В течение жизни по различным причинам приходится сдавать анализ кала. В том числе на дисбактериоз. Получив на руки бланк, начинаешь путаться в названиях, цифрах и степенях. А строчка «лактозонегативные энтеробактерии», вообще, ставит в тупик. Как определить какая бактерия патоген, а какая своя родная и хорошая?
Лактозонегативные энтеробактерии. Общее понятие
Запор может быть признаком повышения лактозонегативных энтеробактерий.
Лактозонегативные энтеробактерии – это группа условно-патогенных микроорганизмов различной степени патогенности.
При нормальных показателях эта микрофлора не оказывает пагубного влияния на организм. Но при дисбактериозе, количество представителей этой флоры увеличивается, вызывая нарушения в работе ЖКТ и прочих органов и систем.
Нормой у детей и взрослых считается показатель не более, чем 10*4 на 1 г каловых масс. Изменение цифр в большую сторону свидетельствует о нарушении иммунитета. Признаки превышения показателей лактозонегативных энтеробактерий:
- нарушение дефекации – как запор, так и понос;
- появление подозрительных включений в каловые массы, слизи зеленого или желтого цвета;
- боли в эпигастрии;
- метеоризм и вздутие;
- отрыжка и срыгивание пищи;
- повышения температуры не наблюдается;
- развитие аллергических реакций;
- лактозная недостаточность.
У малышей с тяжелыми формами иммунодефицита может наблюдаться проникновение патогенов в кровь сквозь стенки кишечника. Это представляет угрозу для жизни карапуза.
Лактозонегативные энтеробактерии – типичные представители
Кишечная палочка — представитель группы лактозонегативных энтеробактерий.
В бланке анализа вы увидите общие показатели этой группы и отдельно по каждому виду микроорганизмов. В группу лактозонегативные энтеробактерии входят:
- гемолизирующая кишечная палочка;
- клебсиеллы;
- протеи;
- хафнии;
- серрации;
- энтеробактеры;
- цитробакеры.
Некоторые из них в небольших количествах являются нормальными обитателями кишечника, другие – не должны присутствовать в микрофлоре человека.
Гемолизирующая кишечная палочка
Кишечная палочка может вызвать перитонит.
Кишечная палочка – это сборное название группы из более 100 разновидностей этого микроорганизма. Этот микроорганизм может жить только в бескислородной среде. Определенные штаммы являются симбионтами человека.
Они обитают в кишечнике и участвуют в процессах переваривания пищи. Некоторые виды палочки Эшериха являются патогенами.
Например, гемолизирующая ее разновидность. Хотя этот штамм может существовать и ничем себя не обнаруживать. Как только иммунитет падает, кишечная палочка начинает размножаться и может вызвать следующие заболевания:
- патологии мочевыводящей системы – пиелонефрит, цистит, уретрит;
- заболевания репродуктивной системы – аднексит, кольпиты, орхиты;
- перитонит;
- септические заболевания;
- менингит.
Симптоматика дисбактериоза с преобладанием гемолизирующей палочки Эшериха:
- нарушение дефекации;
- вздутие;
- отрыжка;
- общая слабость;
- утомляемость;
- лихорадка;
- у малышей в фекалиях обнаруживается слизь зеленого цвета;
- снижение показателей АД.
При поражении прочих систем симптоматика будет отвечать тем заболеваниям, которые вызывала кишечная палочка.
Клепсиелла
Клепсиелла вызывает пневмонию.
Клепсиеллы – это собирательное название штаммов условно-патогенных микроорганизмов. Относятся к факультативным анаэробам.
То есть могут жить как в присутствии кислорода, так и без него. Разновидности этого микроорганизма могут вызвать следующие патологии:
- легкие – вызывает пневмонию;
- конъюнктивит;
- пищеварительная система;
- менингит;
- заболевание мочеполовой сферы.
В 1 г. каловых масс должно быть не более 10*5 микроорганизмов. Клепсиеллы являются типичными представителями внутрибольничных инфекций. Источником инфицирования является носитель микроорганизма. С момента заражения до первых симптомов может пройти несколько недель.
При поражении легких наблюдается повышение температуры, кашель поначалу сухой, затем влажный с отхождением зловонной мокроты с кровью. Без лечения развивается сепсис. Смертность составляет 36%. При локализации очага в носу наблюдается зловонные ринореи, заложенность носа, температура. При поражении системы ЖКТ развивается симптоматика острого колита или энтероколита.
Протеи
При увеличении протогенов в организме возникает дисбактериоз.
Протеи – группа факультативно анаэробных микроорганизмов. В небольших количествах обитает в кишечнике человека.
Допустимое количество составляет не более 10*4 шт. на 1 г. фекальных масс. Источником инфекции является больной человек. С момента заражения до появления первых симптомов от 6 часов до 3 суток.
При поражении желудка и кишечника развивается расстройства дефекации, повышается температура тела, частое испражнение крайне зловонными фекальными массами. Кроме этого, развивается острый энтероколит.
При незначительном повышении количества патогенов развивается дисбактериоз. Основной признак поражения протеем – это водянистый зловонный стул более 2 раз в сутки.
При попадании в мочевыводящую или репродуктивную системы наблюдается симптоматика, характерная для воспалительных процессов в этих органах.
Хафнии или гафнии
Хафнии – микроорганизмы, относящиеся к классу энтеробактерии. В настоящее время описан всего 1 вид Н. alvei. Относится к факультативным анаэробам и редко проявляет патогенные свойства. Способна вызывать обострение хронических заболеваний ЖКТ, мочевыводящей системы, септические патологии.
Этот микроорганизм трудно диагностировать, также он редко выступает единственной причиной заболевания. Признаки поражения гафнией сходны с симптоматикой сальмонеллеза – высокой температурой, болями. Зачастую этот патоген путают с кишечной палочкой.
Лечение заболеваний, вызванных хафнией, затрудненно, так как микроорганизм устойчив к антибиотикам последних поколений включая цефаллоспорины.
Серрации
Энтеробактер — обитает в толстом кишечнике человека.
Серрации – это широко распространенный микроорганизм. Является факультативным анаэробом и образует природный краситель красного цвета.
До 60 годов прошлого столетия колонии серрации использовались в качестве красящего вещества для проверки циркуляции воздуха.
Доказано, что 10% внутригоспитальных инфекций вызывают именно эти микроорганизмы. Смертность при поражении этой бактерией составляет 26%.
Серрации способны к передаче через предметы гигиены, катетеры, некачественно обработанный медицинский инструмент, руки медицинского персонала.
Энтеробактеры
Энтеробактер – обитает в толстом кишечнике человека. Считается условно-патогенной бактерией и способен вызывать различные заболевания системы ЖКТ, мочевыводящей и дыхательной системы.
В анализе мочи этот микроорганизм должен содержаться не более 10*5 шт. на 1 мл биологической жидкости. В анализе кала – не более 10*4. Если в моче повышен уровень лейкоцитов, то уровень энтеробактера 10*4 единицы является критичным. Признаки поражения энтеробактером:
- тошнота;
- рвота;
- повышение температуры;
- озноб;
- лихорадочное состояние;
- боли в поясничной области.
Лечение проводится при помощи антибиотиков, бактериофагов, препаратов, улучшающих микрофлору организма.
Цитробактеры
При поражении цинтробактером появляются боли в животе.
Цинтробактер – в норме обитает в кишечнике человека. Но при этом является возбудителем гастроэнтеритов, урологических заболеваний, воспалительных процессов в мозге, сепсиса.
Эти бактерии вызывают тяжелейшие отравления при нарушении технологии приготовления пищи.
Возбудители передаются контактным и орально-фекальным путем. При поражении цинтробактером появляются следующие симптомы:
- признаки гастрита – тошнота, рвота;
- боли в животе;
- повышение температуры до 38 градусов;
- стул может быть до 10 раз в сутки;
- в фекальных массах обнаруживают слизь.
Бактерия поддается лечению антибиотиками, бактериофагами. Дополнительно показано назначение пробиотиков.
Как выявить патогены?
Для диагностики дисбактериоза следует провести исследование каловых масс. Правила подготовки к исследованию:
- Забор материала проводят до начала приема антибактериальных препаратов или в промежуток между лечебными курсами. Последний прием антибиотиков должен быть не ранее, чем за 12 часов до забора.
- Аналогичная тактика при приеме препаратов, улучшающих микрофлору человека.
- За 3 суток исключить пищу, вызывающую брожение, алкогольные напитки, слабительные препараты.
- Для исследования требуется кал после естественной дефекации. Не годятся фекальные массы, полученные при промывании кишечника и после слабительных препаратов.
- Собранные фекалии следует доставить в лабораторию не позднее чем через 2 часа после забора проб. При подозрении на поражение других систем организма проводится бактериальный посев мочи, крови, спинномозговой жидкости.
Лактозонегативные энтеробактерии – это нормальные обитатели нашего организма. Но они могут быть смертельно опасными. Поэтому при хронизации заболеваний воспалительного характера следует сдать анализы и определить возбудителя.
Подробно о кишечной палочке — в тематическом видеоролике:
Заметили ошибку? Выделите ее и нажмите Ctrl+Enter, чтобы сообщить нам.
Расскажите друзьям! Расскажите об этой статье своим друзьям в любимой социальной сети с помощью социальных кнопок. Спасибо!
Поделиться
Поделиться
Твит
Телеграм
Класс
Вотсап
pishhevarenie.com
Штамм бактерий hafnia alvei, обладающий способностью продуцировать термолабильный лт-энтеротоксин
Предлагаемое изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано для получения термолабильного энтеротоксина (ЛТ-энтеротоксина) и анатоксина Hafnia alvei при производстве вакцин.
Техническим результатом изобретения является штамм Hafnia alvei №294, который выделен от больного с кишечной инфекцией в 2011 году в Муниципальном учреждении здравоохранения города Ишимбай республики Башкортостан, депонирован в Государственной коллекции патогенных микроорганизмов ФГБУ «Научный центр экспертизы средств медицинского применения» Минздравсоцразвития России под номером 294, обладает высокой способностью продуцировать термолабильный ЛТ-энтеротоксин.
Штамм Hafnia alvei ГКПМ №294 характеризуется следующими признаками.
По биохимическим свойствам штамм относится к семейству Enterobacteriaceae рода Hafnia alvei, поскольку при тестировании на микробиологическомй тест-системе версии «Vitek 2 Sistems: 04/01» соответствовал биохимическим свойствам этого вида.
Культуральные признаки.
Растет на обычных универсальных плотных питательных средах с образованием характерных изолированных колоний желтоватого оттенка. В мясопептонном бульоне вызывает равномерное помутнение с выпадением осадка.
Изучение факторов вирулентности показало, что штамм является редким, обладающим комплексом факторов патогенности, способным вызывать острую токсическую пневмонию мышей (гибель животных в течение 3 часов), некроз кожи кролика (3,5 см в диаметре), отек лап мышей (с разницей 95 мг), петля тонкого кишечника кролика 1,2(V/L), обладает (альфатиолзависимый, энтерогемолизин), адгезивной (положительная Д-маннозочувствительная и Д-маннозорезистентная реакция с эритроцитами цыпленка), антиинтерфероновой, антилизоцимной активностями, способный в протистоцидном тесте вызывать гибель инфузорий-туфелек в течение 45 секунд.
Данный штамм рекомендуется в качестве суперпродуцента термолабильного ЛТ-энтеротоксина и как штамм, обладающий комплексом факторов патогенности. Штамм можно использовать в производстве анатоксинов и для получения антитоксической сыворотки.
Способы определения активности ЛТ-энтеротоксина.
Субплантарное введение мышам весом 15-16 г 0,05 мл центрифугата 20-часовой бульонной культуры вызывает отек лапки более 100 мг. Аксенова Е.В., 1980 г.
Интраназальное введение 0,05 мл 20-часовой бульонной культуры вызывает острую токсическую пневмонию у белых мышей-самцов весом 15-16 г (гибель в течение 4 часов). Войно-Ясенецкая Н.К., 1957 г.
Внутримышечное введение 300 млн микробных клеток 20-часовой бульонной культуры вызывает некроз кожи кролика диаметром 3 см.
В опыте петля тонкой кишки кролика при введении 80 млн м.т. 20-часовой бульонной культуры дает положительный результат (V/L=l,2).
Гретый при 56°С в течение 45 мин центрифугат 20-часовой бульонной культуры вызывает отек лапки мышей до 30 мг, не вызывая некроза кожи кролика. Гретая при 100°С 20-часовая культура не вызывает накопления жидкости в изолированной петле тонкого кишечника кролика (V/L=0,3).
Условия хранения культуры после лиофильной сушки в ампуле или выращенной при 37°С на 0,3%-ном МПА (рН 7,2-7,4), залитым стерильным вазелиновым маслом, при температуре 4°С.
Среды для размножения — бульон Хоттингера (рН 7,2), мясопептонной агар, содержащий 5% эритроцитов кролика при температуре 37°С в течение 24 часов.
Генетические особенности: HLy+, Ent+, MS+, MR+, LT+, ALA+, AKA+. Устойчив к ампициллину, ампициллину/сульбактам, цефуроксимаксетину, чувствителен к фторхинолону.
Пример 1.
0,1 мл 1 млрд суспензии суточной агаровой культуры в физиологическом растворе сеют в стерильный бульон Хотингера (5 мл рН 7,2), инкубируют в термостате при 37°С в течение 20 часов, центрифугируют при 6000 об/мин в течение 7 минут. Полученную надосадочную жидкость (центрифугат) в объеме 0,05 мл вводят субплантарно в заднюю левую лапку мышей-самцов весом 15-18 г. Через 24 часа животных умерщвляют эфиром и ампутированные по голеностопному суставу лапки взвешивают на торсионных весах, при этом центрифугат штамма Hafnia alvei №294 давал разницу между левой и правой лапками не менее 100 мг, остальные 20 штаммов, способные продуцировать ЛТ-энтеротоксин от 65 до 90 мг. Контроли — нативный стерильный бульон Хоттингера (рН 7,2) и гретый при 56°С центрифугат 20-часовой бульонной культуры 30-35 мг, соответственно.
Результаты приведены в таблице.
Пример 2.
0,1 мл 1 млрд суспензии суточной агаровой культуры сеют в бульон Хоттингера (рН 7,2), инкубируют в термостате при 37°С в течение 20 ч и 80 млн м.т. суспензию в объеме 1 мл вводят в сегмент изолированной петли тонкого кишечника кролика. Через 16 часов животных умерщвляют воздушной эмболией и рассчитывают соотношение объема экссудата к длине сегмента (V/L). При этом 20-часовая бульонная культура штамма Hafnia alvei №294 оказалась способной давать накопление жидкости в большом количестве и показатель V/L составил 1,2. У остальных 20 штаммов, способных продуцировать ЛТ-энтеротоксин, показатель V/L колебался в пределах 0,9-1,0. При введении стерильного бульона Хоттингера и гретой при 100°С 20-часовой бульонной культуры отношение объема накопленной жидкости к длине сегмента составило 0,25 и 0,3 соответственно.
|
edrid.ru